多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是骨髓恶性浆细胞疾病,它是以骨髓内恶性浆细胞积聚为特征的不治之症。目前,经过长时间的克隆演变,MM已变成了一种耐受多种药物的疾病,抗药性是其复发及不可治愈的主要原因,因此对其耐药性机制的研究变得极为重要。癌细胞抗药性受微环境影响,微环境中细胞间信息的传递和细胞间的相互作用对细胞存活及其抗药性有重要作用。细胞间相互作用主要是通过黏附分子来调节的。有报道称黏附分子VLA-4在胞外基质调节的骨髓瘤细胞的抗药性中有着一定的作用。我们发现转录因子NF-κB对骨髓瘤的抗药性起着决定性的作用。基于这些背景和前期的一些实验结果,我们推测VLA-4它可能是一个尚未被发现的NF-κB下游分子。因此,本论文旨在研究NF-κB对VLA-4基因表达的调控作用。通过序列分析找出了所有可能的NF-κB结合位点。根据这些位点在上游序列中的位置,设计适当引物分段合成α4亚基基因调控序列并将其克隆到报告基因载体中。报告基因分析表明,这些含有NF-κB结合位点的VLA-4α基因上游序列对作为报道基因的荧光酶的表达几乎没有调控作用。考虑到内含子中有包含调控序列的可能性,找出了位于内含子中的8个可能的NF-κB结合序列,遗憾的是,这些序列对荧光酶的表达水平均没有实质意义的提高。同时,我们也在构建的报告基因质粒中进行了NF-κB潜在结合位点的删除,结果发现NF-κB潜在结合位点删除也未对相对荧光素酶活性产生影响。在研究过程中发现,表达VLA-4α的U937细胞基因组中VLA-4α上游调控序列-2328位的碱基为C,而不表达VLA-4α的Hela细胞中同位置为T。为探索此SNP是否对VLA-4的表达产生影响,克隆了总共8个细胞的相应基因组序列并测序,结果显示VLA-4α既在含SNP的细胞中,也在不含SNP的细胞中表达,故SNP不是影响VLA-4表达水平的主要因素。我们还检查了TNF-α激活NF-κB前后VLA-4α在转录水平和其在细胞表面表达水平的变化,但均未发现明显改变。因此,我们得出结论,NF-κB可能不是VLA-4的主要调节因子,或其调节功能受负调节因子的抑制,或其调节作用只在特定情况下起作用。