【摘 要】
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目的:探讨柚皮素（Naringenin,NAR）对大鼠心肌缺血再灌注（ischemia reperfusion,I/R）损伤的抗氧化作用和相关信号传导机制。研究方法:采用随机数表抽样法将32只成年雄性SD大鼠分为假手术组（SHAM组）、缺血再灌注组（I/R组）、柚皮素预处理+I/R组（NAR组）、NAR预处理+I/R+（PI3K/AKT信号通道抑制剂）LY294002组（NL组）。在I/R处理前7
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目的:探讨柚皮素（Naringenin,NAR）对大鼠心肌缺血再灌注（ischemia reperfusion,I/R）损伤的抗氧化作用和相关信号传导机制。研究方法:采用随机数表抽样法将32只成年雄性SD大鼠分为假手术组（SHAM组）、缺血再灌注组（I/R组）、柚皮素预处理+I/R组（NAR组）、NAR预处理+I/R+（PI3K/AKT信号通道抑制剂）LY294002组（NL组）。在I/R处理前7天,给予NAR组及NL组腹腔注射NAR(100mg.kg-1.d-1),在术前30min给予NL组腹腔注射LY294002(0.3mg.kg-1),随后通过结扎冠状动脉前降支进行I/R,SHAM组不结扎,其余3组大鼠均进行结扎30min再灌注120min,I/R成功后处死各组大鼠采集标本,HE染色观察心肌病理改变,TUNEL荧光染色观察心肌细胞凋亡水平及通过相应的公式计算凋亡率;试剂盒检测血清LDH、CK活性水平,心肌组织中ROS、MDA含量和SOD活性水平;Western blot检测心肌组织中AKT、p-AKT、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平;RT-PCR技术检测Nrf2、HO-1基因的转录水平。研究结果:（1）SHAM组HE染色显示心肌纤维排列整齐,心肌细胞结构完整,无炎症细胞浸润;TUNEL染色显示几乎无绿色荧光染色细胞。（2）与SHAM组比较,I/R组HE染色显示心肌细胞水肿、结构模糊、破裂,心肌纤维排列杂乱,大量炎性细胞浸润;TUNEL染色显示绿色荧光染色细胞显著增加;心肌细胞凋亡率及血清中LDH、CK活性水平明显升高;心肌组织中ROS、MDA含量显著增加（P＜0.05）,SOD活性水平显著降低（P＜0.05）;心肌组织中AKT的表达无明显差异（P＞0.05）,p-AKT、Nrf2、HO-1、NQO1表达水平轻度升高,差异无统计学意义（P＞0.05）。（3）与I/R组比较,NAR组HE染色显示心肌细胞水肿、破坏减少,心肌纤维排列稍整齐,炎性细胞明显减少;TUNEL染色显示绿色荧光染色细胞明显减少;心肌细胞凋亡率及血清LDH、CK活性水平明显降低（P＜0.05）;心肌组织中ROS、MDA含量显著减少（P＜0.05）,SOD活性水平增加（P＜0.05）;心肌组织AKT的表达无明显差异（P＞0.05）,p-AKT、Nrf2、HO-1、NQO1表达水平显著升高（P＜0.05）。（4）与NAR组比较,NL组HE染色显示心肌细胞水肿、破坏增多,心肌纤维排列更紊乱,炎症细胞增多;TUNEL染色显示绿色荧光染色细胞显著增加;心肌细胞凋亡率及血清LDH、CK活性水平明显升高（P＜0.05）;心肌组织中ROS、MDA含量显著升高（P＜0.05）,SOD活性水平显著降低（P＜0.05）;心肌组织AKT的表达无明显差异（P＞0.05）,p-AKT、Nrf2、HO-1、NQO1表达水平明显降低（P＜0.05）。结论:氧化应激是心肌I/R损伤的原因之一,NAR对心肌I/R损伤具有明显的保护作用,可通过上调PI3K/AKT/Nrf2通路,促进HO-1、NQO1、SOD等抗氧化物质的表达水平和ROS、MDA等氧化物质的清除。
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