背景与目的:越来越多的证据表明PI3K/Akt通路基因多态性与前列腺癌（PCa）的发生密切相关。然而,这些结果是有争议的。在此,我们对PI3K/Akt信号通路基因多态性与PCa风险之间的关系进行了meta分析。材料与方法:本研究在PubMed,Web of science和google学术数据库进行文献检索。PI3K/Akt通路的基因集引用自京都基因与基因组百科全书（KEGG）网站。检索截止日期为2017年10月1日。应用优势比（OR）和相应的95%可信区间（95%CI）来检验它们的相关性。所有分析均采用Stata 12.0进行。本研究采用Begg’s和Egger’s检测发表偏倚情况,应用随机效应模型进行meta分析。结果:共收集到38篇文献,包括62个病例对照研究,共13个PI3K/Akt通路基因多态性。总体结果未能显示PI3K/Akt通路基因多态性与PCa风险之间的正相关。然而,在按种族划分的亚组分析中,我们发现IL-6-rs1800795多态性与显性模型中高加索人PCa风险增加相关（MM+MW与WW:OR=1.245,95%CI=1.176-1.318,P<0.001）。结论:PI3K/Akt信号通路基因多态性不是PCa的危险因素。进一步的精心设计的研究需要更大的样本和精确的设计来证实我们的发现。研究背景:前列腺癌（PCa）是严重威胁男性健康的恶性肿瘤,近年来PCa的发病率和死亡率呈上升趋势。因此,探索PCa的潜在机制,寻找潜在的治疗方法是当前临床和基础研究的迫切需要。肿瘤和周围的基质细胞构成了肿瘤微环境（Tumor microenvironment,TME）,为癌症、成纤维细胞、炎症细胞和微毛细血管之间的相互作用提供了机会。TME含有肿瘤诱导的细胞因子、生长因子和多种免疫细胞（包括巨噬细胞）,在免疫抑制中发挥着重要作用。巨噬细胞具有较高的功能可塑性和异质性,巨噬细胞在TME中的表型和功能转移往往影响疾病的发生和发展。前列腺肿瘤中富含肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）,TAMs可以是细胞毒性M1型,也可以是致瘤M2型。M2巨噬细胞与伤口修复、新生血管形成、免疫抑制和肿瘤增强有关,并促进Th2免疫反应;而M1巨噬细胞的特征是释放细胞毒性自由基和抑制肿瘤,促进T辅助体（Th）1反应。异常代谢因素也可加重这些细胞的表型,例如,缺氧、缺血和低p H的TME可以使肿瘤细胞发生内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）,从而增强TAMs的免疫抑制能力,促进巨噬细胞的浸润和极化。外泌体是一种直径为30120nm的细胞外小泡,具有双膜结构,携带多种具有生物学功能的物质,如mi RNAs、m RNAs、lnc RNA蛋白质、脂质和病毒颗粒。外泌体通过多泡体的胞吐作用释放,囊泡中的物质可以转移并改变受体细胞的信号通路。外泌体在很大程度上与肿瘤的生长和进展有关,但它们也可以发挥抗肿瘤功能,这取决于细胞类型和微环境,例如癌细胞在缺氧等应激条件下分泌更多的外泌体。因此,深入研究肿瘤微环境下肿瘤细胞如何将内质网应激信号传递给巨噬细胞,从而改变其极化功能具有重要的临床意义。目的（1）观察巨噬细胞PD-L1及相关炎症因子的表达状况。（2）了解内质网应激的前列腺癌细胞分泌的外泌体对THP-1巨噬细胞极化功能是否有影响?（3）了解PI3K/Akt及其磷酸化信号通路与前列腺癌风险之间是否有显著关联性?方法（1）分别使用不同浓度的TG作用前列腺癌细胞24小时和同一浓度TG作用前列腺癌细胞不同时间,确定最合适的时间点和最合适的浓度。（2）采用Western-Blot方法检测ERS标志蛋白GRP78和CHOP的变化。（3）前列腺癌细胞来源的外泌体的分离与鉴定:采用3μM的TG和PC-3前列腺癌细胞共培养24小时,Exo Quick-TC试剂盒提取条件培养基中的外泌体,分别命名为未刺激组（EXO-CON）和刺激组（EXO-TG）。（4）磷钨酸染色后通过透射电子显微镜对外泌体进行形态上的观察。