研究背景急性髓系白血病（Acute myeloid leukemia,AML）是以髓系干/祖细胞异常自我增殖为特征的造血系统恶性肿瘤,是成人最常见的急性白血病类型。过去十几年间,AML发病率不断增加,但生存率并无明显改善。AML的治疗仍然依赖于联合化疗、自体或异体造血干细胞移植（HSCT）等。对于不适合强诱导化疗的AML老年患者,目前缺乏有效的治疗手段。嵌合抗原受体T细胞（Chimeric antigen receptor T-cell,CAR-T）疗法在复发/难治性急性淋巴细胞白血病（Acute lymphoblastic leukemia,ALL）、B细胞非霍奇金淋巴瘤和多发性骨髓瘤的治疗上疗效显著。但由于缺乏特异性靶点,其在AML中疗效欠佳。以往的研究发现,C型凝集素域家族12成员A（The C-type lectin domain family 12 member A,CLEC12A）在LSCs表面特异性高表达,在正常造血干/祖细胞上不表达,被认为是AML的新型潜在治疗靶点。然而,CLEC12A表达与AML的预后相关性知之甚少,其在AML中的生物学功能病理机制尚不清楚。研究目的本课题组旨在验证CLEC12A在AML LSCs中的表达特异性,探讨CLEC12A表达与AML临床病理特征和实验室指标的相关性及预后价值,进一步明确CLEC12A在AML中的潜在生物学功能病理机制,研究CLEC12A作为CAR-T细胞治疗靶点在AML中的作用,为AML的诊断、免疫治疗及预后提供理论依据。研究方法1.验证CLEC12A在AML LSCs中的表达特异性:利用多种公共数据库和临床标本比较CLEC12A在各种类型肿瘤和细胞系中的表达差异,比较CLEC12A在正常HSCs和AML LSCs的表达差异,验证CLEC12A在AML LSCs中的表达特异性。2.分析CLEC12A表达与AML临床病理特征和实验室指标的相关性及预后价值:基于155名非M3初诊AML患者临床信息如年龄、性别、突变基因、细胞遗传学、分子生物学、实验室指标、随访期是否复发及随访期末是否生存等,分析CLEC12A表达与AML临床病理特征和实验室指标的相关性及生存分析。构建cox回归模型评估CLEC12A在AML患者中的独立预后价值。3.探讨CLEC12A在AML中的潜在生物学功能及病理机制:筛选CLEC12A高/低表达组差异表达基因,通过GO/KEGG富集分析及蛋白互作网络分析明确CLEC12A在AML中可能参与的生物学相关通路。4.CLEC12A免疫相关分析:分析CLEC12A表达与10种免疫细胞浸润水平及免疫检查点基因的相关性,预测CLEC12A高/低表达组患者对ICB治疗的响应性差异。研究结果1.CLEC12A在AML中表达显著上调。CLEC12A在AML样本及AML细胞系 P31/FUJ、PL-21、AML-193 和 MUTZ-3 中表达显著上调。CLEC12A 在 LSCs中显著高表达,而在正常造血干细胞不表达。2.CLEC12A在AML中的预后价值。CLEC12A表达与WBC计数、FAB分类和细胞遗传学风险分层显著相关。CLEC12A低表达组IDH1,TP53,和TET2基因突变频率显著增高,但RUNX1基因突变频率显著降低。CLEC12A低表达提示预后不良。CLEC12A低表达是60岁以下并在缓解诱导期间接受强化治疗的非M3型AML患者的独立预后风险因素。3.CLEC12A在AML中发挥重要的免疫调节作用。CLEC12A通过多种与免疫相关的通路参与AML多环节病理生理功能。CLEC12A高表达与M2巨噬细胞和单核细胞浸润呈正相关,与NK细胞和Tregs浸润呈负相关。CLEC12A高表达与 CD47,HAVCR2,SIGLEC15,SIRPA 和 PDCD1LG2 正相关,与 PDCD1,TIGIT和LAG3呈负相关。CLEC12A高表达预示着对免疫检查点阻断治疗（ICB）疗效更好。结论在AML中,CLEC12A在LSCs中表达显著增高,可能是CAR-T细胞疗法的理想靶点。CLEC12A可作为AML一个新的预后生物标志物,补充目前AML预后风险分层系统,并发挥重要免疫调节作用。