目的:乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,2018年860万新发女性癌症患者中,乳腺癌是最常见的类型（24.2%,全球范围内1/4的女性新发癌症病例为乳腺癌）。其中激素受体阳性型乳腺癌约占所有乳腺癌的70%,研究显示ERα（estrogen receptorα）和ERβ（estrogen receptorβ）为主要相关受体。ERα作为最早发现的雌激素受体,其在乳腺癌发生发展中的作用为医学界所熟知,其表达已被应用于乳腺癌的临床诊断与指导内分泌治疗当中;然而到目前为止,ERβ在乳腺癌中的生物学意义尚无定论,有研究认为ERβ为作促癌基因导致肿瘤的发生,亦有研究认为ERβ基因对正常组织起保护作用。已有很多研究表明,MFN2（Mitofusin 2）在乳腺癌组织中的表达较正常组织明显降低,具有抗增殖和诱导凋亡的作用,但其机制并未明确。本实验通过检测MFN2与相关基因在不同浓度雌激素E2（Estrogen）培养的乳腺癌细胞MCF-7中的表达情况,研究外源性的E2对乳腺癌细胞内MFN2及相关下游基因表达的影响并进一步明确E2所诱导的MFN2在细胞凋亡过程中的作用机制,探寻潜在的乳腺癌靶向治疗位点。方法:1. 采用Western blot检测在10^-5mol/l、10^-6mol/l和10^-7mol/l E2预处理48h后乳腺癌细胞MCF-7中MFN2、p-ERK的蛋白表达情况。2.构建MFN2敲低的真核质粒、空载质粒,采用脂质体转染法转入人乳腺癌MCF-7细胞中,并设置空白对照（细胞分别命名为MCF-7-KD、MCF-7-NC及MCF-7-N）,提取细胞蛋白后采用western blot法检测MF N2、p-ERK、cleaved caspase3及BAX的表达。3.在已转染MFN2敲低型质粒的MCF-7细胞中使用p-ERK通路抑制剂PD98095,提取细胞蛋白后通过western blot技术检测MFN2、p-ERK、cleaved caspase3及BAX的表达。结果:1. 在MCF-7细胞中加入10^-5mol/l、10^-6mol/l和10^-7mol/l E2预处理48h后,MFN2蛋白表达较未处理组均下降,10^-6mol/L组表达最低;而p-ERK经不同浓度雌激素处理后表达均有所上升,10^-6mol/L组表达最高。2.在乳腺癌MCF-7细胞中成功构建MFN2敲低稳转细胞株,western blot技术检测MCF-7-KD组MFN2蛋白表达量明显低于MCF-7-NC及MCF-7-N组;p-ERK随着MFN2的敲低蛋白表达明显升高;促凋亡基因cleaved caspase3及BAX由于MFN2的敲低随之降低。3.在敲低MFN2组中使用p-ERK通路抑制剂PD98095后,Western blot结果显示,在敲除MFN2后使用p-ERK抑制剂PD98095组,p-ERK被显著抑制,cleaved caspase3及BAX蛋白表达随之升高,即PD98095逆转了敲除MFN2基因后p-ERK的增加,同时促进促凋亡基因cleaved c aspase3及BAX的表达,即促进了乳腺癌细胞的凋亡。结论:1.MFN2、p-ERK在人乳腺癌细胞株MCF-7中表达均受雌激素浓度的影响,二者表达呈反向相关性。2.在人乳腺癌细胞株MCF-7中构建MFN2敲低的稳转细胞株;MFN2 敲低可激活p-ERK通路,使促凋亡基因cleaved caspase3及BAX的表达降低,从而抑制乳腺癌细胞的凋亡。3. PD98095能抑制MFN2敲低后p-ERK通路的激活,增加了MCF-7细胞的促凋亡作用,从而逆转了MFN2敲低后乳腺癌细胞的抗凋亡。4. MFN2为抑癌基因,负向调节p-ERK的表达,并在雌激素的作用下具有一定促凋亡作用。