卵裂是早期胚胎发育过程中重要的发育事件,尤其是受精后胚胎第一次卵裂的时间和方式对胚胎的发育潜能有着至关重要的意义,也是评价胚胎质量的重要依据。我们的前期的研究发现,精源性mi RNA-202可通过靶基因SEPT7调控HDAC6,提高受精后胚胎骨架蛋白α-tubulin的乙酰化水平,胚胎骨架稳定性增强,从而降低异常卵裂的发生。但是目前SEPT7调控HDAC6的机制尚不清楚,本研究为了完善SEPT7调控HDAC6相应的信号通路和调节胚胎的第一次卵裂的机制,利用免疫共沉淀技术结合质谱技术筛选SEPT7的互作候选蛋白,探讨了SEPT7及互作蛋白的功能,主要内容和结果如下:（1）利用免疫共沉淀技术和Western Blot筛选出SEPT7抗体结合的特异性蛋白,对其进行测序及质谱分析,筛选出在牛卵母细胞或早期胚胎中与细胞骨架、胚胎发育和卵裂相关的RACK1、RAN、HSP90AA1、HSPA1A和ACTN1可能与SEPT7存在互作关系;（2）通过提取细胞RNA进行反转录获得SEPT7、RACK1、RAN、HSP90AA1、HSPA1A和ACTN1的目的基因,应对其分别构建p3×FLAG-CMV-10-SEPT7、p-CMVHA-RACK1、p-CMV-HA-RAN、p-CMV-HA-HSP90AA1、p-CMV-HA-HSPA1A和pCMV-HA-ACTN1真核表达载体。通过细胞脂质体转染过表达目的基因,利用过表达的标签HA和FLAG抗体结合琼脂糖珠和目的蛋白以确定二者之间是否存在互作关系,同时通过邻位连接技术在胚胎上进行验证,结果表明SEPT7与RAN、HSP90AA1存在互作关系,而与RACK1、HSPA1A、ACTN1不存在互作关系;（3）通过收集GV期和MII期卵母细胞以及合子期和2-cell期胚胎进行q RT-PCR。结果表明SEPT7、HSP90AA1在转录水平无显著差异;RAN的表达水平在MII期相较于GV期显著上升,在合子期表达水平显著下降并于2-cell期上升至与GV期卵母细胞相当;（4）通过对合子期胚胎分别注射RAN siRNA、HSP90AA1 si RNA以及二者混合物,结果表明牛早期胚胎中RAN的表达水平下调会导致HSP90AA1的表达水平下调,但不影响SEPT7的表达水平,而HSP90AA1的表达水平下调会导致SEPT7的表达水平显著升高,但不影响RAN的表达水平。综上所述,在牛的早期胚胎发育中,SEPT7与RAN和HSP90AA1存在互作关系,而SEPT7与ACTN1、HSPA1A和RACK1不存在互作关系,并且RAN对胚胎卵裂发挥重要作用。在初步研究早期胚胎SEPT7、RAN和HSP90AA1之间的调控关系中,发现在合子期胚胎中敲降RAN,SEPT7的表达水平无显著差异;敲降HSP90AA1,SEPT7的表达水平显著上升,而同时敲降RAN和HSP90AA1,SEPT7的表达水平显著下降。表明SEPT7、RAN和HSP90AA1之间并非直接相互作用,可能存在其他的蛋白质参与。本项目对于牛早期胚胎发育调控网络的完善以及解释牛核移植早期胚胎发育中胞质骨架异常（包括原核形成、纺锤体结构、分裂收缩环结构及异常卵裂等）发生的机制具有重要的意义。