【摘 要】
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目的:LHPP被报道作为一种抑癌基因,在多种肿瘤中存在差异性表达,并抑制肿瘤的发生发展,然而LHPP在乳腺癌中的作用及其作用机制尚不明晰。本研究通过多种手段检测LHPP在乳腺癌组织及癌旁组织中的差异性表达,分析LHPP的表达与临床病理特征的相关性,探讨LHPP在乳腺癌发生发展中的作用,并进一步探索其作用机制,旨在为探讨乳腺癌的发展机制提供新的理论支持。方法:运用UALCAN数据库资料分析LHPP在
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目的:LHPP被报道作为一种抑癌基因,在多种肿瘤中存在差异性表达,并抑制肿瘤的发生发展,然而LHPP在乳腺癌中的作用及其作用机制尚不明晰。本研究通过多种手段检测LHPP在乳腺癌组织及癌旁组织中的差异性表达,分析LHPP的表达与临床病理特征的相关性,探讨LHPP在乳腺癌发生发展中的作用,并进一步探索其作用机制,旨在为探讨乳腺癌的发展机制提供新的理论支持。方法:运用UALCAN数据库资料分析LHPP在乳腺癌组织及正常乳腺组织中的差异性表达,运用Kaplan-Meier Plotter数据库分析LHPP的表达与患者生存预后的关系;收集乳腺癌临床标本,通过免疫组化法检测LHPP在乳腺癌组织及正常乳腺组织中的表达,并分析LHPP的表达与临床病理特征的相关性;PCR和Western Blot检测不同乳腺癌细胞株中LHPP的表达差异;采用转染质粒和感染慢病毒两种方法分别在乳腺癌细胞T47D和MCF7中构建过表达LHPP模型,通过Western Blot检测过表达效果;运用平板克隆实验、CCK-8实验、Edu实验检测过表达LHPP对乳腺癌细胞增殖能力的影响;运用Transwell实验、划痕实验检测过表达LHPP对乳腺癌细胞迁移能力的影响;通过Western Blot检测EMT相关蛋白、Akt通路蛋白表达水平的变化;采用转染si RNA和感染慢病毒两种方法分别在乳腺癌细胞T47D和MCF7中构建敲减LHPP模型,通过Western Blot检测敲减效果,并挑选敲减效果较好的作为实验组;运用平板克隆实验、CCK-8实验、Edu实验检测敲减LHPP对乳腺癌细胞增殖能力的影响;运用Transwell实验、划痕实验检测敲减LHPP对乳腺癌细胞迁移能力的影响;通过Western Blot检测EMT相关蛋白、Akt通路蛋白表达水平的变化,浅谈LHPP在乳腺癌发生发展中的作用及其相关机制。结果:1.通过挖掘数据库资料分析发现,LHPP在乳腺癌组织中的表达水平明显低于正常乳腺组织,并且LHPP高表达的乳腺癌患者生存预后优于LHPP低表达者;2.通过收集乳腺癌患者临床样本,运用免疫组化法检测LHPP在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的表达,结果发现LHPP在乳腺癌组织中的表达明显下调,验证了数据库资料的分析结论,分析LHPP的表达与临床病理特征的相关性发现,LHPP的表达与乳腺癌患者肿瘤大小、有无淋巴结转移以及病理类型密切相关,P＜0.05;3.采用转染质粒和感染慢病毒两种方法分别在乳腺癌细胞T47D和MCF7中构建过表达LHPP模型,通过平板克隆实验、CCK-8实验、Edu实验检测细胞的增殖能力,结果发现,与对照组相比,过表达LHPP的乳腺癌细胞T47D和MCF7增殖能力明显减弱;通过Transwell实验、划痕实验检测细胞的迁移能力,结果发现,与对照组相比,过表达LHPP的乳腺癌细胞T47D和MCF7迁移能力明显减弱;Western Blot检测EMT及Akt通路相关蛋白表达水平发现,过表达LHPP的乳腺癌细胞E-cad表达明显上调,Vimentin表达明显下调,p-Akt的相对表达明显下调;4.采用转染si RNA和感染慢病毒两种方法分别在乳腺癌细胞T47D和MCF7中构建敲减LHPP模型,通过平板克隆实验、CCK-8实验、Edu实验检测细胞的增殖能力,结果发现,与对照组相比,敲减LHPP的乳腺癌细胞T47D和MCF7增殖能力明显增强;通过Transwell实验、划痕实验检测细胞的迁移能力,结果发现,与对照组相比,敲减LHPP的乳腺癌细胞T47D和MCF7迁移能力明显增强;Western Blot检测EMT及Akt通路相关蛋白表达水平发现,敲减LHPP的乳腺癌细胞E-cad表达明显下调,Vimentin表达明显上调,p-Akt的相对表达明显上调。结论:LHPP在乳腺癌中扮演了抑癌基因的角色,能够参与调节乳腺癌的发生发展,其表达水平与患者的临床预后密切相关;过表达LHPP能够抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和上皮间充质转化,其可能是通过使Akt信号通路失活,抑制乳腺癌的增殖和迁移,从而抑制乳腺癌的进展。
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