搜风祛痰中药对动脉粥样硬化ApoE基因敲除小鼠NLRP3炎症小体的影响

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目的:观察搜风祛痰中药对Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块NLRP3炎症小体的影响。材料与方法:搜风祛痰中药:全蝎,蜈蚣,地龙,陈皮,法半夏,白术,水蛭,加工制成含生药2 g/ml中药浓缩液备用,阿托伐他汀钙片:10 mg/片。选取6周大雄性Apo E基因敲除小鼠高脂饮食喂养13周建立动脉粥样硬化不稳定斑块模型,随机分为模型组,搜风祛痰低、中、高剂量组,阿托伐他汀组;另取6周大C57BL/6J雄性小鼠设为空白对照组。空白对照组及模型组均给予0.9%生理盐水灌胃,搜风祛痰中药低、中、高剂量组以及阿托伐他汀组分别给予不同剂量的搜风祛痰中药汤剂和阿托伐他汀片干预。13周后处死小鼠,HE染色观察腹主动脉斑块面积,生化自动分析仪检测血脂总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)含量,Western Blot法检测各组小鼠NLRP3、caspase-1、ASC蛋白表达水平,RT-PCR法检测NLRP3、caspase-1、ASC m RNA表达水平。结果:1.各组小鼠HE染色结果显示,空白对照组:小鼠腹主动脉未见异常现象,血管内膜无斑块。模型组:小鼠腹主动脉壁不完整,内膜增厚,有动脉粥样硬化斑块形成。搜风祛痰中药低、中、高剂量组以及阿托伐他汀组:腹主动脉内膜均有不同程度的斑块,但其面积均小于模型组,其中搜风祛痰中药中剂量组斑块面积最小。与模型组比较,搜风祛痰中药各剂量组和阿托伐他汀组斑块面积均明显减少。2.各组小鼠血脂检测结果显示,与空白对照组相比,模型组TC、TG、LDL-C含量均升高(P<0.05);HDL-C含量均降低(P<0.05);与模型组相比,搜风祛痰中药各剂量组与阿托伐他汀组TG、T-CHO、LDL-C含量均降低(P<0.05),HDL-C含量均升高(P<0.05)。3.Western Blot检测小鼠腹主动脉NLRP3、caspase-1、ASC蛋白表达的结果显示,与空白对照组相比,模型组NLRP3、caspase-1、ASC蛋白含量升高(P<0.05);与模型组相比,搜风祛痰中药各剂量组与阿托伐他汀组NLRP3、caspase-1、ASC蛋白含量均降低(P<0.05)。4.RT-PCR法检测各组小鼠腹主动脉NLRP3、caspase-1、ASC m RNA表达的结果显示,与空白对照组相比,模型组NLRP3、caspase-1、ASC m RNA表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,搜风祛痰中药各剂量组与阿托伐他汀组NLRP3、caspase-1、ASC m RNA表达水平均降低(P<0.05)。结论:1.搜风祛痰中药在一定程度上可以降低动脉粥样硬化小鼠血脂水平,稳定斑块,从而起到对血管的保护作用。2.搜风祛痰中药可抑制细胞炎症反应,下调NLRP3炎症小体的表达,这可能是搜风祛痰中药早期治疗动脉粥样硬化的分子机制之一。
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