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目的通过建立两肾一夹(two-kidney,one-clip:2k1c)肾血管性高血压大鼠的实验模型,观察2k1c大鼠心脏、肾脏纤维化的情况,探讨赖氨大黄酸(RHL)对2k1c大鼠的高血压、心脏及肾脏纤维化的作用,并进一步阐明RHL抑制大鼠心脏及肾脏纤维化的可能机制。为RHL降低肾血管性高血压、抑制心脏和肾脏纤维化的研究提供实验依据。方法1建造模型:本实验需要雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠35只,其中28只采用两肾一夹的手术方法来构建肾血管性高血压(RVH)大鼠模型,剩余7只为对照组(对照组即为假手术组)。术后四周测量各组大鼠的尾动脉收缩压(SBP),如果SBP较术前升高≥20mm Hg(1mm Hg=0.133k Pa),且高于140mm Hg为造模成功(共26只造模成功,造模成功率为93.33%)。2实验分组:对照组6只,从造模成功的26只大鼠中随机抽取24只分为模型组、赖氨酸组、大黄酸组和赖氨大黄酸组四组,每组6只。3在术后8周处死各组大鼠,并分别提取各组大鼠心脏及肾脏组织。4检测:(1)分别测量手术前、手术后4周、手术后8周时各组大鼠SBP。(2)分别测量各组大鼠的左心室的重量(LVW)、全身重量(BW)、左心室与全身体重的比值(LVW/BW),并提取心脏、肾脏组织进行下一步实验。(3)应用HE染色法观察各组大鼠心脏及肾脏的病理变化。(4)应用Masson三色染色观察各组大鼠心脏及肾脏纤维组织含量与分布。(5)应用免疫组织化学染色法观察各组大鼠心脏及肾脏中TGF-β1和CTGF因子的表达情况。(6)应用免疫荧光组织化学染色法观察各组大鼠心脏及肾脏中TGF-β1和CTGF因子的表达情况。结果1 SBP比较结果:(1)与术前比较:术后4周时的模型组及其它实验组四组大鼠的SBP均已上升>40mm Hg,差异有统计学意义(P<0.05),且高于140mm Hg,表明2k1c大鼠高血压模型建造成功。(2)术后8周时各组大鼠SBP比较:模型组与对照组相比,SBP明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);赖氨酸组与模型组比较,SBP无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);赖氨大黄酸组与赖氨酸组比较,SBP明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);赖氨大黄酸组与大黄酸组比较,SBP明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2左心室与全身体重的比值(LVW/BW)比较结果:模型组与对照组相比,LVW/BW明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);赖氨酸组与模型组相比,LVW/BW无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);赖氨大黄酸组与赖氨酸组相比,LVW/BW明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);赖氨大黄酸组与大黄酸组相比,LVW/BW稍降低,差异有统计学意义(P<0.05)。3 HE染色:结果显示,对照组大鼠的心肌及肾脏基本正常,无明显病理变化;模型组与对照组相比,大鼠心脏及肾脏可观察到纤维化程度增加;赖氨酸组与模型组相比,大鼠心脏及肾脏纤维化程度无明显变化;赖氨大黄酸组与赖氨酸组的比较,心脏及肾脏纤维化程度有所减轻。赖氨大黄酸组与大黄酸组相比,心脏及肾脏纤维化程度有所减轻。4Masson三色染色:模型组与对照组比较,大鼠心脏及肾脏组织中纤维含量显著增多(P<0.05);赖氨酸组与模型组比较,大鼠心脏及肾脏组织纤维含量无明显差别(P>0.05);经RHL治疗后,大鼠心脏及肾脏组织中纤维含量显著减少(P<0.05);与大黄酸组比较,RHL组较大黄酸组纤维含量明显减少(P<0.05)。5免疫组织化学染色:结果显示,对照组的心脏及肾脏的TGF-β1及CTGF轻微表达;模型组与对照组比较,大鼠心脏及肾脏的TGF-β1及CTGF表达增强(P<0.05);赖氨酸组与模型组比较,大鼠心脏及肾脏的TGF-β1及CTGF的表达无明显差异(P>0.05);赖氨大黄酸组与赖氨酸组比较,大鼠心脏及肾脏TGF-β1及CTGF表达明显减轻(P<0.05);赖氨大黄酸组与大黄酸组比较,大鼠心脏及肾脏TGF-β1及CTGF表达明显减轻(P<0.05)。6免疫荧光组织化学染色:结果显示,对照组的心脏及肾脏的TGF-β1及CTGF轻微表达;模型组与对照组比较,大鼠心脏及肾脏的TGF-β1及CTGF表达增强(P<0.05);赖氨酸组与模型组比较,大鼠心脏及肾脏的TGF-β1及CTGF的表达无明显差异(P>0.05);赖氨大黄酸组与赖氨酸组比较,大鼠心脏及肾脏TGF-β1及CTGF表达明显减轻(P<0.05);赖氨大黄酸组与大黄酸组比较,大鼠心脏及肾脏TGF-β1及CTGF表达明显减轻(P<0.05)。结论1 2k1c高血压大鼠模型建造成功,术后8周时可以导致大鼠心脏及肾脏纤维化增强。2赖氨大黄酸可以明显降低两肾一夹大鼠的高血压。3赖氨大黄酸可以减轻2k1c大鼠心脏及肾脏的纤维化程度。4 2k1c高血压大鼠的心脏及肾脏中的TGF-β1、CTGF因子表达增多,赖氨大黄酸能部分地抑制它们的过度表达,赖氨大黄酸可能通过抑制TGF-β1、CTGF的表达来降低心脏及肾脏纤维化的程度。