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本实验以珍珠龙胆石斑鱼(♀Epinephelus fuscoguttatus×♂Epinephelus lanceolatu)幼鱼为研究对象,在广东海洋大学东海岛海洋生物研究基地室内海水养殖系统中分别实施3个养殖实验。旨在研究脂肪源、n-3 HUFA及DHA/EPA水平对珍珠龙胆石斑鱼幼鱼生长性能、组织脂肪酸组成、脂肪代谢相关酶活性及其m RNA表达量、免疫力及抗病力的影响。结果如下:1.以白鱼粉、豆粕、小麦谷朊粉为主要蛋白源,并分别以鱼油(FO)、大豆油(SO)、亚麻籽油(LO)、菜籽油(RO)及花生油(PO)为脂肪源,配制成5种等氮(粗蛋白约49%)、等脂(粗脂肪约11%)的实验饲料,分别投喂初重为17.67±0.03 g的石斑鱼幼鱼8周。结果表明:FO组有最大增重率(WG),显著高于SO、RO和PO组(P<0.05),与LO组无显著差异(P>0.05)。各处理组肝脏和肌肉的脂肪酸谱反映了5种饲料的脂肪酸组成特点。FO组有最高血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性,显著高于其它各组(P<0.05)。LO组肠道脂肪酶、胰蛋白酶及淀粉酶活性最高。FO组肝脏脂肪酸合成酶(FAS)活性显著高于SO、RO和PO组(P<0.05),与LO组无显著差异(P>0.05)。LO组肝脏肉碱酯酰转移酶-1(CPT-1)活性最高,显著高于PO组(P<0.05),但与其它各组无显著差异(P>0.05)。FO组肌肉FAS、CPT-1和激素敏感性脂肪酶(HSL)活性最高,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性最低。SO组肝脏CPT-1和过氧化物增殖酶体?(PPAR?)m RNA表达量显著高于RO和PO组(P<0.05),但与FO组无显著差异(P>0.05);LO组脂蛋白酯酶(LPL)m RNA表达量显著高于其它各组(P<0.05)。LO组载脂蛋白-100(Apo B-100)m RNA表达量有最大值,显著高于RO和PO组(P<0.05),但与FO和SO组无显著差异(P>0.05)。FO组肝脏CAT m RNA表达量显著高于SO和RO组(P<0.05),但与LO和PO组无显著差异(P>0.05)。PO组与其它组相比,肝脏toll样受体3(TLR3)、toll样受体22(TLR22)及髓样分化因子88(My D88)m RNA表达量显著上升(P<0.05);RO组的肿瘤坏死因子-?(TNF-?)和白细胞介素-1?(IL-1?)m RNA表达量显著高于FO组(P<0.05),但与SO和PO组无显著差异(P>0.05)。PO组的白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-?1(TGF-?1)m RNA表达量最低。FO组TGF-?1 m RNA表达量显著高于PO组(P<0.05),但与SO、LO和RO组无显著差异(P>0.05)。本实验表明,LO组石斑鱼生长性能与FO组无显著差异;植物油(VOs)完全替代FO会抑制石斑鱼抗氧化能力;PO会加剧炎症反应;SO和LO通过上调肝脏脂肪分解酶基因,提高了脂肪分解代谢能力;LO和RO提高了肠道消化吸收能力。2.通过调整饲料中鱼油和玉米油添加量,配制成6种含n-3 HUFA水平分别为0.65%(对照组)、1.00%、1.35%、1.70%、2.05%和2.40%的等氮(粗蛋白约50%)、等脂(粗脂肪约11%)的实验饲料,分别投喂初重为12.06±0.01 g的石斑鱼幼鱼8周。结果表明:随着饲料中n-3 HUFA水平的增加,WG呈现先升高后降低的趋势,1.35%组显著高于对照组和2.40%组(P<0.05)。1.00%组体粗脂肪含量显著低于1.70%和2.40%组(P<0.05),但与其它各组无显著差异(P>0.05)。肝脏和肌肉的脂肪酸谱反映了饲料脂肪酸组成情况。与对照组相比,血清甘油三酯(TG)的浓度随着饲料n-3 HUFA水平的增加而显著降低(P<0.05)。1.35%组血清总胆固醇(CHOL)显著低于2.05%组(P<0.05),但与其它各组无显著差异(P>0.05)。饲料n-3 HUFA水平显著影响攻毒前血清SOD、CAT、GSH-Px、溶菌酶(LZM)活性和补体C3含量(P<0.05),但对攻毒后血清LZM无显著影响(P>0.05)。攻毒后,血清CAT、GSH-Px、LZM活性和C3含量较攻毒前均明显增加,而SOD则呈相反趋势。