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柑橘为芸香科植物,浑身是宝,其橘核、橘络、橘红、橘白、青皮、陈皮及橘叶皆可入药。我国柑橘品种资源多,我国柑橘栽培面积广泛,为我国第二大水果,其果实不仅用于鲜食,而逐渐成为柑橘加工与深加工的重要原材料。柠檬苦素为广泛存在于芸香科柑橘属和楝科植物生物活性物质,由于其具有抗癌、抑菌、镇痛和抗焦虑等功效而成为当今研究的热点。但目前对于柑橘果实的功效成分研究主要集中在黄酮、生物碱和挥发油等方面,而对果实柠檬苦素的研究未见系统深入研究报道。为促进柑橘果实柠檬苦素利用及富含柠檬苦素柑橘种质的挖掘,本试验以湖南19种柑橘果实为试材,在进行柑橘不同种类品种,及其果实不同生长发育过程中柠檬苦素含量分析研究基础上,进行了柑橘柠檬苦素的提取、分离纯化与分析检测等系列研究,主要研究结果如下:1.建立了柠檬苦素高效液相色谱分析检测方法。其色谱条件:色谱柱为WeLchrom C18(4.6×250mm,5μm);流动相采用V乙脯:V水=45:55等度洗脱;流速1.0mL/min;柱温为30℃;检测波长为210nm。经过考察此方法对柠檬苦素有着良好的线性关系,相关系数为0.9998,其加标回收率在92.84%~99.71%之间,精密度为0.69%,此方法简便快速,可以用于柑橘果实柠檬苦素柠檬苦素定量分析。2.通过采用高效液相色谱检测对柑橘不同种类品种果实种子、果皮及果肉部位烘干前后的柠檬苦素含量检测分析表明,不同种类品种柑橘成熟果实间各部位(种子、果皮、果肉)柠檬苦素含量均存在显著差异。其中以宽皮柑橘和有核甜橙及酸橙柠檬苦素含量较高,柚类(除菊花芯柚外)柠檬苦素含量降低。所有品种柑橘果实中,均以种子的柠檬苦素含量最高,其次为果皮,而果肉含量最低。以新鲜宽皮柑橘和有核甜橙及酸橙的种子与果皮作为原料提取柠檬苦素效果最好。3.研究了10种果实的不同生长发育时期柠檬苦素含量,并且进一步探究了菊花芯柚、溆浦长形甜橙、湘西椪柑、张家界“纠纠”果实生长发育过程中柠檬苦素含量变化。其结果表明,4个品种的柑橘果实在生长发育过程中柠檬苦素呈现先上升,后下降,到逐渐趋于稳定的趋势。其中,菊花芯柚柠檬苦素上升下降趋势尤为明显。四种柑橘果实在花后120d左右其柠檬苦素含量都达到最大值。4.通过单因素试验与正交试验,确定柑橘果实柠檬苦素采用超声提取最佳,其最适提取条件为:用85%乙醇以料液比为1:30的用量,在55℃下提取20min,柠檬苦素得率为2.01%。选择D101作为柠檬苦素纯化最佳树脂,其吸附率为88.53%,解析率为93.47%。采用D101大孔树脂纯化柠檬苦素最佳工艺参数为:上样流速为1mL/min,上样浓度为0.5mg/mL,洗脱流速为2mL/min,洗脱醇浓度为80%乙醇,用量为240mL。