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背景与目的阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种起病隐匿的进行性神经退行性疾病,目前病因尚不清楚,其临床特点是全面性痴呆。β淀粉样蛋白（β-amyloid,Aβ）斑块是AD的典型病理特征之一,在淀粉样蛋白级联假说中扮演重要角色。既往研究表明,Aβ斑块的沉积能够促进神经纤维缠结（Neurofibrillary tangles,NFT）和神经炎斑块（Neuritic plaques,NPs）的形成,Aβ斑块的毒性成分还有可能激发氧化应激造成神经元损伤。然而,Aβ斑块与AD患者认知能力下降之间却缺乏相关性,并且迄今为止利用单克隆抗体清除AD病人脑中Aβ斑块的治疗在临床试验中均以失败告终。既往研究在去世后人脑的病理检查中发现有不同类型的Aβ斑块（弥漫样斑块和致密核心斑块）,因此有必要对Aβ斑块进行更全面和细致的分析,并对影响包括Aβ在内的AD神经病理改变的机制进行更深入的探究。免疫球蛋白（Immunoglobulin,IgG）Fc受体家族（Fc-gamma receptor,FcγRs）参与了多种先天和获得性免疫反应的调节,使其成为新的免疫治疗途径的开发靶点,近年来受到越来越多的关注。FcyRs除了抑制性亚型FcγRⅡb,其余均为激活性亚型。研究发现在AD患者和神经退行性变转基因小鼠脑中的小胶质细胞上FcyRs表达均增加,而经主动免疫治疗后Aβ斑块清除的AD脑中小胶质细胞上FcγRⅠ表达则会减少,说明小胶质细胞上FcγRs介导的免疫功能在AD中发挥重要作用;此外神经元FcγRⅡb已被证明有助于β淀粉样蛋白介导的神经毒性,以及可介导有毒蛋白之间的病理关联。尽管目前关于抑制性FcγRⅡb参与AD的作用机制已有相对较多的研究,然而关于激活型FcyRs（包括FcγRⅠ和FcγRⅢ等）在AD发生发展机制中的作用尚未完全明确。本研究的目的是明确AD人脑皮层中Aβ斑块类型的变化,明确激活型FcγRs的细胞定位和AD疾病背景下的表达变化,并探讨其参与AD相关的Aβ斑块形成和神经炎症病理改变的机制。材料与方法人脑组织样本来自国家发育和功能人脑组织资源库（中国医学科学院基础医学研究所）,用于探究AD人脑皮层中Aβ斑块类型变化,确定激活型FcγRs（包括FcγRⅠ/FcγRⅢ）在人脑中的细胞定位和AD状态下的表达变化。使用野生型小鼠和APP/PS1 AD模型小鼠,确定FcγRⅠ/FcγRⅢ在鼠脑中的细胞定位和AD状态下的表达变化。采用腺病毒相关病毒（Adeno-Associated Virus,AAV）介导的小胶质细胞FcγRⅢ过表达小鼠,探究小胶质细胞FcγRⅢ激活对AD神经病理的影响。1、脑捐献者的基本信息收集和生前认知状态评估:通过符合伦理批准的遗体捐献程序收集脑捐献者的人口学信息和生前病史信息,使用知情者提供的日常认知（ECog）问卷评估捐献者生前认知状态。2、免疫组织化学染色及神经病理评分:使用Aβ抗体识别Aβ斑块并根据形态区分弥漫样斑块和致密核心斑块,p-Tau抗体识别神经原纤维缠结,采用改良Bielschowsky银染色法检测神经炎性斑块,并根据国际通用的（NIA-AA指南）“ABC”评分体系对各相关脑区进行AD神经病理评分。3、免疫荧光染色:用于观察人脑皮层中不同类型Aβ斑块与神经炎症的相关性;观察人脑皮层中致密核心斑块与FcγRⅠ/FcγRⅢ的相关性;确定人脑和小鼠脑皮层中FcγRⅠ和FcγRⅢ的细胞定位和AD疾病背景下的表达变化;验证AD模型小鼠皮层中AAV介导的小胶质细胞FcγRⅢ过表达以及Aβ斑块的变化。4、免疫蛋白印迹:用于检测AD疾病背景下人脑及鼠脑皮层中FcγRⅠ、FcγRⅢ的表达变化。5、AAV介导的AD小鼠小胶质细胞FccRⅢ过表达:（1）制作小鼠小胶质细胞特异性启动子表达FcγRⅢ的AAV。（2）利用小鼠脑立体定位仪在小鼠侧脑室的精准定位注射AAV。（3）利用免疫荧光验证AAV特异性转染小胶质细胞和FcγRⅢ过表达。结果1、AD人脑皮层中Aβ斑块类型发生改变:（1）AD组与对照组相比,人脑皮层中致密核心斑块的数量显著增加。（2）统计分析表明,人脑皮层致密核心斑块数量与“ABC”神经病理评分、ECog日常认知评分和神经炎症有显著相关性,而弥漫样斑块则与以上指标无显著相关性。2、人脑皮层中,与弥漫样斑块相比,和致密核心斑块共定位的FcγRⅢ信号明显更强。3、激活型FcγRⅠ和FcγRⅢ在人脑和小鼠中枢神经系统均有表达:（1）人脑皮层中,FcγRⅠ和FcγRⅢ在小胶质细胞和神经元上均有表达。FcγRⅠ主要表达于神经元,FcγRⅢ则主要表达于小胶质细胞。（2）小鼠脑皮层中,FcγRⅠ主要表达于神经元,FcγRⅢ主要表达于小胶质细胞。4、AD状态下中枢神经系统FcγRⅠ/FcγRⅢ表达发生变化:（1）FcγRⅠ在AD人脑和AD模型小鼠脑皮层神经元中表达降低。（2）FcγRⅢ在AD人脑和AD模型小鼠脑皮层小胶质细胞中表达增加。5、AD模型小鼠小胶质细胞过表达FcγRⅢ可加速AD神经病理学改变:（1）在3月龄AD模型小鼠侧脑室注射AAV-Fcgr3,可引起大脑小胶质细胞增生,小胶质细胞FcγRⅢ表达增加。（2）与OV-Control组相比,FcγRⅢ-OV组小鼠脑皮层中Aβ斑块数量显著增多。结论我们的研究结果表明:（1）衰老人脑中致密核心Aβ斑块而非弥漫样Aβ斑块具有作为评估AD神经病理学的生物标志物的潜力。（2）脑中小胶质细胞表达的激活型FcγRⅢ可能参与AD神经病理进程、特别是Aβ致密核心斑块的形成。临床意义本项研究提示衰老人脑中致密核心Aβ斑块可能是评估AD神经病理改变的潜在生物标志物;同时揭示了小胶质细胞表达的FcγRⅢ参与致密核心Aβ斑块形成和AD神经炎症病理改变的机制,可能为AD的早期诊断和治疗提供新的策略。