【摘 要】
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目的:探讨α-klotho（α-KL）在慢性肾脏病合并认知功能障碍大鼠中的表达情况。方法:取20只大鼠随机分为正常组和模型组,每组10只。模型组予尾静脉注射阿霉素造模。检测大鼠体重、24小时尿蛋白定量、血清肌酐和尿素氮,并行肾脏和脑海马组织HE染色、Morris水迷宫实验,以及ELISA检测血清α-KL的含量,RT-qPCR检测肾脏、海马组织的α-KL mRNA的相对表达量,Western印迹和免
【基金项目】
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广西自然科学基金项目（项目编号:2017JJA10384）,项目名称:Klotho与慢性肾脏病认知功能障碍的相关性研究；
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目的:探讨α-klotho（α-KL）在慢性肾脏病合并认知功能障碍大鼠中的表达情况。方法:取20只大鼠随机分为正常组和模型组,每组10只。模型组予尾静脉注射阿霉素造模。检测大鼠体重、24小时尿蛋白定量、血清肌酐和尿素氮,并行肾脏和脑海马组织HE染色、Morris水迷宫实验,以及ELISA检测血清α-KL的含量,RT-qPCR检测肾脏、海马组织的α-KL mRNA的相对表达量,Western印迹和免疫组化、免疫荧光检测肾脏和海马组织的α-KL蛋白水平。结果:（1）模型组大鼠的体重较正常组低,生长缓慢（P＜0.001）,24小时尿蛋白持续升高3个月（week2:7.40±2.85 vs 11.45±4.63g,week14:6.61±2.12 vs 152.69±66.03g,P＜0.05）,血清肌酐（48.20±16.09 vs 103.86±50.41μmol/l,P=0.026）和尿素氮（7.29±1.72 vs 16.88±5.46 mmol/l,P=0.003）水平升高,HE染色可见模型组肾组织出现结构破坏、纤维化、炎症浸润等改变,模型组海马组织细胞数量稍减少,锥体细胞排列较疏松、紊乱,可见神经元变性,部分胞体固缩深染;（2）Morris水迷宫实验:模型组大鼠定位航行实验最后2天的潜伏期延长（day3:9.02（9.84）vs 11.16（24.01）s,day4:6.22（4.04）vs 9.95（14.57）s,P=0.043,0.023）且空间探索实验中的穿台次数减少（day1:3.00（3.75）vs 1.00（1.00）次,day2:4.00（2.75）vs 1.00（1.00）次,P=0.003,0.003）;（3）模型组血清中α-KL的含量升高（0.83±0.72 vs2.08±1.01 ng/ml,P=0.033）;（4）RT-qPCR结果显示模型组大鼠肾脏和海马组织α-KL mRNA的相对表达量下降（P=0.002,P=0.0005）,Western印迹结果显示模型组大鼠肾脏和海马组织中α-KL蛋白的相对表达量也下降（P=0.0005,P=0.0005）,免疫荧光显示模型组肾脏组织中表示α-KL蛋白荧光较正常组减弱;免疫组化显示海马组织CA3区的阳性细胞计数（P=0.019）和平均光密度值（P=0.015）降低。结论:CKD大鼠血清α-KL升高、肾脏及海马中的α-KL水平降低;海马中的α-KL水平降低与CKD合并认知功能障碍有关。
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