1.35%组肝脏FAS活性最低,显著低于1.00%、1.70%和2.40%组(P<0.05),但与对照组和2.05%无显著差异(P>0.05)。在肌肉中,FAS活性随饲料n-3 HUFA的增加而降低,2.05%和2.40%组显著低于其它各组(P<0.05)。CPT-1和HSL的活性分别在饲料n-3HUFA水平为2.05%和1.70%时达到最大值,显著高于对照组(P<0.05),但与其它各组无显著差异(P>0.05)。2.05%组肝脏CPT-1和2.40%组肝脏Apo B-100 m RNA表达量显著高于其它各组(P<0.05);2.40%组肝脏甘油三脂脂肪酶(ATGL)活性显著高于1.35%和1.70%组(P<0.05)。随着饲料n-3 HUFA水平的增加,肝脏FAS、乙酰辅酶A羧化酶(ACC?)及过氧化物增殖酶体?(PPAR?)m RNA表达量显著降低(P<0.05)。在肌肉中,随着饲料n-3 HUFA水平的增加,CPT-1、ATGL及PPAR?m RNA表达量呈先升高后降低的趋势,分别在1.70%和1.35%组达到最大值。攻毒前,2.40%组肠道TLR22和My D88 m RNA的表达量显著增加,2.05%组TNF-?和IL-1?m RNA表达量显著高于1.00%和1.35%组;此外,1.70%组肾脏TLR22和IL-1?m RNA表达量显著低于对照组。攻毒后,1.35%组肠道My D88 m RNA表达量显著高于1.00%和1.70%-2.40%组,1.70%组TNF-?和IL-1?m RNA表达量最低;1.70%组肾脏IL-10 m RNA表达量显著高于其它各组,而IL-1?m RNA表达量显著低于2.40%组。2.05%组肠道脂肪酶和胰蛋白酶活性最高。随着饲料n-3 HUFA水平的增加,肠道OTUs数目显著下降(P<0.05)。在门水平上,变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)及厚壁菌门(Firmicutes)为优势菌门。n-3 HUFA的添加可使拟杆菌科(Bacteroidales＿S24-7＿group)和毛螺菌科(Lachnospiraceae)的相对丰度增加。本实验表明,适宜的n-3 HUFA(1.47%-1.70%)可显著提高石斑鱼的生长性能、抗病力和炎症抑制能力;促进了肝脏和肌肉脂肪分解代谢,抑制了合成代谢,降低了脂肪的沉积;饲料n-3 HUFA水平的增加,可以提高肠道益生菌的丰度,饲料中1.00%和1.35%的n-3 HUFA显著了促进了石斑鱼前肠组织结构完整性。3.通过调整DHA纯化油和EPA纯化油添加量,配制成5种DHA/EPA比值分别为0.77(对照组)、1.31、2.44、3.20和4.10的等氮(粗蛋白约48%)、等脂(粗脂肪约12%)的实验饲料,投喂初重9.87±0.02 g的石斑鱼幼鱼8周。结果表明:随着饲料中DHA/EPA比值的增加,WG与SGR呈现先升高后降低的趋势,1.31组显著高于对照组和4.10组(P<0.05),与其它各组无显著差异(P>0.05)。随着DHA/EPA比值的增加,血清TG含量显著降低,高密度脂蛋白(HDL-C)含量显著升高(P<0.05)。1.31组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)最低,显著低于4.10组(P<0.05)。2.44组血清SOD、CAT及GSH-Px的活性显著高于0.77和1.31组(P<0.05)。血清LZM、碱性磷酸酶(AKP)活性及免疫球蛋白(Ig M)含量随DHA/EPA比值的增加呈先升高后降低的趋势,分别在2.44和3.20组达到最大值且显著高于对照组(P<0.05)。3.20和4.10组肝脏CPT-1和G6PD活性显著高于0.77和1.31组(P<0.05)。2.44和3.20组肌肉CPT-1和LPL活性显著高于0.77和1.31组(P<0.05)。2.44组肝脏CPT-1和PPAR?m RNA表达量最高,显著高于对照组(P<0.05);3.20组肝脏FAS m RNA表达量最低,显著低于对照组和1.31组;对照组肝脏ACC?m RNA表达量显著高于其它各组(P<0.05)。2.44组肌肉CPT-1 m RNA表达量最高,显著高于对照组(P<0.05);而1.31组的6GPD m RNA表达量显著低于4.10组(P<0.05)。本实验表明,饲料DHA/EPA比值为2.12时,珍珠龙胆石斑鱼幼鱼有最佳的WG;适宜的DHA/EPA比值(1.31-3.20)可显著提高其抗氧化能力及降低脂肪的过量沉积。