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目的：针对阿苯达唑原料内的杂质进行高效液相色谱．离子阱质谱联用仪(LC--Orbitrap)的分析鉴定，并使用ADMET Predictor8.5软件对其进行全面毒理参数的评测，获得其不良反应情况的剖析及预估；采用反相高效液相色谱仪(RP-HPIC)测定阿苯达唑原料中的杂质及破坏实验的杂质情况，充分了解杂质的分布及来源情况；采用顶空-GC测定阿苯达唑原料中的残留溶剂，了解工艺过程中残留溶剂是否符合标准；采用ICP-OES电感耦合等离子色谱对分别进行干法处理和湿法处理后的阿苯达唑原料药进行测定，了解工艺过程中无机金属杂质是否符合标准，以进一步提高药品质量标准。
方法：阿苯达唑原料中的杂质结构及毒性分析：采用高效液相色谱，离子阱质谱联用仪(LC--Orbitrap)，并选取模式电喷雾离子源正离子档，采用ultimate XB-C18welch(4.6mm*250mm2.7μm)，以流动相0.01mol/L乙酸铵(PH=2.8)：甲醇(60∶40)为流动相，流速为1.0ml/min，柱温：40℃。通过一、二级的全扫描质谱分别获得精准相关物质元素信息、分子质量及碎片离子相关信息，以此达到鉴定未知杂质结构的目的：根据杂质的结构特性使用ADMET Predictor8.5的毒理性质参数进行全面预测。(2)测量阿苯达唑原料内有关物质杂质的含量；测量仪器及条件为：反相高效液相色谱仪(RP-HPIC)；Waters CORTECS2.7μm4.6*150色谱柱：0.01mol/L乙酸铵，使用甲酸将其PH调节为2.8，即为流动相A；甲醇为B流动相液体，在0.7ml/min的流速下进行梯度洗脱；245nm波长，40℃柱温条件。(3)原料阿苯达唑中残留溶剂测定：采用顶空-GC法，选择顶空温度为80℃，顶空时间10分钟，使用94%-甲基聚硅氧烷-6%腈丙基苯基的色谱柱作为固定相，并设置测温、柱温、进样温度、起始温度分别为250℃、35℃、2000C和40℃；DB-62430m×0.32mm×1.8μm;经过5分钟的起始温度处理后，以每分钟15℃的速度将其升温至150℃后再保持10分钟，再以每分钟30℃的速度将其升温到200℃，按照20∶1进行分流比设置；将顶空瓶进行10分钟的80℃平衡。(4)离子色谱的测定采用ICP-OES电感耦合等：参数设置分别为：1.2L/min，辅助气；14L／min，等离子体气；1.2KW的高频功率；载气：高纯氩气0.7L/min；曝光时间：10秒；溶剂清洗：30秒；样品清洗90秒。
结果：(1)共检测出13个杂质，其中有一个未知的杂质被推测出了其分子的结构：其它杂质在肝脏毒性、急性毒性及心脏毒性方面可能都不存在，而杂质E可能存在致癌毒性、染色体变异毒性、生殖毒性的可能，杂质B、C、D、G、I有存在染色体变异毒性、生殖毒性的可能，杂质A、F、H、K、L有存在生殖毒性可能，杂质J有存在染色体变异毒性可能，但这些杂质可能均无致突变风险。(2)通过HPLC法测定，杂质A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L在0.5～10μg/ml浓度范围内线性关系良好(r＞0.999)，各杂质与主峰均能得到有效的分离。杂质平均加样回收率分别为100.70%、99.74%、100.04%、100.39%、99.35%、100.11%、99.86%、99.66%、99.94%、100.01%、99.97%、99.93%。(3)通过顶空-GC法，杂质甲醇的线性关系在14.28～128.52μg/ml范围内表现良好，且检出限为0.38592μg／ml，相关系数r值为0.9976，平均回收率为98%。杂质正丙醇的线性关系于20.4～183.6μg/ml范围内表现良好，且有6.20965μg/ml的检出限，0.9967的相关系数r值及107%的平均回收率。杂质乙醇的线性关系在20.08～180.72μg／ml范围内表现良好，且有5.12866μg/ml的检出限，0.9977的相关系数r值及102%的平均回收率。杂质甲苯的线性关系于1.94～17.46μg/ml范围内表现良好，且有0.31175μg/ml的检出限，0.999的相关系数r值及109%的平均回收率。杂质丙酮的线性关系于20.28～182.52μg/ml范围内表现良好，且有1.10955μg/ml的检出限，0.9985的相关系数r值及86%的平均回收率。(4)采用ICP-OES电感耦合等离子色谱法，2种重金属元素的线性关系在0.002～10μg/mL范围内表现良好，并有0.9999的相关系数值。通过比较不同样品处理方法后Fe和SI的含量，发现湿法和干法处理后的结果差异较小，其平均值Fe为18μg/g，SI为65.52μg/g。
