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背景:心血管疾病是迄今危害人类生命健康最主要的慢性疾病之一。深度限食在我国民间已有两千多年的实践,然而,其对心血管疾病的影响尚未得到充分评估。目的:本论文聚焦评估深度限食对血栓和止血功能的影响,以及限食过程中血小板功能的变化。方法:1)分析深度限食是否会影响参与者血小板数量:采集深度限食参与者的静脉血于枸橼酸钠抗凝管中,使用五分类血细胞分析仪检测其中血小板数量及比例,包括血小板数量（Platelet count,PLT）和血小板比容（Plateletcrit,PCT）。2)分析深度限食是否会影响参与者血小板功能:五分类血细胞分析仪检测血样中血小板功能相关指标,包括平均血小板体积（Mean platelet volume,MPV）和血小板分布宽度（Platelet distribution width,PDW）。用缓冲液（Tyrode’s buffer）轻悬洗涤的血小板,对其浓度进行标准化。刺激剂（Thrombin）刺激血小板,并记录5分钟（min）内血小板的聚集能力曲线。血样经过离心处理后,吸取上清血浆冻存于-80℃,酶联免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测血小板P-选择素表达水平。将洗涤后的血小板用血小板特异性抗体（CD41a）标记后,流式细胞仪检测各组样本的活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平。3)分析血小板数量减少参与者是否存在止血风险:血样经过离心处理后,吸取上清血浆,利用血液生化分析仪检测血小板钙离子水平。对血液样本进行凝血七项检测分析,检测指标包括血浆凝血酶原时间（Prothrombin time,PT）、国际标准化比率（International normalised ratio,INR）、活化部分凝血活酶时间（Activated partial thromboplastin time,APTT）、纤维蛋白原（Fibrinogen,FIB）、抗凝血酶Ⅲ（AntithrombinⅢ,AT Ⅲ）和凝血酶时间（Thrombin time,TT）。同时,使用非标记定量（Label free）的方法检测深度限食参与者的血浆蛋白组。4)分析血小板功能改善是否会引发参与者血栓风险:用不含抗凝剂的采血管,收集参与者的血液,分离得到血清样品,用化学分析仪检测血脂变化情况,包括总胆固醇（Total cholesterol,TC）、甘油三酯（Triacylglycerol,TG）、低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、高密度脂蛋白（High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）。分析血浆蛋白组学中和血小板活化、聚集、脱颗粒相关蛋白表达情况。同时利用脉搏波检测仪监测血管健康情况,并对参与者每天进行血压的监测。5)探究深度限食导致参与者血小板减少的机制:用CD41a标记血小板,通过流式细胞术检测血小板的线粒体膜势能（JC-1）和整体凋亡水平（Annexin V）,观察血小板的死亡情况。此外,通过ELISA检测人体血浆中的血小板生成素（Thrombopoietin,TPO）水平,观察血小板的生成情况。最后,对血小板进行蛋白组学的分析,进一步筛查影响血小板数量减少的关键蛋白。结果:1)深度限食导致参与者血小板数量适应性变化:血液五分类的检测结果显示,无论是限食7天还是14天,血小板数量正常的参与者,断食后血小板数逐渐减少至正常生理范围的底线。而血小板数量偏低的参与者,血小板数在深度限食过程中呈增加趋势,并且在渐进复食7天后依然保持增加。2)深度限食不影响参与者血小板形态与活化水平:血液五分类的检测结果表明,深度限食过程中MPV未发生显著变化,但PDW呈现逐渐增大趋势。聚集能力检测实验表明,血小板的聚集能力在深度限食期间均维持稳定。血浆P-选择素的检测结果表明,在断食和渐进复食期间,血小板P-选择素水平显著降低,降至正常范围内。血小板ROS检测结果显示,断食期间ROS显著降低,并且在渐进复食后依然保持。3)深度限食过程中参与者血液的止血功能正常,无出血风险:血液生化分析仪检测结果显示,整个深度限食过程中钙离子水平稳定。凝血七项结果显示,深度限食过程中凝血能力正常。血浆蛋白组学结果显示,内源和外源途径中的凝血因子在断食和渐进复食阶段均保持相似水平;与断食前的基线相比,断食和渐进复食中16种已知的止血相关蛋白无显著变化。4)深度限食降低参与者的血栓风险:通过检测参与者的血脂,观察到,本身血脂正常的人群,深度限食过程中血脂一直处于正常水平。但对于本身血脂高的人群,深度限食有一定的降血脂效果,尤其是降低TG的水平。血浆蛋白组分析的结果表明,与断食前的基线相比,断食7天后,参与血小板活化、聚集和脱颗粒的蛋白质表达显著降低,并且这种降低是持续的。通过脉搏波的检测,观察到深度限食参与者的血管更加健康。血压检测结果显示,对于本身血压正常的参与者而言,他们的血压在深度限食前后保持相对稳定的水平,均在正常范围内。但所有在断食前服用抗高血压药物的高血压参与者在深度限食期间无需药物即可维持正常血压;并且,深度限食比服用降压药的降压效果更好。5)深度限食导致的参与者血小板数量减少可能与调控巨核细胞分化的因子G6B和MYL9有关:流式细胞术检测结果显示,深度限食诱导的血小板凋亡程度降低。同时,深度限食显著降低JC-1绿色荧光的百分比,表明血小板中的线粒体膜电位降低,减少了内在途径触发的细胞凋亡。此外,检测血浆中促血小板生成素（TPO）的结果显示,深度限食没有导致TPO水平的改变。通过血小板蛋白质组学分析,在血小板形成所必需的八种蛋白质中,G6B和MYL9在断食期间显著降低,渐进复食仍然维持较低水平。这些结果提示,G6B和MYL9的减少可能是参与者血小板数量减少的原因。结论:1)深度限食能有效降低血栓风险;2)深度限食过程中止血功能正常,不会导致出血风险;3)深度限食导致血小板数量发生适应性变化,但不影响血小板功能。