背景:胰腺导管腺癌（胰腺癌,pancreatic ductal adenocarcinoma,PD AC）是最常见的恶性肿瘤之一,由于其早期诊断困难,治疗手段单一,导致其预后较差、死亡率较高。随着近些年靶向治疗和免疫治疗等手段的兴起,亟待挖掘有效的新型胰腺肿瘤治疗靶点。胰腺癌组织具有严重纤维化及乏血供等特征,这使得胰腺癌组织长期处于缺氧环境中。缺氧环境会激活体内缺氧诱导因子（hypoxia inducible factor,HIF）表达,并进一步对下游通路产生影响,从而使肿瘤进展加快。本研究通过靶向HIF通路上游因子VHL,进而对胰腺癌缺氧环境与干性的关系进行了探索。方法:首先,本研究构建了胰腺癌缺氧动物及细胞模型。动物实验方面,建立了KCV（LSL-KrasG12D;Pdx1-Cre;Vhl+/-）小鼠模型来研究缺氧对于胰腺癌进展的影响;细胞实验方面,通过CoCl2和shVHL处理,本研究建立了短期及长期稳定的胰腺癌缺氧细胞模型。在此基础上,本研究通过成球实验对缺氧环境与胰腺癌干性的关系进行了探索,并且通过胰腺癌缺氧细胞系的RNA测序数据明确了胰腺癌缺氧环境中发生变化的下游通路,并使用胰腺癌缺氧细胞模型进行验证。最后,通过下游通路关键蛋白抑制剂实验对相关变化通路与胰腺癌干性的关系进行研究。结果:在胰腺癌患者层面,相较于正常胰腺组织,HIF-1α在胰腺癌中表达量明显升高并与患者生存期显著相关。在小鼠模型层面,相较于KC小鼠,KCV小鼠中的胰腺癌进展明显加快。在相似的小鼠月龄下,KC鼠主要表现出PanIN 1及PanIN 2病理特点;KCV小鼠则出现了 PanIN 3及胰腺癌侵袭性表型。在细胞模型层面,成球实验结果表明胰腺癌缺氧细胞系干性明显增强。此后,通过胰腺癌缺氧细胞模型的RNA转录组测序数据以及相关实验验证,明确了两条在胰腺癌缺氧过程中发生显著变化的通路,分别是PI3K-AKT通路及MAPK通路。最终,抑制剂实验结果表明上述通路与胰腺癌细胞干性呈正相关。结论:研究结果表明,缺氧会通过激活多条下游通路使胰腺癌细胞干性增加,进而加快胰腺癌进程。背景:胰腺神经内分泌瘤（pNET）是第二大常见的胰腺肿瘤,由于其起源于胰腺内分泌部,因此亦被称为胰岛细胞瘤。胰腺神经内分泌肿瘤的主要特征为强异质性,近些年来测序研究虽然发现pNET中基因突变起到一定作用,但并不能完全解释pNET异质性。目前,pNET体细胞突变已有相关报道,但其胚系突变尚缺乏系统性研究。本研究对MEN1相关的pNET患者及散发型pNET患者的潜在胚系突变进行了相关筛选,从而揭示了 pNET患者的胚系突变特征。方法:本研究纳入了经活检或手术病理诊断为pNET的患者。采集患者外周血样本用于基因组DNA提取和后续测序。采用目标基因测序及全外显子组测序技术对pNET患者的胚系突变进行研究。结果:本研究共纳入184例pNET患者,包括20例MEN1相关pNET患者和164例散发性pNET患者。本研究中,MEN1相关pNET中MEN1突变率为60%（12/20）,其中半数为新突变位点。而散发型pNET患者中胚系突变较为少见,尚未在其中发现MEN1及VHL突变,但在一例NF-pNET患者中发现了此前尚未报道过的DAXX胚系变异。结论:本研究揭示了 MEN1相关型pNET患者和散发型pNET患者之间独特的胚系突变。MEN1新发突变有助于完善pNET中MEN1突变谱,而新发现的DAXX胚系变异揭示pNET患者的胚系突变和体细胞突变基因有趋同的趋势。