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[目 的]帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是临床上第二常见的神经退行性疾病,典型的病理改变是大脑黑质致密部（substantia nigra pars compacta,SNpc）多巴胺能神经元（Dopaminergic neuron,DAN）的丢失。现有研究证明,微小RNA（microRNA,miRNA）在PD的发生发展中扮演着重要角色,可以调节PD模型的凋亡和自噬参与PD的发生发展。有研究显示,miR-590-3p在1-甲基-4-苯基吡啶离子（1-Methyl-4-phenylpyridine,MPP+）诱导的SH-SY5Y细胞中低表达,但miR-590-3p 在 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy-dropyridine,MPTP）诱导的PD小鼠模型中表达尚不清楚,且miR-590-3p对PD体内、体外模型中凋亡和自噬相关蛋白的调节及更深入的分子机制目前也没有进一步研究。本研究旨在探究miR-590-3p在PD体内、体外模型中对DAN凋亡和自噬的潜在作用,并探讨其可能的作用机制。[方 法]1、利用MPTP/MPP+分别构建DAN损伤的PD体内和体外模型,通过CCK-8法检测SH-SY5Y细胞活力,蛋白质免疫印迹（Western Blotting,WB）检测PD标志性蛋白酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）的表达,免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）检测小鼠黑质（substantia nigra,SN）和纹状体区域DAN损伤,爬杆实验检测PD小鼠运动功能的改变,最后通过实时荧光定量 PCR（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）检测 miR-590-3p 表达变化。2、在 SH-SY5Y 细胞和 C57 BL/6 小鼠分别通过 miR-590-3p mimics/inhibitor和miR-590-3p过表达慢病毒（Lentiviral,LV）来干扰miR-590-3p水平变化,随后给予MPTP/MPP+处理建立PD模型,利用RT-qPCR检测miR-590-3p表达水平,CCK-8法检测miR-590-3p对细胞活力的影响。通过流式细胞术、蛋白质免疫印迹（Western Blotting,WB）研究miR-590-3p过表达或下调对PD模型凋亡、自噬以及磷脂酰肌醇 3-激酶（phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K）/蛋白激酶 B（Protein Kinase B,PKB,Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路关键蛋白表达的影响,IHC验证miR-590-3p表达增加对SN和纹状体区域DAN的保护。最后,本课题组利用爬杆试验检测miR-590-3p水平增加对PD小鼠运动功能的改善。[结 果]1、MPTP/MPP+可以成功建立DAN损伤的PD体内、体外模型,miR-590-3p在MPTP/MPP+诱导的PD体内、体外模型中表达降低。MPP+可以成功诱导SH-SY5Y细胞成为DAN损伤的PD细胞模型,并证实miR-590-3p表达随MPP+浓度增加而降低。当MPP+浓度1mM时,SH-SY5YPD细胞模型中miR-590-3p表达明显降低（P＜0.001）。MPTP可以成功建立PD小鼠模型,爬杆实验显示,MPTP模型组较阴性对照（negative control,NC）组爬杆时间明显增加（P＜0.05）。同时,miR-590-3p在MPTP模型组中表达降低（P＜0.05）。2、与NC组相比,过表达miR-590-3p水平可以提高MPP+处理后细胞存活能力,减少MPTP/MPP+诱导的PD模型细胞凋亡水平。与NC组相比,过表达miR-590-3p水平可以抑制MPTP/MPP+诱导的凋亡和自噬相关蛋白的表达增加,包括 cleaved-caspase3、Beclin1 蛋白以及 Bcl-2/Bax 和 LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比率,同时增加P62的表达（均P＜0.05）,而抑制miR-590-3p水平可以促进凋亡和自噬相关蛋白的表达增加（均P＜0.05）。此外,本课题组发现,在MPTP/MPP+诱导的PD模型中,PI3K、Akt、mTOR 没有明显差异,而磷酸化 PI3K（phospho-PI3K,p-PI3K）、磷酸化 Akt（phospho-Akt,p-Akt）、磷酸化 mTOR（phospho-mTOR,p-mTOR）蛋白表达下降,过表达miR-590-3p水平可以恢复p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的表达（均P＜0.05）。而抑制miR-590-3p表达水平可以减少p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的表达（均P＜0.05）。最后,过表达miR-590-3p水平可以逆转MPTP诱导的PD动物模型DAN的丢失以及TH的减少,同时可以缓解MPTP诱导的运动障碍。[结 论]1、miR-590-3p在MPTP/MPP+诱导的DAN损伤的PD小鼠和SH-SY5Y细胞模型中低表达。2、miR-590-3p可能通过PI3K/Akt/mTOR通路调控MPTP/MPP+诱导的PD小鼠和SH-SY5Y细胞模型DAN的凋亡和自噬,改善小鼠运动功能。