【摘 要】
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目的:探讨精子DNA碎片产生机制及精子DNA碎片对体外受精-胚胎移植/卵胞浆内精子注射（IVF-ET/ICSI）患者助孕结局的影响。方法:1.选取2019年08月至2021年04月于南华大学附属娄底医院生殖医学中心61周期接受IVF-ET/ICSI助孕的不孕不育症夫妇作为研究对象,根据入周前精子DNA碎片指数（DFI）分为对照组（DFI＜25%,n=35）和实验组（DFI≥25%,n=26）。2.
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目的:探讨精子DNA碎片产生机制及精子DNA碎片对体外受精-胚胎移植/卵胞浆内精子注射（IVF-ET/ICSI）患者助孕结局的影响。方法:1.选取2019年08月至2021年04月于南华大学附属娄底医院生殖医学中心61周期接受IVF-ET/ICSI助孕的不孕不育症夫妇作为研究对象,根据入周前精子DNA碎片指数（DFI）分为对照组（DFI＜25%,n=35）和实验组（DFI≥25%,n=26）。2.收集两组患者临床资料,包括夫妻双方年龄、体重指数（BMI）,女方抗苗勒管激素（AMH）、基础卵泡刺激素（b FSH）、窦卵泡数（AFC）、Gn天数、Gn总用量、扳机日激素水平（E2、LH、P）及子宫内膜厚度、获卵数。3.收集取卵日精液标本,比较两组精液常规参数、ROS含量、凋亡率、Bcl-2及Caspase-3蛋白表达水平,探讨精子DNA碎片产生的可能机制。4.观察并随访两组患者接受IVF-ET/ICSI助孕后正常受精率、2PN卵裂率、可移植卵裂胚率、优质卵裂胚率、囊胚形成率、着床率、临床妊娠率、早期流产率、分娩率、活产率、新生儿性别、出生身长和出生体重,记录两组死胎、死产、畸形胎儿及新生儿出生缺陷情况,探讨精子DFI对IVF-ET/ICSI患者助孕结局的影响。结果:1.临床资料比较:两组夫妻双方年龄、BMI,女方AMH、b FSH、AFC、Gn天数、Gn总用量、扳机日激素水平（E2、LH、P）及子宫内膜厚度、获卵数比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。2.精液常规参数比较及其与精子DFI相关性分析:两组禁欲天数、精液液化时间、精液量及精子浓度比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。与对照组比较,实验组取卵日精子活力、PR降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。相关性分析表明:精子DFI与取卵日精子活力呈轻度负相关（r=-0.285,P＜0.05）,与精液量、精子浓度及PR均无直线相关关系（r分别为:-0.198、-0.124、-0.210,P＞0.05）。3.精子ROS含量、凋亡率、Bcl-2及Caspase-3蛋白表达比较及其与精子DFI相关性分析:免疫荧光显示含ROS的精子呈绿色荧光、凋亡精子呈红色荧光。实验组可见大量呈绿色及红色荧光的精子,而对照组中较少见。与对照组比较,实验组精子ROS含量、凋亡率、Caspase-3蛋白表达升高、Bcl-2蛋白表达降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。相关性分析显示:精子DFI与取卵日精子ROS含量、凋亡率及Caspase-3蛋白表达均呈正相关（r分别为:0.914、0.873、0.627,P＜0.05）,但与取卵日精子Bcl-2蛋白表达呈负相关（r=-0.672,P＜0.05）。4.IVF-ET/ICSI助孕结局比较:两组正常受精率、2PN卵裂率及囊胚形成率比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。与对照组比较,实验组可移植卵裂胚率降低、优质卵裂胚率、着床率、临床妊娠率、分娩率、活产率降低,早期流产率升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。5.新生儿出生情况比较:两组新生儿性别、身长及出生体重比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。6.其他随访情况:两组随访率均为100%,均无死胎、死产、畸形胎儿及新生儿出生缺陷发生。对照组移植35周期,临床妊娠27周期,发生早期流产1周期,活胎分娩26周期,分娩新生儿32名（男15名、女17名）。实验组移植26周期,临床妊娠12周期,发生早期流产4周期,活胎分娩8周期,分娩新生儿9名（男6名、女3名）。结论:1.精子DNA碎片发生机制可能与精子产生过量的ROS介导Bcl-2表达下调及Caspase-3表达上调、从而促使精子凋亡有关。2.精子DNA碎片含量可能与精子质量有关,高精子DFI可能降低IVF-ET/ICSI临床妊娠率。
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