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【目的】
探讨EME1在非小细胞肺癌中的表达及对肺癌细胞的增殖、凋亡、迁移的作用。
【方法】
1.从癌症基因组图谱TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中下载肺腺癌及鳞癌RNA测序数据，通过perl及R语言进行数据处理及可视化，比较肺癌与正常组织中EME1的表达情况。
2.收集广东医科大学附属医院2017年10月至2018年3月胸外科手术切除后确诊为非小细胞肺癌的肺癌组织及相对应的癌旁肺组织标本。
3、采用免疫组织化学技术检测组织芯片肺癌组织及相对应的癌旁肺组织EME1蛋白的表达。
4、采用免疫印迹法(WB)方法检测8例肺癌组织及相对应的癌旁肺组织的EME1蛋白的表达，以及检测肺癌细胞系H1299,A549,H838,PC9中EME1蛋白的表达。
5、RT-PCR检测肺癌细胞系H1299,A549,H838,PC9的EME1mRNA的表达。
6、采用RNAiMAX转染试剂分别向肺癌H1299细胞转染EME1siRNA及ControlsiRNA，设立三组，EME1siRNA293实验组,EME1SiRNA847实验组，ControlsiRNA阴性对照组。并采用免疫印迹法(WB)和RT-PCR检测转染效率。
7、采用CCK8实验检测肺癌H1299细胞分别转染EME1siRNA293和ControlsiRNA后的增殖和生长能力。
8、采用AnncxinV-FITC/PI双标记流式细胞术检测肺癌H1299细胞分别转染EME1siRNA293和ControlsiRNA后的凋亡率。
9、采用Transwell实验检测肺癌H1299细胞分别转染EME1siRNA293和ControlsiRNA后的迁移能力。
【结果】
1、蛋白免疫印迹实验结果显示，在8例肺癌患者组织标本中，7例肺癌组织中的EME1蛋白表达水平较癌旁肺组织高，提示EME1蛋白在肺癌组织中呈高表达。
2、组织芯片免疫组织化学(IHC)实验结果显示在30例肺癌细胞及癌旁肺组织标本中，EME1蛋白在肺癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁肺组织中阳性表达率。
3、RT-PCR实验结果显示，在肺癌细胞系A549,H1299,H838,PC9中，H1299细胞株的EME1mRNA的表达水平相对最高，蛋白免疫印迹实验结果显示H1299细胞株的EME1蛋白表达水平相对最高。
4、CCK8实验结果显示，肺癌H1299细胞转染EME1siRNA293组的吸光率较阴性对照组显著减少，差异具有统计学意义(P＜0.01)。异具有统计学意义(P
5、AnncxinV-FITC/PI双标记流式细胞术结果显示，肺癌H1299细胞转染EME1siRNA293组的凋亡率较阴性对照组显著上升，差异具有统计学意(P＜0.05)。
6、Transwell实验结果显示，肺癌H1299细胞转染EME1siRNA293与阴性对照组对比，穿膜细胞数明显减少，差异具有统计学意义(P＜0.05)。差异具有
【结论】
本研究首次发现EME1蛋白在非小细胞肺癌中呈高表达，EME1的下调能显著抑制肺癌细胞株H1299的增殖，增加其凋亡，及抑制其迁移，可能在非小细胞肺癌的发生发展中起到了促进的作用，从而可能为肺癌的早期诊断和治疗提供新靶点。
探讨EME1在非小细胞肺癌中的表达及对肺癌细胞的增殖、凋亡、迁移的作用。
【方法】
1.从癌症基因组图谱TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中下载肺腺癌及鳞癌RNA测序数据，通过perl及R语言进行数据处理及可视化，比较肺癌与正常组织中EME1的表达情况。
2.收集广东医科大学附属医院2017年10月至2018年3月胸外科手术切除后确诊为非小细胞肺癌的肺癌组织及相对应的癌旁肺组织标本。
3、采用免疫组织化学技术检测组织芯片肺癌组织及相对应的癌旁肺组织EME1蛋白的表达。
4、采用免疫印迹法(WB)方法检测8例肺癌组织及相对应的癌旁肺组织的EME1蛋白的表达，以及检测肺癌细胞系H1299,A549,H838,PC9中EME1蛋白的表达。
5、RT-PCR检测肺癌细胞系H1299,A549,H838,PC9的EME1mRNA的表达。
6、采用RNAiMAX转染试剂分别向肺癌H1299细胞转染EME1siRNA及ControlsiRNA，设立三组，EME1siRNA293实验组,EME1SiRNA847实验组，ControlsiRNA阴性对照组。并采用免疫印迹法(WB)和RT-PCR检测转染效率。
7、采用CCK8实验检测肺癌H1299细胞分别转染EME1siRNA293和ControlsiRNA后的增殖和生长能力。
8、采用AnncxinV-FITC/PI双标记流式细胞术检测肺癌H1299细胞分别转染EME1siRNA293和ControlsiRNA后的凋亡率。
9、采用Transwell实验检测肺癌H1299细胞分别转染EME1siRNA293和ControlsiRNA后的迁移能力。
【结果】
1、蛋白免疫印迹实验结果显示，在8例肺癌患者组织标本中，7例肺癌组织中的EME1蛋白表达水平较癌旁肺组织高，提示EME1蛋白在肺癌组织中呈高表达。
2、组织芯片免疫组织化学(IHC)实验结果显示在30例肺癌细胞及癌旁肺组织标本中，EME1蛋白在肺癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁肺组织中阳性表达率。
3、RT-PCR实验结果显示，在肺癌细胞系A549,H1299,H838,PC9中，H1299细胞株的EME1mRNA的表达水平相对最高，蛋白免疫印迹实验结果显示H1299细胞株的EME1蛋白表达水平相对最高。
4、CCK8实验结果显示，肺癌H1299细胞转染EME1siRNA293组的吸光率较阴性对照组显著减少，差异具有统计学意义(P＜0.01)。异具有统计学意义(P
5、AnncxinV-FITC/PI双标记流式细胞术结果显示，肺癌H1299细胞转染EME1siRNA293组的凋亡率较阴性对照组显著上升，差异具有统计学意(P＜0.05)。
6、Transwell实验结果显示，肺癌H1299细胞转染EME1siRNA293与阴性对照组对比，穿膜细胞数明显减少，差异具有统计学意义(P＜0.05)。差异具有
【结论】
本研究首次发现EME1蛋白在非小细胞肺癌中呈高表达，EME1的下调能显著抑制肺癌细胞株H1299的增殖，增加其凋亡，及抑制其迁移，可能在非小细胞肺癌的发生发展中起到了促进的作用，从而可能为肺癌的早期诊断和治疗提供新靶点。