（5）采用Western-Blot印迹检测外泌体（EXO-CON和EXO-TG）表面的特异性分子（CD63和TSG101）和分子伴侣蛋白Calnexin的表达。（6）培养THP-1巨噬细胞并诱导（50 ng/ml PMA 24小时）为巨噬细胞（Mφ）,流式细胞仪检测CD68表达水平。（7）分别用绿色荧光PKH67标记的所提外泌体加入到巨噬细胞中,激光共聚焦显微镜观察外泌体是否能被巨噬细胞吸收以及观察其吸收效率。（8）把不同来源的外泌体（EXO-CON和EXO-TG）和巨噬细胞共培养24小时,收集细胞,提取总RNA,q-PCR检测EXO-CON和EXO-TG两组IL-6、IL-10、TGF-β、IL-1β、IL-12和TNF-α相关炎症因子水平表达变化。（9）把不同来源的外泌体（EXO-CON和EXO-TG）和巨噬细胞共培养24小时,收集共培养上清液,CBA细胞因子试剂盒检测相关炎症因子IL-10,IL-1β,IL-6,IL-8,TNF-α和IL-12的水平变化。（10）把不同来源的外泌体（EXO-CON和EXO-TG）和巨噬细胞共培养24小时,流式细胞仪检测M1和M2巨噬细胞标志性蛋白的表达情况:M1巨噬细胞的标志性蛋白（CD11c和CD192）的表达情况;M2巨噬细胞的标志性蛋白（CD206,CD16和CD274）表达丰度是否增加?（11）把不同来源的外泌体（EXO-CON和EXO-TG）和巨噬细胞共培养24小时,收集细胞,提取总蛋白,Western Blot检测PI3K,Akt及其磷酸化蛋白的表达水平。结果（1）Western Blot检测ERS标志蛋白GRP78和CHOP结果表明TG作用前列腺癌细胞最合适的时间点为24小时和最合适的浓度为3μM。（2）Exo Quick-TC试剂盒提取的外泌体,经磷钨酸染色后通过透射电子显微镜观察,外泌体呈圆形或类圆形膜性囊泡样结构,直径约为30120 nm,符合外泌体的典型特征。（3）Western-Blot印迹检测结果表明,外泌体表达其特异性分子（CD63和TSG101）,但不表达内质网分子伴侣蛋白Calnexin,说明提取的外泌体不含细胞成分;且EXO-TG组外泌体蛋白浓度高于EXO-CON组。（4）流式细胞仪检测结果表明,CD68阳性率达到90%以上,说明分离、诱导的巨噬细胞纯度较高。诱导前后差异显著,说明成功获得Mφ,可以进行后续实验。（5）激光共聚焦显微镜显示,绿色荧光PKH67标记的外泌体（EXO-CON和EXO-TG）被巨噬细胞摄取。（6）不同来源的外泌体（EXO-CON和EXO-TG）和巨噬细胞共培养24小时后,q-PCR检测结果显示:和EXO-CON组相比,EXO-TG组IL-6、IL-10和TGF-β相关炎症因子水平明显上调,而IL-1β、IL-12和TNF-α相关炎症因子水平则明显下降。（7）不同来源的外泌体（EXO-CON和EXO-TG）和巨噬细胞共培养24小时后,收集共培养上清液,CBA细胞因子试剂盒检测炎症因子结果显示:和EXO-CON组相比,EXO-TG组IL-6和IL-10相关炎症因子水平明显上调,而IL-1β、IL-8和TNF-α相关炎症因子水平则明显下降。（8）把不同来源的外泌体（EXO-CON和EXO-TG）和巨噬细胞共培养24小时,流式细胞仪检测M1和M2巨噬细胞标志性蛋白的表达情况:M1巨噬细胞的标志性蛋白（CD11c和CD192）的表达上调;而M2巨噬细胞的标志性蛋白（CD206,CD16和CD274）表达丰度明显增加。（9）Western Blot检测结果显示:把不同来源的外泌体（EXO-CON和EXO-TG）和巨噬细胞共培养24小时,收集细胞,提取总蛋白,和EXO-CON组相比,EXO-TG组PI3K,Akt及其磷酸化蛋白的表达水平明显升高。结论（1）前列腺癌细胞内质网在应激状态下,分泌更多的外泌体。（2）前列腺癌细胞内质网应激状态下释放的外泌体能够被巨噬细胞有效摄取,并通过上调PD-L1和炎症因子表达等方式影响巨噬细胞的极化。（3）以外泌体作为细胞间传递信息的桥梁,PI3K/Akt信号通路与前列腺癌风险之间有显著关联性。（4）这和第一部分meta分析得出的结论是相反的,所以我们有必要扩大样本量和采用亚组分析来进行新的meta分析。