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背景:据最新流行病学报道,我国平均每年有37.6万新增结直肠癌（colorectal cancer,CRC）病人,约19.1万人死于CRC,并且有逐步增长和年轻化的趋势,且多数患者诊断时已为中晚期,失去了最佳的治疗时期。CRC发病复杂,系多因素、多阶段共同致病的结果。人类Runt相关转录因子3（runt-relatedtranscription factor3,RUNX3）是近年来在CRC中倍受关注的抑癌基因,在前期多项研究中显示其表达在正常组织中高于癌组织中,尤其在消化道肿瘤中更明显;人表皮生长因子受体2（Human epidermal growth factor receptor 2,HER2）是研究较多的一种癌基因,其在乳腺癌和胃癌中的研究较为成熟,表达情况与预后相关,并成为有效的治疗靶点,已成为共识,其在CRC中的表达是目前研究的热点,抗HER2在CRC中的靶向治疗正在积极的探索中。目的:本研究旨在通过联合检测RUNX3和HER2在CRC中的表达,初步探讨其在CRC中的临床意义和相关性,为CRC的发生机制和靶向治疗提供实验基础和科学依据。方法:我们收集了自2015年5月至2016年1月经河北北方学院附属第一医院手术切除的53例CRC标本,并取距病变＞10cm的癌旁正常组织作为对照。采用链霉亲和素-过氧化物酶偶联法（SP）免疫组化染色、逆转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction,RT-q PCR）和免疫印迹法（western blot,WB）对基因和蛋白表达进行定位和定量分析;结合病例资料,探讨二者表达与肿瘤特征间的关系;同时积极回访,用Kaplan Meier法绘制生存曲线,记录5年无病生存期（disease-free survival,DFS）;Log-rank检验分析两种蛋白与CRC患者生存预后的相关性;本研究还应用小RNA干扰技术,通过稳定敲低CRC细胞株RKO和HCT-116细胞中的RUNX3基因表达,阻断RUNX3基因的转录从而使得基因沉默,而后观察HER2表达,并进一步验证二者的相互关系;此外,本研究还应用小RNA干扰技术,通过稳定敲低人结肠癌细胞株HT29中的HER2基因,阻断HER2基因的转录从而使得基因沉默,而后观察该细胞的一般生物学行为。结果:免疫组化结果显示:RUNX3在CRC中阳性表达率为33.96%（18/53）,低于对照组81.13%（43/53）,而HER2在CRC中阳性表达率为54.72%（29/53）,高于对照组7.55%（4/53）,差异有统计学意义,X~2=24.135,X~2=27.501,P均＜0.01;RT-q PCR结果显示:RUNX3 m RNA在CRC中相对表达量为（2.554±0.8429）,低于对照组（8.864±2.4632）,而HER2 m RNA在CRC中的相对表达量为（2.783±0.7444）,高于对照组（1.323±0.238）,差异有统计学意义,t=3.481,P=0.005,t=-2.656,P=0.017;WB结果显示:RUNX3在CRC中相对表达量（14575.667±314.766）低于对照组（63896.667±467.255）,而HER2在CRC中相对表达量（59142.000±800.989）,高于对照组（4057.667±648.519）,差异有统计学意义,t=131.988,P=0.000,t=-59.720,P=0.000;二者蛋白阳性表达均与CRC的p T分期、p N分期有关系,P＜0.05;生存期随访结果显示:5年DFS RUNX3阳性者高于阴性者,而HER2阳性者则低于阴性者,差异有统计学意义,P=0.036,P=0.023;相关性分析表明:二者在CRC中的表达呈明显负相关,r=-0.826,P=0.000;细胞实验表明:在CRC的RKO、HCT-116细胞中敲低RUNX3,HER2表达升高。si-RUNX3-1的敲低效率为84.7%（P=0.001）,si-RUNX3-2的敲低效率为45.1%（p=0.004）,si-RUNX3-3的敲低效率为56.1%（P=0.003）,我们选择敲低效率最高的si-RUNX3-1进行后续实验;RUNX3敲低的RKO、HCT-116细胞,RUNX3表达分别降低了77.4%（P=0.000）,70.0%（P=0.003）,HER2表达分别升高了6.3%（P=0.041）,7.2%（P=0.024）;细胞实验表明:用si-HER2-2敲低HT29细胞中HER2的表达,细胞增殖、迁移、侵袭能力明显降低。HER2在HT29细胞中的表达（1.000）高于RKO细胞（0.404±0.054）、HCT-116细胞（0.119±0.021）中的表达,P=0.000。si-HER2-2的敲低效率（55.40%）高于si-HER2-1（32.49%）、si-HER2-3（32.90%）,P=0.001,P=0.002。我们选择HER2表达最高的HT29细胞和敲低效率最高的si-HER2-2进行后续实验。敲低后的HT29细胞si-HER2-2组的细胞增殖能力（0.335±0.012）明显低于si-NC组（0.378±0.006）,P=0.001;敲低后的HT29细胞48h后si-HER2-2组的愈合率（17.540±0.238%）明显低于si-NC组（25.577±0.689）,P=0.009;敲低后的HT29细胞48h后si-HER2-2组穿膜的细胞数（72±0.577）明显低于si-NC组（175±0.577）,P=0.000。结论:RUNX3和HER2在CRC中的表达与CRC的发生,发展和预后有关,且具有负相关性,RUNX3可能通过负向调节HER2基因表达抑制CRC的发生,抗HER2的靶向治疗在CRC的治疗方面可能有重要的指导意义。