【摘 要】
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本研究来源于“国家重点研发计划项目(2017YFD0400504)——水下长航特殊食品制造关键技术研究与新产品创制”的一部分。记忆是思考和想象等高级心理活动的基础。生活节奏的加快导致焦虑、失眠、记忆丧失等亚健康状况,更严重的情况可能会导致一系列神经退行性疾病,如阿尔茨海默病和肌萎缩侧索硬化症等。因此,研究记忆功能的辅助增强是目前针对人们记忆衰退的重要课题。生物活性肽是从天然营养物质中提取的肽,有助
【基金项目】
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国家重点研发计划:水下长航特殊食品制造关键技术与新产品创制(2017YFD0400504);
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本研究来源于“国家重点研发计划项目(2017YFD0400504)——水下长航特殊食品制造关键技术研究与新产品创制”的一部分。记忆是思考和想象等高级心理活动的基础。生活节奏的加快导致焦虑、失眠、记忆丧失等亚健康状况,更严重的情况可能会导致一系列神经退行性疾病,如阿尔茨海默病和肌萎缩侧索硬化症等。因此,研究记忆功能的辅助增强是目前针对人们记忆衰退的重要课题。生物活性肽是从天然营养物质中提取的肽,有助于增强记忆功能,减少精神压力和神经系统功能障碍,已成为食品功能领域的研究热点。海参是一种可以很好被人体吸收和利用的具有良好抗氧化作用的功能性食品,因此本文选用海参肽作为原料探究辅助增强记忆功效。如下为本论文的主要研究内容及结果:(1)海参肽预防C57BL/6小鼠记忆损伤的研究。行为学实验表明,高剂量海参肽(650 mg/kg)组小鼠在水迷宫实验中逃离潜伏期(23.11±0.93s)显著低于痴呆模型组(113.50±3.62s)(P<0.05),避暗实验中被电击次数(4.00±0.21次)与痴呆模型组(17.20±0.73次)相比显著降低(P<0.05),穿梭箱实验中被电击次数(4.5±0.6次)与痴呆模型组(9.6±0.5次)相比显著降低(P<0.05),说明海参肽可预防东莨菪碱所致小鼠的记忆损伤。同时高剂量海参肽组小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性(0.74±0.01)与痴呆模型组(0.57±0.01)相比显著上升(P<0.05),说明海参肽对东莨菪碱诱导的小鼠氧化应激有预防作用。Micro-CT结果表明海参肽可预防东莨菪碱诱导的小鼠脑组织萎缩。海马组织形态学结果表明海参肽可以预防东莨菪碱诱导的小鼠海马CA1区、CA3区和DG区锥体细胞固缩、神经元损伤和细胞坏死。小鼠生理指标结果、血清生化指标和肝脏结肠组织形态学结果表明海参肽不会造成小鼠机体损伤。(2)海参肽修复C57BL/6小鼠记忆损伤的研究。行为学实验表明,高剂量海参肽(650 mg/kg)组小鼠在水迷宫实验中逃离潜伏期(36.44±1.52s)与痴呆模型组(109.10±4.24s)相比显著降低(P<0.05),避暗实验中被电击次数(4.57±0.20次)与痴呆模型组(16.30±0.63次)相比显著降低(P<0.05),穿梭箱实验中被电击次数(5.6±0.3次)与痴呆模型组(9.8±0.4次)相比显著降低(P<0.05),说明海参肽对东莨菪碱所致小鼠的记忆损伤有一定的修复作用。此外,高剂量海参肽组小鼠血清SOD活性(0.72±0.04)显著高与痴呆模型组(0.59±0.01)(P<0.05),说明海参肽对东莨菪碱诱导小鼠氧化应激具有一定修复作用。Micro-CT结果表明海参肽对东莨菪碱诱导的小鼠脑组织萎缩有一定的修复程度。海马组织形态学结果表明海参肽修复后小鼠海马组织CA1区、CA3区和DG区,细胞形态完整,条带清晰,有少量细胞出现固缩现象。(3)海参肽辅助增强东莨菪碱诱导小鼠记忆损伤的作用机理和靶点初探。基于动物模型,检测小鼠脑组织中与记忆相关神经递质指标的含量,结果表明海参肽的摄入可以上调乙酰胆碱(ACh)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)水平,并下调乙酰胆碱酯酶(ACh E)活性。同时海参肽可以提高小鼠海马p-ERK和CREB蛋白表达水平,进而激活突触可塑性和长时程增强相关信号通路ERK-CREB。此外,海参肽的摄入改变了乙酰化蛋白修饰、琥珀酰化蛋白修饰和乳酸化蛋白修饰,进而改变神经细胞代谢通路中的关键酶和关键蛋白,改善小鼠记忆减退和认知能力障碍。
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