【摘 要】
：
水曲柳具有丰富的优良种质资源,而其在组培微繁过程中,器官再生效率低一直是制约水曲柳微繁的瓶颈问题。为此,我们从水曲柳杂种优势的视角出发,以东北林业大学选育的萌蘖数量多、嫁接成活率高、扦插易生根的水曲柳（♀）×小叶白蜡（♂）（Fraxinus mandshurica Rupr.×Fraxinus sogdiana Bunge.）的杂交新品种“东水1601号”（20190287）无性系为材料,通过对灭
【基金项目】
：
黑龙江省应用技术研究与开发计划项目（GA19B201）；
论文部分内容阅读
水曲柳具有丰富的优良种质资源,而其在组培微繁过程中,器官再生效率低一直是制约水曲柳微繁的瓶颈问题。为此,我们从水曲柳杂种优势的视角出发,以东北林业大学选育的萌蘖数量多、嫁接成活率高、扦插易生根的水曲柳（♀）×小叶白蜡（♂）（Fraxinus mandshurica Rupr.×Fraxinus sogdiana Bunge.）的杂交新品种“东水1601号”（20190287）无性系为材料,通过对灭菌方法、基本培养基、植物生长调节剂等组培微繁中的关键影响因素进行研究和优化,建立了东水1601无性系的腋芽增殖途径的微繁技术;之后比较东水1601与水曲柳母本（M8）在组培微繁过程中表型、内源激素、基因表达的差异变化,探究东水1601繁殖优势形成的原因;然后克隆东水1601增殖中高表达基因FmCUC1,进行生物信息学分析和表达模式分析,进一步瞬时与稳定转化水曲柳,结合基因表达量的变化和转基因植株表型变化初步解析FmCUC1基因对芽分化的作用。主要研究结果如下:1.影响腋芽微繁的关键因素分析:在酒精和次氯酸钠双处理下,东水1601带芽茎段外植体灭菌效果最好,筛选出以WPM为基本培养基（芽启动率可达66.25%）,在高浓度6-BA（1-4 mg/L）和低浓度NAA（0-0.1 mg/L）组合处理下,东水1601带芽茎段初代芽启动率高达73.09%,在低浓度TDZ（0.4-1 mg/L）处理下组培不定枝芽的分化率高达88.80%并表现出优于其他处理的分化状态,低浓度IBA（1-1.8 mg/L）有利于不定枝的生根。选出得到组培不定枝后先在含有TDZ的培养基中分化培养,再转入含有高浓度6-BA和低浓度NAA的培养基中增殖培养的培养方式更有利于组培苗的扩繁。2.东水1601腋芽微繁技术建立:以当年生未达到半木质化程度的带芽茎段为外植体,75%酒精30 s+5%次氯酸钠10 min灭菌效果最好,脱菌率达87.50%;外植体初代芽启动最适培养基为WPM+4 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,30 d后芽启动率达73.09%;然后将组培不定枝转入WPM+0.8 mg/L TDZ中,30 d后芽分化率可达88.80%;继续转入增殖培养基WPM+6 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,30 d后增殖系数达8.40,单株丛苗数量可高达11棵;之后将4-5 cm生长健壮的不定枝转入生根培养基WPM+1 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA中,30 d后生根率达82.50%,再移栽至草炭土:蛭石（3:1）盆中炼苗,30 d后成活率达94.70%。3.东水1601组培微繁过程中繁殖优势分析:（1）表型变化:东水1601比母本M8启动快,生长期长,增殖分化能力强;（2）内源激素变化:内源IAA与GA含量的积累是东水1601启动早,长势健壮,不易老化的重要原因;内源IAA与CTK积累是促进东水1601比母本M8分化能力强的重要因素;（3）基因表达差异变化:增殖过程中,生长素通路的FmCUC1基因高表达（为母本M8的5.99倍）可能对东水1601繁殖优势的形成产生重要影响。4.FmCUC1基因克隆及表达模式分析:克隆得到FmCUC1基因,全长807 bp,编码268个氨基酸,为稳定的疏水蛋白,近N端的第49-423位氨基酸处有一个典型的NAC-domain保守结构域,与木犀榄亲缘关系较近。亚细胞定位结果表明,FmCUC1蛋白定位于细胞核中。q RT-PCR分析可知,FmCUC1基因在顶芽的表达量最高,为对照的6.43倍;在下胚轴再生过程中,FmCUC1基因在芽点产生与丛枝形成期均高表达,分别为6 d（对照）的1.98倍和11.33倍;在种子萌发的第4 d（芽的发生阶段）和第8 d（芽的伸长阶段）FmCUC1基因表达量均达到峰值,分别为0 d的8.56倍和8.46倍。同时FmCUC1基因也会响应IAA、6-BA、BR等再生关键激素的诱导。推测FmCUC1基因在水曲柳芽再生过程中发挥重要作用。5.瞬时过表达与RNAi干扰表达FmCUC1对水曲柳再生相关基因的表达情况分析:FmCUC1基因过表达显著上调了细胞分裂素信号转导通路关键基因FmSTM和B型FmARR12的表达,下调了生长素信号转导通路关键基因FmPLT3和FmPLT5的表达,RNAi干扰表达结果相反。推测FmCUC1基因可能通过调控FmSTM基因的表达,进而促进顶端分生组织的建立,影响芽再生能力。6.FmCUC1稳定转化结果表明:遗传转化率最高为4.22%,过表达下胚轴出芽时间比空载早3 d左右,比干扰早6 d左右,过表达下胚轴平均不定芽数量（9.06个）为对照的2.77倍,为干扰的5.12倍;在基因表达方面,FmCUC1过表达后,其下游顶端分生组织形成关键基因FmSTM表达量较对照显著上调了30.62倍,RNAi干扰表达结果相反,说明FmCUC1基因可加快水曲柳芽的形成,对不定芽分化有促进作用。
