CdTe@SiO2@PDA复合物的制备与microRNA比率荧光分析

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大量研究表明,内源性、非编码的microRNA(miRNA)作为重要的疾病标记物,在人体内的表达水平与诸多高发重症密切相关。自从miRNA被发现以来,发展了许多针对miRNA的检测方法。其中,纳米荧光探针在选择性、灵敏度等方面具有较大优势,并且操作简便,因而在mi RNA等疾病标志物的检测方面获得了迅速发展,目前已有大量有应用价值的荧光探针被开发出来。然而,传统的mi RNA荧光探针在实际应用时往往存在单一信号输出不稳定、易受背景干扰、制作成本高昂等局限性。本文设计了一种核-壳-壳结构的纳米复合物,并以此为基础,同时结合比率型探针和非标记型荧光探针的优势,构建了一种非标记型比率荧光探针,用于mi RNA的分析应用。具体内容包括以下两个方面:(1)利用量子点(QDs)荧光强而稳定、Stokes位移大、发射波长可调控的特性,以及二氧化硅优良的生物相容性和透光性,制备并优化了CdTe量子点@二氧化硅(CdTe@SiO2)纳米颗粒。分别探究了反向微乳液法和改进St(?)ber法对二氧化硅壳层厚度的可调控性,最终通过控制改进St(?)ber法中正硅酸四乙酯(TEOS)和氨水的加入量,使Cd Te@SiO2的二氧化硅层厚度在20 nm到80 nm范围内可调。进一步,利用聚多巴胺(PDA)的荧光淬灭性质以及表面易于修饰的特点,设计了一种荧光可调节、表面可修饰的量子点@二氧化硅@聚多巴胺(CdTe@SiO2@PDA)核-壳-壳多功能纳米复合物。为后续的应用提供基础。(2)基于CdTe@SiO2@PDA复合物的荧光发射峰位可调、荧光强度稳定、表面容易修饰等优势,设计了一种非标记型比率荧光探针,以CdTe量子点荧光为内参比,SYBR GreenⅠ(SGⅠ)染料的荧光为输出信号,利用二者的荧光比值建立了一种针对miRNA的分析策略。以mi RNA-155为分析模型探究了该探针对特定靶标的检测能力,在0.1~10n M范围内具有良好的线性,检测限为0.1 n M。该分析平台集合了非标记型荧光探针的简单易合成、材料易获得,以及比率型荧光探针的信号可信度高、能有效降低背景干扰等诸多优势于一体,为miRNA的分析检测提供了新方法。
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