左甲状腺素钠联合多奈哌齐治疗对成年甲减大鼠后扣带回SNAP-25表达的影响

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目的  1.本研究观察成年甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠后扣带回突触体相关蛋白25的表达水平。  2.研究左甲状腺素钠(L-T4)与多奈哌齐(DON)联合治疗对突触体相关蛋白25(Synaptosomal Associated Protein 25 KD,SNAP-25)表达的影响。  方法  40只健康成年雄性清洁级SD大鼠,适应性饲养后使用随机数表法分为5组:正常对照组(CON组)、甲减组(Hypo组)、L-T4替代治疗组(L-T4组)、多奈哌齐治疗组(DON组)、联合治疗组(L-T4+DON组)。CON组正常饲养,余4组通过饮用水中加入丙硫氧嘧啶(PTU)(药物浓度0.05%)饲养6周建立甲减大鼠模型。造模5周开始,同时分别给予后三组左甲状腺素钠、多奈哌齐、左甲状腺素钠联合多奈哌齐治疗2周,期间每周称量体重1次并据此调整给药剂量。造模成功后分别取材。通过放射免疫法测定血清甲状腺激素水平,尼氏染色法观察尼氏体,免疫组织化学法以平均光密度(average optical density,AOD)为指标观察各组大鼠后扣带回SNAP-25的表达,蛋白质印记(Western blot)法分析各组大鼠后扣带回内SNAP-25在蛋白水平表达。  结果  1.各组甲状腺功能:Hypo组、DON组大鼠相较于CON组血清甲状腺激素水平显著降低(P<0.01),L?T4组、L?T4+DON组血清甲状腺素水平与正常对照组差异无统计学意义。  2.各组尼氏体表达:尼氏染色示Hypo组较CON组尼氏体数量降低(P<0.05),DON组尼氏体数量较Hypo组增加(P<0.05),未恢复至CON组水平(P<0.05),L-T4+DON组尼氏染色显示较CON组AOD值无显著差异,尼氏体数量恢复。  3.各组SNAP-25蛋白表达:Hypo组、DON组后扣带回SNAP-25表达高于CON组(P<0.05);L-T4组SNAP-25表达低于Hypo组(P<0.05),未恢复至CON组水平(P<0.05);L-T4+DON组后扣带回SNAP-25表达与CON组差异无统计学意义。  结论  1.成年期甲减大鼠后扣带回SNAP-25蛋白表达量升高(P<0.05)、尼氏体数量减少(P<0.05)。  2.单一左甲状腺素钠替代治疗未完全恢复,左甲状腺素钠与多奈哌齐联合治疗能够有效恢复上述损伤。
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