辣根植物杀虫杀菌活性精油的提取及应用研究

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植物精油是一类常温下可以挥发的、外观似油状的液体。由于它具有很强的生物活性,现今已成为植物化学、农药学和医学研究的热点。部分植物精油对仓储害虫、土传病原真菌、土传线虫具有较强的熏蒸生物活性,有望替代现今所使用的熏蒸剂。本文对具有替代甲基溴潜力的辣根精油进行了一系列的研究-----辣根杀虫杀菌精油的提取、分离鉴定;有效活性成分对仓储害虫、病原真菌、土传线虫等的熏蒸生物活性;有效活性成分对不同作物种子进行熏蒸处理后残留及药害等。其主要结果如下:1.采用四因素四水平正交试验设计对辣根精油进行提取工艺研究,辣根精油前体物质硫甙最佳水解条件是:每公斤药材加入20mg的特丁基对苯二酚,水解120min,水解温度为65℃,pH为4。然后再接通水蒸汽蒸馏装置蒸馏120min后,用二氯甲烷萃取,萃取液浓缩,得到精油的含量为7.62%。2.利用GC和GC-MS对具有良好熏蒸活性的辣根精油进行分析,确定其精油中最高含量的有效成分为烯丙基异硫氰酸酯(AITC)。3.建立了关于AITC的快速定量分析检测方法,包括紫外分光光度法和气相色谱法。其中建立的气相色谱法具有快速、准确等特点,适用于测定水蒸气蒸馏萃取浓缩液中的AITC的含量。其最佳色谱条件如下:GC-9A气相色谱仪,柱子:OV-1701(DB-17)30m*0.32mm*0.5μm,FID检测器,进样口温度250℃,柱温60℃,检测器温度250℃,载气:N2,流速:1ml/min,补偿气:29ml/min,空气:300ml/min,H2:30ml/min,分流比:1:20,进样量:1μl。4.测定了辣根精油活性成分AITC生物活性。当AITC的浓度为3μg/ml时,对玉米象、赤拟谷盗、谷蠹、书虱的熏蒸活性均接近100%:AITC的浓度达到3.32μg/ml时,对水稻纹枯、山药枯萎、棉花黄萎和棉花红腐四种土传病原真菌的抑制率均在99%以上,当AITC的浓度为1.43μg/ml时,对苹果青霉、草莓灰霉、葡萄孢灰霉和小麦赤霉、甘蔗凤梨、玉米小斑、棉花炭疽、花生白绢8种非土传病原真菌的抑制率也均在95.0%以上。5.辣根精油活性成分AITC对番茄根结线虫室内盆栽生物活性测定结果表明:熏蒸杀番茄根结线虫每公斤土壤的致死中量为164.9μl。当辣根精油单体AITC的浓度为5μg/mL时,对棉花苗期病害(棉花炭疽、棉花红腐、棉花黄萎)的防治效果可达80%左右。6.辣根精油主要活性成分AITC配制成不同浓度,对大米、水稻种子、小麦种子、红枣、木耳、烟草熏蒸处理后进行残留及降解研究。结果表明:在供试浓度范围内,AITC在红枣、大米、木耳上的残留量很低,且降解速度也相对较快,其残留浓度远低于AITC安全使用范围,表明用烯丙基异硫氰酸酯熏蒸处理过的红枣、大米、木耳,不会对人体产生任何毒害作用,可安全食用。AITC在表面粗糙的水稻种子、烟草上的残留量比较高,且持效期长,有利于种子的长期保存。7.辣根精油活性成分AITC对不同的作物种子熏蒸时,其使用浓度有一定的限制。用于熏蒸禾谷类种子特别要谨慎,当使用熏蒸浓度超过10μg/ml,水稻种子,稗草种子,玉米种子几乎不发芽,小麦种子的发芽率也很低。黄瓜、西瓜种子在熏蒸后间隔10天左右,可以正常发芽,棉花、绿豆、黄豆、豌豆种子发芽率无明显影响。
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