目的：　　 细胞凋亡在生物有机体的正常生理调节和病理过程中都有十分重要作用,近来研究表明卵巢早衰(POF)的发病机制是由于卵母细胞过快耗竭所致,卵母细胞的活化及持续生长发育依赖于其周围的颗粒细胞的营养及旁分泌作用。POF是由多种病因及复杂机制引起的多基因疾病。其主要原因是卵泡闭锁加速。卵泡闭锁实际上是卵巢颗粒细胞及卵母细胞的凋亡。颗粒细胞凋亡可能是卵泡闭锁的主要因素,因此,对颗粒细胞凋亡的研究越来越受到人们的重视。　　 参与细胞凋亡调控的重要基因有很多种,其中,Bcl-2/Bax基因对鼠类卵巢颗粒细胞凋亡起决定性作用。一般认为Bcl-2基因通过抗细胞凋亡在肿瘤的发生中起作用,其也可防止或延迟由多种化疗药物所诱导的细胞凋亡。细胞是走向生存还是死亡取决于Bcl-2/Bax的比值,并间接影响卵母细胞凋亡。Bcl-2/Bax参与卵巢颗粒细胞的凋亡过程,在卵巢早衰的发生发展中发挥重要作用。　　 本研究建立了环磷酰胺所致的卵巢早衰动物模型,该方法具有造模简单、造价低廉、动物模拟性能好等特点,适宜于POF的实验研究。　　 人参皂甙是传统的抗衰老药物。目前已证实其具有雌激素样活性,但是关于人参皂甙Rb1(GSRb1)对化疗致卵巢早衰大鼠卵泡颗粒细胞Bcl-2及Bax蛋白表达改变的研究国内外尚未见文献报道。因此,本研究拟采用免疫组织化学和Westernblot方法探讨环磷酰胺致卵巢早衰大鼠卵泡颗粒细胞Bcl-2及Bax蛋白表达的改变,在此基础上进一步观察人参皂甙Rb1的卵巢保护作用,为卵巢早衰患者的临床治疗奠定理论基础。　　 方法：　　 一、卵巢早衰模型的建立与分组　　 选用中国医科大学实验动物部提供的雌性2-3月龄,体重200±20g,具有正常动情周期的雌性wistar大鼠30只,适应性饲养1周后,随机分为3组,每组10只:模型组:腹腔注射环磷酰胺负荷剂量50mg/kg后,以8mg/kg/d的维持剂量连续注射14d,之后给予等剂量的生理盐水灌胃,连续4周。给药组:造模成功后,给予人参皂甙Rb125mg/kg/d灌胃,连续4周。对照组:不施加任何处理因素。　　 二、免疫组织化学染色方法　　 观察POF大鼠卵巢凋亡调节基因Bcl-2和Bax蛋白的表达,同时对比观察人参皂甙Rb1对其蛋白表达的影响。　　 三、WesternBlotting方法　　 半定量检测POF大鼠卵巢凋亡调节基因Bcl-2和Bax蛋白的表达,同时对比观察人参皂甙Rb1对其蛋白表达的影响。　　 四、统计学分析　　 结合图像采集分析系统,所得数据用均数±标准差(-x±5)表示,应用SPSS13.0统计软件,用单因素方差分析进行组间比较,P＜0.05为有统计学意义,P＜0.01为有显著统计学意义。　　 结果：　　 一、免疫组化方法观察Bax和Bcl-2蛋白的表达　　 免疫组化结果表明模型组卵巢颗粒细胞Bax蛋白的IOD值均较对照组明显增高(P＜0.05);模型组Bcl-2的蛋白表达量较对照组明显下调(P＜0.05)。人参皂甙Rbl治疗后给药组Bcl-2蛋白的表达与模型组相比有上调趋势(P＞0.05),而Bax蛋白表达明显下调(P＜0.05)。　　 二、Westernblot方法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达　　 Westernblot结果显示3组Bax蛋白之间的表达均有差异,差异均有统计学意义(P＜0.05);Bcl-2蛋白给药组与模型组相比表达上调,其差异有统计学意义(P＜0.05)。与免疫组化结果具有相同的变化趋势。　　 结论：　　 1、环磷酰胺致大鼠POF模型组卵巢颗粒细胞Bax蛋白表达增高;Bcl-2的表达下调。　　 2、人参皂甙Rb1治疗后的给药组Bax蛋白表达明显下调,而Bcl-2蛋白仅有增高趋势。　　 本研究结果提示:人参皂甙Rb1改善卵巢早衰大鼠的机制可能与其上调Bcl-2/Bax的比率以减少颗粒细胞的凋亡有关。