【摘 要】
:
目的肝细胞癌(HCC)是世界上最常见的癌症之一,也是癌症死亡的主要原因之一,我国是全球肝癌发病率最高和病死数最多的国家。目前全球范围内肝癌的发病率仍呈上升趋势,而人们对肝癌发病机制的认识并不完整,临床上肝癌治疗的效果并不理想,死亡率仍居高不下。因此,急需寻找新的抑制肝癌的药物候选分子、并在分子水平揭示其杀伤肝癌细胞的机理,为研发更加有效的药物和设计更加合理的治疗方案提供实验数据支持和理论基础。本工
论文部分内容阅读
目的肝细胞癌(HCC)是世界上最常见的癌症之一,也是癌症死亡的主要原因之一,我国是全球肝癌发病率最高和病死数最多的国家。目前全球范围内肝癌的发病率仍呈上升趋势,而人们对肝癌发病机制的认识并不完整,临床上肝癌治疗的效果并不理想,死亡率仍居高不下。因此,急需寻找新的抑制肝癌的药物候选分子、并在分子水平揭示其杀伤肝癌细胞的机理,为研发更加有效的药物和设计更加合理的治疗方案提供实验数据支持和理论基础。本工作是在前期研究的基础上,进一步揭示结晶紫(Gentian violet,以下简称GV)这一独特的非处方药物分子对肝癌的抑制作用及其分子机制。为这一颇具优势的药物在治疗肝癌方面的临床转化提供实验依据。方法1、在肝细胞癌细胞系SK-hep-1和SMMC-7721中,利用检测细胞存活率、流式细胞检测凋亡标记等方法确定GV对HCC细胞的杀伤及诱发凋亡作用;用生长曲线、克隆形成实验、划痕实验、侵袭实验确定GV对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。2、对用结晶紫处理后HCC细胞系SK-Hep-1的转录组数据进行信号通路富集分析,筛选结晶紫在HCC细胞中发挥杀伤作用的关键信号通路;3、通过研究铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)对GV所诱发的HCC细胞死亡及抑制增殖/迁移/侵袭效应的挽救作用,确定GV在HCC中诱发铁死亡;4、利用si RNA沉默、流式细胞检测、RT-PCR、Western Blot等方法揭示在GV作用下所诱发铁死亡信号通路的关键蛋白;5、建立裸鼠HCC荷瘤模型,确定结晶紫对体内肝癌肿瘤生长的影响,并检测关键蛋白在瘤体组织中的表达;6、利用TCGA数据库筛选肝癌的铁死亡相关预后基因并构建多基因预后模型。结果1、结晶紫在SK-hep-1和SMMC-7721细胞中,具有显著的剂量依赖性的杀伤作用,以及抑制增殖、迁移及侵袭的作用。GV可诱发凋亡;2、在SK-Hep-1细胞系中,对结晶紫处理组的转录组数据差异基因及信号通路富集分析显示,结晶紫的作用可能与激活铁死亡信号通路相关;3、铁死亡抑制剂Fer-1对GV抑癌作用的部分挽救:即Fer-1可减少GV对HCC细胞的杀伤率、减轻对HCC的增殖、迁移及侵袭的抑制作用,说明在GV诱发的HCC死亡现象中,除凋亡外也包括铁死亡;4、GV可同时增强泛素连接酶MDM2和抑癌蛋白p53的表达,提示在GV作用下MDM2和p53负反馈回路的分离和GV-p53/MDM2-铁死亡信号轴的建立。5、小鼠成瘤实验结果显示,GV可抑制肝癌肿瘤生长,且抑制肿瘤效果随着给药浓度加大而增强,小鼠对治疗剂量的GV耐受性良好。免疫组化结果显示GV可增强瘤体组织中MDM2和p53的表达。6、通过TCGA数据库中肝癌铁死亡的生物信息分析,构建了多基因预后风险模型,构建了整合风险模型和临床特征的诺模图,对肝癌患者的生存结局进行了量化。结论结晶紫具有显著的对肝细胞癌的杀伤作用、对增殖/生长/迁移及侵袭的抑制作用、以及动物全身用药下的抑癌作用。GV对HCC的杀伤既包括凋亡也包括铁死亡。诱发铁死亡的分子机制与增强MDM2和抑癌蛋白p53表达、建立GV-p53/MDM2-铁死亡信号轴有关。铁死亡相关基因的分析可建立对患者生存结局量化的模型。本工作使GV研究达到从“体外实验到动物实验”、从“局部外用到全身用药”的推进;为这一颇具优势的药物在治疗肝细胞癌方面的进一步研究提供实验依据。
其他文献
剑麻(Agave sisalana Perr.ex Engelm)是热带地区重要的经济作物,它是硬质纤维的主要来源。烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)引起的斑马纹病(Zebra morbus)能够严重影响剑麻生产。烟草疫霉属于植物病原卵菌。近年来研究发现,在植物病原卵菌侵染植物时会释放许多效应蛋白,干扰和抑制宿主植物的免疫系统。RxLR是卵菌数量最多的一类效应蛋白,该类效应
