赭曲霉毒素（Ochratoxin）是一类有毒的微生物代谢产物，由曲霉属真菌和青霉属真菌代谢产生，其中毒性比较强的是赭曲霉毒素A(OchratoxinA，OTA)，尤其对肾脏能造成很强的损伤，临床上被认为是一种主要的肾毒素。由于在一些农产品中经常发生赭曲霉毒素中毒事件，近年来，赭曲霉毒素及其检测研究越来越受到人们的重视。　　 本研究旨在通过制备赭曲霉毒素A单克隆抗体，并对此进行初步鉴定，为今后检测食品中OTA的残留提供实验基础。　　 方法:1、将OTA与牛血清白蛋白(BSA)的偶联产物（购自sigma公司）用10 mM磷酸盐缓冲液(PBS)稀释成1ug/ul备用。采用碳二亚胺法将OTA偶联到血蓝蛋白（KLH），紫外吸收和ELISA测定偶联产物以确定是否偶联成功。　　 2、采用小剂量长周期的免疫方案，OTA-BSA偶联产物免疫雌性B ABL/c小鼠，分别以BSA、OTA-KLH作为包被抗原，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中抗体的效价，选取效价最高的小鼠取脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0融合，以OTA-KLH作为包被抗原，以BSA作对照，ELISA检测杂交瘤细胞上清中的抗体，获得分泌抗OTA的杂交瘤细胞株，有限稀释法对分泌抗OTA杂交瘤细胞进行克隆化，ELISA确定抗体的特异性，并获得单克隆细胞株。腹水诱生法大量制备抗OTA的单克隆抗体，并以ELISA检测腹水效价，同时以BSA、KLH作包被抗原对照，观察有无交叉反应。　　 结果:小鼠骨髓瘤细胞(SP2/O)与小鼠脾细胞细胞融合后，ELISA筛选抗体分泌阳性且与BSA反应呈阴性的杂交瘤细胞株，对分泌抗OTA特异性抗体的杂交瘤细胞进行4轮克隆化，抗体阳性率达到了100％，建立了2株能稳定分泌抗OTA抗体的单克隆杂交瘤细胞株，命名为2D8和3G11。腹水诱生法制备了大量的单克隆抗体，腹水抗体效价分别为:1∶102400和1∶51200，而且与BSA和KLH无交叉反应。通过间接竞争酶联免疫吸附法的评价，2D8检测下限为0.16 ng/ml，半抑制浓度为31.87 ng/ml;3G11检测下限为1.61 ng/ml，半抑制浓度为94.90ng/ml。