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原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国最常见的恶性肿瘤之一，由于起病隐匿，目前尚缺乏有效的早期诊断方法，确诊时往往已到晚期或发生转移。因此肝癌的早期诊断对患者的治疗及预后有重要意义。近年来，探索恶性肿瘤早期诊断策略的过程中，靶向诊断尤其是分子影像技术备受重视。在分子影像实施过程中，较为关键环节在于成像靶点的选择和高效特异性分子探针的合成。αvβ3整合素受体等在正常肝细胞中检测不出，当肝细胞发生癌变时，细胞表面的αvβ3整合素受体会有较大改变；环状RGD多肽是一种含有精氨酸(arginine)、甘氨酸(glycine)和天冬氨酸(aspartic acid)序列的小肽，可以特异性识别整合素αvβ3受体。cRGD/αvβ3的靶向投递系统在分子成像研究中备受关注。本文拟构建 cRGDfK-SPIO靶向性探针，并探讨其在αvβ3整合素受体表达阳性的肝癌细胞的分子靶向诊断中的价值及意义。 目的:构建环状精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽(cRGDfK)超顺磁氧化铁纳米磁共振分子探针，以显示高表达整合素αvβ3受体的人肝癌 HepG2细胞。 方法:1、用生物相容性多孔聚合SPIO微球（BIO-r-C-d）的羧基端与cRGDfK的氨基端化学偶联，应用激光纳米粒度仪测试空白对比剂及多肽对比剂的粒径及zeta电位；应用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳及磁共振扫描仪检测抗体对比剂的生化及磁学特性；2、用免疫荧光化学方法检测 HepG2细胞αVβ3整合素受体表达情况；将 cRGDfK-SPIO、SPIO分别与HepG2细胞孵育，行普鲁士蓝染色显示铁颗粒；3、肝癌细胞在含有0μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml、40μg/ml、50μg/ml不同浓度cRGDfK-SPIO对比剂的细胞培养基中培养24h后行磁共振成像，找出最佳成像浓度；4、细胞在37℃，最佳成像浓度的cRGDfK-SPIO对比剂组，SPIO组，及空白细胞对照组分别孵育24h后进行磁共振扫描。 结果:1、激光纳米粒度仪，十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析证明SPIO与cRGDfK多肽有效结合在一起，多肽对比剂的活性及弛豫率未发生明显变化；2、免疫细胞荧光检测HepG2细胞中αvβ3整合素受体高度表达；普鲁士蓝染色法证明多肽对比剂可与 HepG2细胞结合。3、肝癌细胞在不同浓度cRGDfK-SPIO对比剂中培养24h后，各组之间的T2弛豫时间数值行方差分析，F值为336.389（P<0.01），然后，各实验组与对照组行Dunnett-t检验，差别均有统计学意义（P<0.01），且20μg/ml组T2弛豫时间最低。4、20μg/ml铁浓度的cRGDfK-SPIO与 HepG2细胞孵育后T2弛豫时间下降至261.3ms，SPIO组和对照组T2弛豫时间无明显下降。 结论:cRGDfK-SPIO对αvβ3整合素受体具有较好靶向作用，可通过MRI显示高表达整合素αvβ3受体 HepG2细胞。本研究所制备的cRGDfK-SPIO对比剂在HepG2细胞的最佳成像浓度是20μg/ml。