随着流感病毒的抗原漂移和耐药株的出现,疫苗及部分药物的有效性在不断降低,寻找新型抗流感病毒的活性物质成为亟待解决的问题。受到机体阻碍病原体入侵宿主细胞的天然物理屏障启发,作为粘蛋白模拟物的抗流感病毒仿生药物设计成为目前研究的热门领域。本课题拟使用人血清白蛋白为骨架,将唾液酸衍生物作为其表面糖基修饰物,制备具有抗流感病毒作用的新型天然粘蛋白类似物。采用三氯甲基硅烷/氯化铋反应体系提高单体唾液酸C-2位氯取代中间体的收率;经过C-2位叠氮基取代、铜催化的叠氮-炔基Husigen环化加成反应、脱除保护基等步骤,先后合成了三氮唑连接的唾液酸衍生物SN与SGN,再以己二酸二琥珀酰亚胺酯作为连接臂,将二者分别与人血清白蛋白偶联,先后合成了缀合物HS13与缀合物HGS20两种新型粘蛋白类似物,并分别以单体的SA为参照,对缀合物进行表征及抗病毒活性评价。MALDI-TOF-MS结果显示,在HS13与HGS20的蛋白骨架上分别成功偶联约13个与20个唾液酸苷单体。血凝抑制实验结果显示,相较于单体唾液酸,两种多价唾液酸蛋白缀合物抗流感病毒的作用随价数的提高均有明显增强。表面等离子体共振实验结果显示,SA对HA、NA的亲和力强度分别为3.59 mM与4.43 m M;HS13对HA与NA的亲和力虽然达到微摩尔水平,但仅有较弱的亲和力;HGS20对HA、NA的亲和力强度分别为1.5μM、4μM,相较于SA,缀合物中的单位唾液酸苷活性各提高120倍与55倍;在此基础上,进一步评价了缀合物HGS20与耐药突变株H3N2-H274Y蛋白的亲和力,结果显示,HGS20对H3N2-H274Y的亲和力强度为1μM,相较于SA对H3N2-H274Y的亲和力强度2.63 m M,单位唾液酸苷与受体的亲和力提高了131倍。上述结果阐明了基于粘蛋白的多价结合理论制备新型多价三氮唑连接唾液酸蛋白缀合物的策略,可以有效提高缀合物与其流感病毒表面受体蛋白的亲和力,这些发现为我们后续研制具有更高抗流感病毒耐药株活性的化合物指明了方向,也为开发模拟粘蛋白结构的抗流感病毒药物与生物屏障奠定了理论基础。