通过分析当前铁路集装箱运输在经营管理、生产作业、安全管理、人员素质等方面存在的制约因素,剖析内在原因,针对性提出对应上述制约因素的铁路集装箱运输发展建议,包括推动铁路集装箱运输企业持续深化现代公司制发展、采取均衡性发展策略、深化“铁”字号集装箱运输关联企业分工协作、挖潜作业效率、运用专业化物流技术、深化服务改革、创新服务发展理念、探索装卸企业合作新模式、创新专用线(专用铁路)协作新方式、强化货物混
花色苷是一类水溶性类黄酮多酚色素的俗称,其广泛存在于紫玉米、桑葚、黑枸杞等颜色鲜艳的植物中。花色苷具有出色的抗氧化、抗炎症、抗衰老,保护视力等良好的生物活性。然而近年花色苷的广泛应用受到了部分限制,首先是富含花色苷的生物资源的严重浪费,其次是花色苷稳定性较差,易受到温度、湿度、p H、光照等因素的影响。因此,为了提高花色苷利用率和拓宽花色苷的应用范围。本论文研究了新品种紫玉米苞叶中花色苷的提取、鉴
为研发一种可减少RT-PCR假阴性结果的植物病毒检测方法,参考已报告的植物内参引物和病毒引物,从而合成植物内参引物和病毒引物。将植物内参引物和病毒引物放入同一个反应中进行双重RT-PCR扩增,对反应体系进行优化,并进行应用检测。甘蔗条纹花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)最适引物终浓度为0.8μmol/L,甘蔗内参最适引物终浓度为0.2μmol/L,在
银川市实验中学立足校情大胆实践,探索出一条“特色立校,文化兴校”的艺术特色办学之路。文章从利用多维教育政策、构建多元课程体系、开展多样特色活动、建立多重评价体系四个方面介绍学校多样化办学的实施路径。
油茶(Camellm oleifera)属于山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia)植物,常绿灌木或小乔木,人工种植林通常控制树高为2-3m,海南地区自然生长情况下可高达4-8m,树皮淡褐色,粗糙。海南油茶又名海南山柚,目前发现海南山柚有两个品种,即棕色粗糙果皮和青色果皮两种,经分类学鉴定为“青果油茶Camellia vietnamensis T.C.Huang ex Hu”和“糙果油
目的探讨夜眠时长与孕前午睡是否对孕妇疲劳产生影响,且该影响起始于孕晚期还是孕中期,并探究其发生发展的病理生理学基础和分子遗传学机制,做到早发现,早干预孕妇疲劳,为优生优育提供新思路。方法本研究分为两部分:(1)2020年1月~12月于厦门医学院附属第二医院就诊的孕晚期(孕28周~分娩)孕妇490例,收集其一般人口学信息与临床资料,记录当前有效夜眠时长与孕前是否午睡。排除3例缺失夜眠时长样本,有效样
目的失眠患者易患脑小血管病(cerebral small vessel disease,CSVD)。失眠可能增强机体炎症反应,而炎症可促进CSVD的发生发展。本研究通过评估CSVD患者睡眠情况,并对其血清脂质运载蛋白2(lipocalin 2,LCN2)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis f
近几十年来土壤重金属污染是人们关注的重要的环境问题。铅是土壤中无法自然降解的重金属之一,会以各种形态被土壤吸附和固定。土壤中铅的化合物溶解度很低,迁移性很弱,而进入土壤的铅绝大部分会存在表面土壤中。不同的土壤土壤团聚体存在着较大差异,组成性质的差异导致了铅在土壤中的固定和吸附情况。不同的耕作使用方式,会影响土壤以及其团聚体的理化性质,由于不同粒径团聚体的有机质、阳离子交换量、游离氧化铁等理化性质差
由柑橘黄单胞菌芒果致病变种(Xanthomonas critis pv.mangiferaeindicae,Xcm)引起的细菌性角斑病可危害芒果的枝、叶、花和果实等,尤其果实受害后轻则留下病斑影响果实品质及后期商品销售,重则落果造成产量降低,近年已成为生产上的主要病害之一。解析芒果的抗病机制对病害防治策略的制定具有重要意义。本研究以高抗(热农1号)和高感(凯特)细菌性角斑病的芒果品种为材料,通过防