化合物活性筛选是创新药物研究的起点和具有决定意义的步骤，是源头创新和持续创新的关键。离开筛选，就无从发现具有某种特定生物活性的新型化学物质，新药的研究开发就将成为无源之水。但是，这种基本技术能力恰恰是我国创新药物研制中最为突出的薄弱环节，成为制约医药工业转型的"瓶颈"之一。传统的动物筛选模式劳动强度大，效率低。近年来，随着分子生物学、分子药理学和自动化技术的发展，高通量药物筛选(High throughput screening, HTS)成为药物早期发现的重要手段，它是利用药靶的分子或细胞水平的生物学机制，以微孔板为基础，进行大量筛选，找到能选择性作用于药靶的活性化合物，具有微量、快速、灵敏、准确等优点。Neuromedin U（NMU）是高效表达在肠道和中枢神经系统的一种神经多肽，大鼠禁食48小时后下丘脑中NMU的mRNA水平降低，提示该神经多肽可能涉及饮食行为。事实上，在大鼠脑内注射NMU将降低其食欲。已发现孤儿G蛋白偶联受体FM-4是NMU的一个内源受体(取名为NMU2受体或NMU2R)，杂交分析表明，NMU2受体高效表达在下丘脑的室旁核，属Gq蛋白偶联受体，用NMU激活NMU2受体转染的HEK293细胞株能增加细胞内的钙信号。为了进一步了解NMU2受体的生理功能和开展抗肥胖新药研究，作者建立了NMU2受体激动剂的高通量筛选模型，并以天然产物为资源，筛选和鉴定了NMU2受体的激动剂。建立了人NMU2受体基因质粒（hNMU2R/ pcDNA3.1）和一个能同时响应Gs、Gi和Gq受体的报告基因质粒（MRE/CRE/SRE/LUC），并将NMU2受体质粒和报告基因质粒共转染到HEK293细胞，通过G418筛选，建立了稳定的hNMU2受体激动剂筛选细胞株。当化合物与膜表面的NMU2受体结合后，激活NMU2受体对应的信号级联反应，改变胞内第二信使的表达水平，响应元件响应这种变化，促进报告基因的表达，通过检测细胞质中报告基因的表达量，间接评估化合物的生物活性。为了有效排除筛选过程中的假阳性和假阴性，同时建立了只含报告基因质粒的阴性细胞株和其它受体（MC4R、M1R）筛选细胞株。利用 cAMP响应元件CRE的激活剂Forskolin和受体内源激动剂探索和优化了荧光素酶表达时间、每孔细胞数目、溶剂DMSO终浓度、荧光素酶底物浓度等筛选实验条件，建立了可靠的筛选方法。结果显示，NMU2R、MC4R、M1R筛选细胞株最适宜条件为：细胞数目4～8×104个/孔、激动剂孵育时间6～8h、每孔DMSO终浓度小于1％、荧光素酶底物终浓度为12.5％(V%)；筛选模型Z’-因子分<WP=6>别为0.75、0.67和0.7，适用于NMU2R、MC4R和M1R激动剂的高通量筛选。利用建立的筛选模型，对211种天然产物水提物进行了小规模筛选，发现127种天然产物水提物对NMU2受体有活性，通过对其中部分天然产物分离、纯化及鉴定，发现一些具有特殊结构的黄酮甙化合物激活或部分激活NMU2受体，但它们不能激活MC4、M1受体细胞株和阴性细胞株响应，提示这些黄酮甙化合物可能是NMU2受体的激动剂或部分激动剂。单纯性动物肥胖实验显示，活性单体芦丁具有减轻肥胖大鼠体重、降低血糖、调节血脂、改善胰岛素抵抗的作用。综上所述，本文建立的筛选模型能够用于NMU2受体激动剂的高通量筛选，采用的分离纯化方法能有效地从天然产物中分离和鉴定NMU2受体的活性单体。