结论：本文新建立了阿苯达唑原料药中有关物质杂质的含量、阿苯达唑原料药中残留溶剂含量和阿苯达唑原料药中无机金属的测定方法，并初步鉴定了13个杂质的化学结构．通过预测发现，大部分杂质均有毒性风险。最终拟定出符合现代分析方法学要求的阿苯达唑原料药质量标准，为提高阿苯达唑原料药质量提供了有利的科学理论依据。
方法：阿苯达唑原料中的杂质结构及毒性分析：采用高效液相色谱，离子阱质谱联用仪(LC--Orbitrap)，并选取模式电喷雾离子源正离子档，采用ultimate XB-C18welch(4.6mm*250mm2.7μm)，以流动相0.01mol/L乙酸铵(PH=2.8)：甲醇(60∶40)为流动相，流速为1.0ml/min，柱温：40℃。通过一、二级的全扫描质谱分别获得精准相关物质元素信息、分子质量及碎片离子相关信息，以此达到鉴定未知杂质结构的目的：根据杂质的结构特性使用ADMET Predictor8.5的毒理性质参数进行全面预测。(2)测量阿苯达唑原料内有关物质杂质的含量；测量仪器及条件为：反相高效液相色谱仪(RP-HPIC)；Waters CORTECS2.7μm4.6*150色谱柱：0.01mol/L乙酸铵，使用甲酸将其PH调节为2.8，即为流动相A；甲醇为B流动相液体，在0.7ml/min的流速下进行梯度洗脱；245nm波长，40℃柱温条件。(3)原料阿苯达唑中残留溶剂测定：采用顶空-GC法，选择顶空温度为80℃，顶空时间10分钟，使用94%-甲基聚硅氧烷-6%腈丙基苯基的色谱柱作为固定相，并设置测温、柱温、进样温度、起始温度分别为250℃、35℃、2000C和40℃；DB-62430m×0.32mm×1.8μm;经过5分钟的起始温度处理后，以每分钟15℃的速度将其升温至150℃后再保持10分钟，再以每分钟30℃的速度将其升温到200℃，按照20∶1进行分流比设置；将顶空瓶进行10分钟的80℃平衡。(4)离子色谱的测定采用ICP-OES电感耦合等：参数设置分别为：1.2L/min，辅助气；14L／min，等离子体气；1.2KW的高频功率；载气：高纯氩气0.7L/min；曝光时间：10秒；溶剂清洗：30秒；样品清洗90秒。
结果：(1)共检测出13个杂质，其中有一个未知的杂质被推测出了其分子的结构：其它杂质在肝脏毒性、急性毒性及心脏毒性方面可能都不存在，而杂质E可能存在致癌毒性、染色体变异毒性、生殖毒性的可能，杂质B、C、D、G、I有存在染色体变异毒性、生殖毒性的可能，杂质A、F、H、K、L有存在生殖毒性可能，杂质J有存在染色体变异毒性可能，但这些杂质可能均无致突变风险。(2)通过HPLC法测定，杂质A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L在0.5～10μg/ml浓度范围内线性关系良好(r＞0.999)，各杂质与主峰均能得到有效的分离。杂质平均加样回收率分别为100.70%、99.74%、100.04%、100.39%、99.35%、100.11%、99.86%、99.66%、99.94%、100.01%、99.97%、99.93%。(3)通过顶空-GC法，杂质甲醇的线性关系在14.28～128.52μg/ml范围内表现良好，且检出限为0.38592μg／ml，相关系数r值为0.9976，平均回收率为98%。杂质正丙醇的线性关系于20.4～183.6μg/ml范围内表现良好，且有6.20965μg/ml的检出限，0.9967的相关系数r值及107%的平均回收率。杂质乙醇的线性关系在20.08～180.72μg／ml范围内表现良好，且有5.12866μg/ml的检出限，0.9977的相关系数r值及102%的平均回收率。杂质甲苯的线性关系于1.94～17.46μg/ml范围内表现良好，且有0.31175μg/ml的检出限，0.999的相关系数r值及109%的平均回收率。杂质丙酮的线性关系于20.28～182.52μg/ml范围内表现良好，且有1.10955μg/ml的检出限，0.9985的相关系数r值及86%的平均回收率。(4)采用ICP-OES电感耦合等离子色谱法，2种重金属元素的线性关系在0.002～10μg/mL范围内表现良好，并有0.9999的相关系数值。通过比较不同样品处理方法后Fe和SI的含量，发现湿法和干法处理后的结果差异较小，其平均值Fe为18μg/g，SI为65.52μg/g。
结论：本文新建立了阿苯达唑原料药中有关物质杂质的含量、阿苯达唑原料药中残留溶剂含量和阿苯达唑原料药中无机金属的测定方法，并初步鉴定了13个杂质的化学结构．通过预测发现，大部分杂质均有毒性风险。最终拟定出符合现代分析方法学要求的阿苯达唑原料药质量标准，为提高阿苯达唑原料药质量提供了有利的科学理论依据。