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目的:探讨莪黄灌肠液对人结直肠癌SW480细胞凋亡及细胞中HIF-1α、Bcl-2、Bag-1基因的影响。
方法:按照随机数学模型原则,将50只雌性SD大鼠随机分成5组并编号,体重控制在(280±10)g。适应性喂养1周,根据实验分组分别灌胃给药:莪黄灌肠液每毫升药液中含生药2.43g,莪黄灌肠液组由高、中、低(24.3g/kg,12.15g/kg,6.075g/kg)剂量组(灌胃剂量2ml)组成,空白组为生理盐水组(灌胃剂量2ml),阳性对照组为腹腔注射氟尿嘧啶(5-FU)0.025g/kg,调整注射剂量为1ml,给药1周后,无菌条件下提取各组含药血清。在体外使用含药血清培养SW480细胞,通过流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况以及各组细胞所处增殖周期的比例;应用WesternBlot法检测各组SW480细胞中HIF-1α、Bcl-2、Bag-1的表达。
结果:莪黄灌肠液(高、中、低剂量)组、5-FU组对比空白组,G2期的细胞比例均减少,(p<0.05);莪黄灌肠液高剂量组、5-FU组与空白组比较,S期细胞比例增多,(p<0.05),细胞周期G2(DNA复制完成期)比例明显降低(p<0.05)。各莪黄灌肠液组、5-FU组与空白组对比,均对SW480细胞有明显促进凋亡的作用(p<0.05)。莪黄灌肠液组与5-FU组比较,5-FU组细胞凋亡率高于各莪黄灌肠液组(p<0.05)。各莪黄灌肠液组组间凋亡率对比存在差异(p<0.05),浓度越高细胞凋亡率越高,凋亡程度与浓度呈正相关性。各莪黄灌肠液组、5-FU组中HIF-1α、Bcl-2、Bag-1三个目标蛋白的表达均低于空白组,并存在差异(p<0.05);莪黄灌肠液组与5-FU组比较,5-FU组三个目标蛋白表达低于各莪黄灌肠液组(p<0.05);各莪黄灌肠液组组间对比存在差异(p<0.05),莪黄灌肠液浓度与其对HIF-1α、Bcl-2、Bag-1蛋白的抑制力呈正相关。
结论:莪黄灌肠液可降低HIF-1α、Bcl-2、Bag-1基因表达;可减缓SW480细胞从S期向G2/M期的转化;可抑制SW480细胞的增殖。
方法:按照随机数学模型原则,将50只雌性SD大鼠随机分成5组并编号,体重控制在(280±10)g。适应性喂养1周,根据实验分组分别灌胃给药:莪黄灌肠液每毫升药液中含生药2.43g,莪黄灌肠液组由高、中、低(24.3g/kg,12.15g/kg,6.075g/kg)剂量组(灌胃剂量2ml)组成,空白组为生理盐水组(灌胃剂量2ml),阳性对照组为腹腔注射氟尿嘧啶(5-FU)0.025g/kg,调整注射剂量为1ml,给药1周后,无菌条件下提取各组含药血清。在体外使用含药血清培养SW480细胞,通过流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况以及各组细胞所处增殖周期的比例;应用WesternBlot法检测各组SW480细胞中HIF-1α、Bcl-2、Bag-1的表达。
结果:莪黄灌肠液(高、中、低剂量)组、5-FU组对比空白组,G2期的细胞比例均减少,(p<0.05);莪黄灌肠液高剂量组、5-FU组与空白组比较,S期细胞比例增多,(p<0.05),细胞周期G2(DNA复制完成期)比例明显降低(p<0.05)。各莪黄灌肠液组、5-FU组与空白组对比,均对SW480细胞有明显促进凋亡的作用(p<0.05)。莪黄灌肠液组与5-FU组比较,5-FU组细胞凋亡率高于各莪黄灌肠液组(p<0.05)。各莪黄灌肠液组组间凋亡率对比存在差异(p<0.05),浓度越高细胞凋亡率越高,凋亡程度与浓度呈正相关性。各莪黄灌肠液组、5-FU组中HIF-1α、Bcl-2、Bag-1三个目标蛋白的表达均低于空白组,并存在差异(p<0.05);莪黄灌肠液组与5-FU组比较,5-FU组三个目标蛋白表达低于各莪黄灌肠液组(p<0.05);各莪黄灌肠液组组间对比存在差异(p<0.05),莪黄灌肠液浓度与其对HIF-1α、Bcl-2、Bag-1蛋白的抑制力呈正相关。
结论:莪黄灌肠液可降低HIF-1α、Bcl-2、Bag-1基因表达;可减缓SW480细胞从S期向G2/M期的转化;可抑制SW480细胞的增殖。