基因改造技术在昆虫中的利用和发展推动了医学和农业的进步,害虫遗传防治技术因其独特的优势而越来越受到重视。目前主流的害虫遗传防治技术均有一定的局限性,比如研究最多的RIDL技术依赖四环素,而四环素的大量应用会导致环境污染等问题。为了实现更高效且环境友好的害虫防治效果,本实验尝试开发一种不依赖抗生素的害虫遗传致死技术。本实验首先提出“鸳鸯染色体”的概念,即一对同源染色体A和B,AB共存则昆虫存活,分开则会死亡。为了构建鸳鸯染色体品系果蝇,本课题检测了5对毒素-抗毒素分别对Sf9细胞的作用,构建了表达毒素的质粒,插入红色荧光基因（mcherry）作为报告基因,同时构建了表达抗毒素的质粒,插入绿色荧光基因（EGFP）作为报告基因,通过转染Sf9细胞观察荧光情况,筛选出两对毒性较强的毒素抗毒素Kid-Kis和Maz F-Maz E。毒素Kid与抗毒素Kis摩尔比分别为1:1、1:2和1:4时,Sf9存活率为61%、63%、81%,单独转染Kid质粒的Sf9细胞中,细胞凋亡率为24.8%,按不同摩尔比共转染毒素Kid与抗毒素Kis质粒时,细胞凋亡并不明显。毒素Maz F与抗毒素Maz E摩尔比分别为1:1、1:2和1:4时,Sf9存活率为86%、86%、97%,细胞凋亡并不明显。通过流式细胞仪检测毒素Maz F对Sf9细胞的影响,单独转染Maz F质粒的Sf9细胞中,细胞凋亡率为32.1%,共转染毒素与抗毒素质粒时,细胞凋亡并不明显。由于检测细胞存活率和细胞凋亡率的原理有区别,而且除了细胞凋亡,还会出现一些机械性死亡,因此,存活率和死亡率的总和并不是100%。从而为后续构建鸳鸯染色体质粒提供理论依据。为了检测鸳鸯染色体品系果蝇与野生型果蝇杂交致死的效应,构建了质粒P1和P2,分别转染了Sf9细胞,Sf9细胞内均无荧光表达,毒素基因表达,在细胞水平验证了遗传致死的可行性。同时构建质粒P3和P4,尝试利用phi C31 integrase染色体定点插入系统显微注射果蝇胚胎获取转基因鸳鸯染色体果蝇品系。细胞水平上验证了构建鸳鸯染色体果蝇的可行性,为害虫综合防治研究提供新的思路。此体系不仅能够运用于果蝇中,在其余害虫防治中也具有巨大的潜力。