连翘（Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl）属于木犀科（Oleaceae）连翘属,在我国多地均有分布。古籍《神农本草经》中有记载,连翘主寒热、鼠瘘、瘰疬、痈肿、恶创、瘿瘤、结热、蛊毒。现代研究发现,连翘具有多种药理活性,包括抗病毒、抗炎、抗氧化、肝保护、抗肿瘤、抗菌、抗高脂血症、抗糖尿病以及神经保护等。相关研究表明抗炎和抗氧化特性是连翘清热作用的基础,而抗菌、抗病毒和抗癌特性则是连翘解毒作用的基础。在河北、山西及陕西等地,连翘叶有作为茶饮使用的历史,被冠以“长寿茶”之名,随着中药现代化研究不断深入,连翘叶的保健作用逐步被发现。我们课题组前期研究发现连翘叶中富含苯乙醇苷、木脂素、三萜、黄酮等类化合物,且大多具有生物活性。为了发现更多的活性物质,本论文拟对连翘叶进行进一步的成分分离与活性研究。阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）是一种典型的中枢神经系统退行性疾病。老年人群是主要的发病群体,随着全球老龄化趋势日益严峻,阿尔茨海默症患病人数逐年递增。然而迄今为止投入临床治疗阿尔茨海默症的药物少之又少,所用药物只能控制病情的进展,并不能治愈疾病。关于AD发病机制,胆碱能学说最为人们所接受,该假说认为有一些AD患者的认知功能下降是缺乏神经递质乙酰胆碱和丁酰胆碱所导致,胆碱酯酶可以水解胆碱,造成脑和中枢中胆碱数目减少,使用胆碱酯酶抑制剂可以提高中枢神经系统,特别是大脑皮质神经突触间隙中胆碱的浓度,从而改善认知功能。临床上使用胆碱酯酶抑制剂提高脑内胆碱能受体的水平,改善及治疗AD的症状,筛选胆碱酯酶抑制剂在现阶段仍具有十分重要的意义。相关研究表明,苯乙醇苷、木脂素、三萜、黄酮等类化合物对胆碱酯酶具有抑制作用,本论文拟对具有保健作用的连翘叶进行系统分离,并对化学成分开展胆碱酯酶抑制活性评价,以期筛选出具有对胆碱酯酶抑制活性的化合物。目的:以连翘叶作为研究对象,利用多种色谱分离手段对其中的化合物进行系统提取分离。采用波谱学技术（1D及2D NMR、MS）鉴定分离所得的单体成分的结构,同时将计算机辅助药物设计（CADD）和胆碱酯酶抑制实验相结合,筛选连翘中具有胆碱酯酶抑制活性的化学成分。方法:95%乙醇冷浸20 kg连翘叶一周,过滤提取液,减压浓缩得浸膏。用蒸馏水将浸膏混悬,石油醚（60~90℃）、二氯甲烷、乙酸乙酯及正丁醇四种有机溶剂依次进行萃取,每种试剂等体积萃取三次。合并各相萃取液,减压浓缩得各相浸膏。其中乙酸乙酯部分经柱色谱、制备液相等分离方法反复分离纯化,正丁醇部分经大孔树脂柱色谱、ODS中压柱色谱、ODS常压柱色谱等分离方法反复分离纯化得到单体化合物。通过分析核磁谱图数据,解析各化合物的结构。从这些化合物及连翘化合物库中挑选出18个化合物进行CADD分子对接,并根据CADD结果开展胆碱酯酶抑制实验研究。结果:通过对连翘叶乙酸乙酯部位及正丁醇部位进行系统的提取分离,得到23个化合物。运用波谱学方法鉴定了22个化合物的结构,包括6个木脂素类化合物,5个苯乙醇苷类化合物,3个黄酮类化合物,2个三萜类化合物,1个甾体类化合物及5个其它类化合物:β-sitosterol（1）,β-ursolic acid（2）,3β-acetoxyurs-12-en-28-oic-acid（3）,quercetin（4）,phillygenin（5）,kaempferol（6）,forsythin（7）,calceolariosid A（8）,forsythenside K（9）,forsythoside I（10）,forsythoside A（11）,calceolarioside B（13）,（+）-epipinoresinol-4’-O-β-D-glucoside（14）,（+）-pinoresinol monomethyl ether-β-D-glucoside（15）,phillyrigeninside D（16）,cornoside（17）,（+）-pinoresinol-4-O-β-D-glucoside（18）,E-p-hydroxy-cinnamic acid（19）,sucrose（20）,rutin（21）,di-n-butyl phthalate（22）,di（2-ethylhexyl）phthalate（23）。CADD结果显示,所有目标化合物结构打分均较高,具有开展进一步研究的价值和意义;胆碱酯酶抑制实验表明β-ursolic acid和betulinic acid具有乙酰胆碱酯酶抑制活性,β-ursolic acid,betulinic acid,oleanolic acid和quercetin具有丁酰胆碱酯酶抑制活性。结论:对连翘叶乙酸乙酯及正丁醇部位进行研究,共分离得到23个化合物,鉴定了22个化合物的结构。其中phillyrigeninside D（16）为新化合物,sucrose（20）,di-n-butyl phthalate（22）和di（2-ethylhexyl）phthalate（23）为连翘中首次分得的化合物。胆碱酯酶抑制实验结果显示,β-ursolic acid和betulinic acid对乙酰胆碱酯酶显示抑制活性,其IC50值分别为59.85±1.53μM,92.14±2.62μM;β-ursolic acid,betulinic acid,oleanolic acid,quercetin对丁酰胆碱酯酶显示抑制活性,其IC50分别为8.65±0.43μM,9.94±0.23μM,14.39±0.44μM,8.17±0.23μM。综上,β-ursolic acid和betulinic acid对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶均显示抑制活性,具有开发为非选择性胆碱酯酶抑制剂的潜力;oleanolic acid和quercetin仅对丁酰胆碱酯酶显示出抑制活性,且抑制活性均强于阳性对照药galanthamine,具有开发为选择性胆碱酯酶抑制剂的潜力。