大鼠视网膜急性缺血损伤时视网膜神经节细胞脑红蛋白的表达

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目的:研究大鼠视网膜急性缺血中视网膜节细胞(Retinal ganglion cells, RGCs)死亡时脑红蛋白(Neuroglobin, Ngb)的表达。方法:实验研究。成年SD大鼠40只,2-3月龄,体重220-240g,雌性,采用特异性结扎大鼠视网膜动脉的方法造成视网膜急性缺血模型,按照结扎时间不同(0、15、30、60 min)分为4组,每组10只大鼠,均以左眼为实验眼。每组随机选取3只大鼠视网膜用于免疫印迹法检测,取4只大鼠的视网膜分别做荧光金(Fluorogold, FG)逆行标记节细胞计数及免疫组化染色荧光强度分析,3只大鼠做免疫电子显微镜观察。所有数据均采用单因素方差分析进行统计学比较,采用LSD-t检验进行两两比较。结果:视网膜完全结扎15min时,视网膜中Ngb表达最高(P=0.000),之后逐渐降低,到结扎30min时,Ngb表达接近正常(P=0.728),此时与0min组比较RGCs数量开始减少(P=0.011),结扎60min时,Ngb的表达已明显低于Omin组(P=0.001),与Omin组比较RGCs数量进一步减少(P=0.000)。在视网膜各层中,Ngb的表达以RGCs层为最高,其次为内丛状层与外丛状层。RGCs中Ngb主要分布在胞质,结扎30min时线粒体外室和线粒体嵴也发现有Ngb表达,而内核层及外核层细胞的胞质内始终未见Ngb的表达。结论:Ngb在大鼠RGCs急性缺血死亡时表达快速升高,主要表达于RGCs的胞质内,与RGCs的生存状态关系密切。
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