其他文献
啤酒是一种古老的酒精饮料,被世界各地的许多人饮用。中国是世界上最大的啤酒生产国和消费国,其次是美国。流行病学研究表明,适量饮用啤酒有益于健康。这些发现是由于抗氧化、抗炎和高生物利用度以及与非酒精成分相关的其他益生元效应的结果。啤酒中含有酚类化合物、类黑素、硒、维生素等抗氧化剂和矿物质,同时也含有氨基酸。人们对啤酒的各种加工和贮藏技术进行了大量的研究。然而,已经发现这些加工技术会通过外部环境的变化给
随着近年来互联网的发展和视频录像数量的指数级增长,作为视频理解领域的基础任务,视频行为动作识别在视频监控、人机交互、视频检索等方面有着重要应用。当前使用深度学习的大多数视频行为动作识别方法都需要大量的标注数据作为支撑,然而现实世界中由于拍摄难度、收集标注成本和隐私伦理等原因,部分类别的数据往往难以大量获取和标注,因此少样本动作识别具有重要的应用价值。本文首先介绍了少样本动作识别的研究背景和现状;其
重金属镉（Cd）能够被植物摄入并毒害植物。锌（Zn）虽然是植物生长所需的微量元素,但过量的Zn也会抑制植物生长。为探明植物叶片光合功能和活性氧代谢系统如何响应重金属Cd和Zn的胁迫,本试验研究了100μmol·L-1 Cd和200μmol·L-1 Zn处理对烟草（龙江911）叶片叶绿素（Chl）和类胡萝卜素（Car）含量以及光合功能和活性氧代谢的影响,并利用基于串联质谱标签（TMT）的蛋白质组学技
在日常生活中,基于位置的服务扮演着越来越重要的角色。在室内定位领域中,由于Wi-Fi设施易部署的特性,基于Wi-Fi信号指纹的定位技术被广泛使用。然而,传统构建Wi-Fi信号指纹地图的方法需要大量的时间及专业人力。众包技术的出现虽然在一定程度上缓解了上述问题,但是仍有许多不足需要改进。本文针对接入点（Access Point,AP）选择、设备异构问题,以及如何构建立体Wi-Fi信号指纹地图进行了研
植物丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）是一种丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶,在植物非生物胁迫、生物胁迫、生长和发育等方面发挥重要功能。植物自交不亲和（Self-incompatibility,SI）是指植物拒绝自我花粉,只接受异我花粉的信号识别授粉机制。本论文以北方重要的观赏和食用性植物羽衣甘蓝（Brassica oleracea var.ac
对基因表达谱数据的分析研究,有助于寻找肿瘤相关的致病基因,能够为肿瘤的临床诊断和治疗提供相应的技术支持。然而,基因表达谱数据集样本量少的特性影响基于数据驱动的机器学习算法对其处理的性能,因此有必要对其进行数据增强。作为一种应用广泛的数据增强方法,基于梯度惩罚的条件Wasserstein生成对抗网络（CWGAN-GP）能够生成高质量指定标签的样本。然而,在对基因表达谱数据进行数据增强时,CWGAN-
茶藨子属（Ribes L.）是茶藨子科（Grossulariaceae）唯一属,具有很高的食用价值及观赏价值。但其属下分类长期以来一直存在争议,本研究基于《陕西植物志》第6卷的茶藨子科的编研工作,通过资料收集、标本查阅、野外调查及DNA条形码技术对陕西省茶藨子属植物展开系统的修订,主要研究内容及结论如下:1.通过本研究最终确定了陕西省茶藨子属植物21种、7变种,划分为4个亚属,含中国特有种11种、
茖葱Allium victorialis是一种在北温带广泛分布的野生蔬菜,含有丰富的营养成分与多种生理活性物质,具有极高的营养价值与药用潜力,随着人工种植的推广及相关研究的开展,其经济价值及研究价值也越来越受重视,对其产量与品质造成严重损害的茖葱病害也逐步受到人们关注。在黑龙江省森林植物园发现一种新发病害茖葱菌核病,本研究对茖葱染病植株进行病原菌分离、科赫法则验证,并对其进行室内药剂筛选与拮抗菌分
特别是在发展中国家经济体,许多公司的财务经理因为企业财务管理不善,需要制定一系列政策。其主要问题是:一方面财务经理们在银行中存有大量现金,而另一方面又进行不理智的借款行为,同时这也使公司无力偿还短期债务和支付股利。企业试图找到一个最优水平,可以平衡现金机构应该持有的金额,以满足他们的日常经营活动,同时使成本最小化。公司会通过长期或者短期借款来增加企业的资本（包括债券资本和股权资本）,而这样的借款都
本研究旨在研究30年来气候变化对四个西非可可生产国的可可生产的影响;从1990年到2019年,主要侧重于两个关键变量:降雨和温度变化。为此,在进行静止性和协整性检验后,采用了交错滞后自回归模型（ARDL）。为了避免回归偏差和提高模型的质量,一些经验上重要的变量被纳入模型。这些变量是化肥、税收、政府补贴和农村人口。本研究中使用的数据主要来自粮农组织、气候变化知识门户网站和世界银行。估算结果显示,从长