随着工业化、城镇化和人口老龄化进程的加快,以及环境污染与不良生活方式等的不断累积,肿瘤发生和发展的形势日显严峻,防治恶性肿瘤在我国也越来越不容忽视。恶性肿瘤的生长离不开血管的生成,而血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF₁₆₅)是肿瘤血管生成的主要调节因子,常在血管期异常快速侵袭性发展的肿瘤细胞中过表达,影响淋巴管新生和肿瘤的转移,故对VEGF₁₆₅的检测显得格外重要。虽然目前已有多种VEGF₁₆₅检测方法,但如何更简便快速、高效灵敏和低成本地进行检测仍然是研究者不断探究的方向。基于此,本文提出了一种基于新型线点线电极（line-pad-line electrode,LPLE）和DNA适体识别的阻抗传感器。其主要是利用新型LPLE电极的几何特性,VEGF₁₆₅蛋白与DNA适体特异性作用后,致使LPLE电极界面性质发生变化,引起阻抗变化,进而实现对VEGF₁₆₅的检测。本文构建了一种新型的VEGF₁₆₅检测传感器,具体研究内容及结果如下:（1）对VEGF₁₆₅检测传感器的LPLE电极进行电化学性能测试。利用电化学工作站CHI604E获取LPLE电极和传统叉指电极（gold interdigitated electrode,GIE）的阻抗谱数据,并根据LPLE的电极结构,应用ZSimpWin软件建立适当的等效电路模型进行阻抗谱数据分析。结果表明,LPLE电极结合VEGF₁₆₅蛋白前后在8.25 Hz的阻抗变化值?Z是3420Ω,大于GIE在8.25 Hz的?Z数值585Ω。表明LPLE比传统GIE具有更高的灵敏度,对定量分析VEGF₁₆₅具有极好的可行性。（2）对VEGF₁₆₅检测传感器的实验条件进行优化。使用100 nM、300 nM、500 nM、700 nM和1μM,对电极上适体的浓度进行优化;用12 h、16 h、20 h、24 h和28 h,对电极上适体的结合时间进行优化;用40 min、50 min、60 min和70 min,对修饰电极上VEGF₁₆₅的孵育时间进行优化。并利用电化学阻抗谱（Electrochemical impedance spectroscopy,EIS）对上述实验条件的传感器响应行为进行研究。结果表明,适体最佳浓度、适体最佳结合时间和VEGF₁₆₅最佳孵育时间分别为500 nM、24 h和60 min。（3）对VEGF₁₆₅检测传感器的线性检测范围和特异性进行研究。使用1 fg/ml、100 fg/ml、200 fg/ml、600 fg/ml、1 pg/ml、1.2 pg/ml和1.4 pg/ml,对传感器响应VEGF₁₆₅浓度的整体变化趋势和线性检测范围进行研究。在相同浓度下（0.026 pM）,用凝血酶、血小板源性生长因子-BB、血管内皮生长因子121和免疫球蛋白G进行传感器的特异性研究。利用EIS和origin软件记录电极界面阻抗变化和进行单频点的特异性性能分析。结果表明,在优化条件下,该传感器对VEGF₁₆₅的检测在0.026-31.4 fM范围内具有良好的线性（R²=0.9950）,检测限（limit of detection,LOD）低至0.017 fM（3δ/Slope）;在0.026 pM浓度下,传感器响应于VEGF₁₆₅在8.25 Hz的?Z值是3830Ω,其性能是传感器于其他干扰蛋白检测性能的7.6-9.8倍,表明该传感器具有优异的选择性。综上所述,本文提出的传感器将DNA适体与新型LPLE相结合,主要具有以下两个特点:（1）以DNA适体为电极的识别元件,DNA适体拥有比RNA适体更耐核酸酶降解的能力,化学性质更加稳定,且成本低廉,可提高传感器对VEGF₁₆₅的特异性和降低使用成本;（2）以印刷电路板（Printed circuit board,PCB）为基材的新型LPLE,这也是区别于其他研究的创新之处。基于PCB的LPLE电极具有简单、成本低和易于量产等优点,可极大地降低VEGF₁₆₅检测传感器的制备成本。另外,本文提出的LPLE传感器可结合不同的特异性物质,构建多种不同的检测基底,同时也可为其他类型的传感检测提供一种新的电极结构,具有广阔的应用前景。