背景灵芝是我国传统珍贵中药材,2015年版《中华人民共和国药典·一部》中记载的灵芝药用部位为灵芝子实体,其味甘,性平,归心、肺、肝、肾经,具有补气安神,止咳平喘功效。灵芝孢子粉是灵芝成熟时弹射出来的种子,野生灵芝成熟时,灵芝孢子粉弹射出来后散发在空中,无法收集,中药古籍中没有灵芝孢子粉的应用记载,更没有药性的研究。20世纪50年代以来,随着栽培与收集技术的成熟发展,灵芝孢子粉被广泛地收集与应用。但至今灵芝孢子粉还没有统一的国家药品标准,近几年来,有几个地方标准记载了灵芝孢子粉,但是对灵芝孢子粉的中药药性描述存在差异。目前市场上已有灵芝和灵芝孢子粉的颗粒剂、片剂、胶囊剂等产品,据统计,以灵芝为主要原料的国产中成药178种,国产与进口保健食品共计1074种;以灵芝孢子粉为主要原料的国产中成药4种,国产与进口保健食品共计353种,灵芝和灵芝孢子粉在医疗保健行业已被广泛使用。鉴于灵芝孢子粉源于灵芝,有必要以灵芝为对照、以中药药性为核心、以建立共识公认的灵芝孢子粉的中医药标准为目标,对灵芝孢子粉进行深入全面的研究,为灵芝孢子粉在中医药理论指导下的临床应用提供更加科学、翔实、严谨的依据。目的及意义本课题在中医药理论的指导下,从文献研究、理论研究、药学研究、药理学研究四方面,对灵芝孢子粉与灵芝开展全面对比研究,为建立科学合理的中药药性奠定基础,为灵芝孢子粉的临床应用提供科学依据。本课题在中医药理论指导下,以灵芝和灵芝孢子粉的科学文献为理论依据,以化学成分检测和中药药性现代药理学实验为研究手段,探讨并验证灵芝孢子粉的中药药性。本研究为灵芝孢子粉在中医药理论指导下的临床应用提供理论和实验依据,为中药新资源药性研究提供借鉴。方法1、文献与理论研究以CNKI、Web of Science（WoS）、PubMed数据库为数据来源对灵芝和灵芝孢子粉的中、英文文献进行检索分析。对比分析两者化学成分、药理作用、临床应用为主题的相关文献,结合中医基础理论,探讨并完善灵芝孢子粉中药药性。2、药学实验研究收集不同产地共计13批次的灵芝孢子粉、不同产地共计18批次的灵芝,采用2015版《中华人民共和国药典·一部》灵芝项下紫外分光光度法测定粗多糖和总三萜含量。3、药理学实验研究（1）灵芝孢子粉对虚热证、虚寒证小鼠生物学特征的影响雄性昆明小鼠225只,适应性喂养7天后随机分为15组,每组15只。即空白组、空白+灵芝高剂量组、空白+灵芝孢子粉高剂量组、虚热模型组、虚热模型+西洋参组、虚热模型+灵芝高剂量组、虚热模型+灵芝低剂量组、虚热模型+灵芝孢子粉高剂量组、虚热模型+灵芝孢子粉低剂量组、虚寒模型组、虚寒模型+人参组、虚寒模型+灵芝高剂量组、虚寒模型+灵芝低剂量组、虚寒模型+灵芝孢子粉高剂量组、虚寒模型+灵芝孢子粉低剂量组。每天上午灌胃相应药物,下午灌胃甲状腺素片溶液制备虚热证,灌胃氢化可的松溶液制备虚寒证,实验连续14天。实验结束后检测相关指标。（2）灵芝孢子粉对免疫抑制-脾阳虚小鼠生物学特征的影响雄性昆明小鼠112只,适应性喂养7天后随机分为7组,每组16只。即空白组、模型组、人参组、灵芝高剂量组、灵芝低剂量组、灵芝孢子粉高剂量组、灵芝孢子粉低剂量组。实验开始后每天上午灌胃相应药物;每两日上午进行冰水游泳5 min,实验末三天连续腹腔注射环磷酰胺75 mg/kg建立免疫抑制-脾阳虚证,实验连续21天。实验结束后检测相关指标。结果1、文献与理论研究基于文献对比研究可知,灵芝和灵芝孢子粉化学成分基本一致,以多糖类、三萜类含量最多;药理作用、临床应用两者均有明显的免疫调节作用,灵芝主要作用于神经系统、呼吸系统和抗氧化等,灵芝孢子粉主要作用于消化系统、生殖系统及抗肿瘤等。2、药学实验研究本实验条件下,不同产地灵芝孢子粉的粗多糖含量范围在0.98%±0.045～2.95%±0.021,均值为 1.79%;总三萜含量范围在 1.33%±0.016～3.74%±0.012,均值为 2.66%。不同产地灵芝的粗多糖含量范围在0.92%±0.0082～1.85%±0.012,均值为1.13%;总三萜含量范围在 0.53%±0.012～0.95%±0.017,均值为 0.71%。3、药理学实验研究（1）灵芝孢子粉、灵芝对虚寒、虚热证小鼠的生物学效应影响与正常组比,灵芝和灵芝孢子粉对正常小鼠的cAMP、cGMP、cAMP/cGMP、T3、T4、rT3指标无差异。与虚热模型组比,与西洋参作用一致,灵芝和灵芝孢子粉可降低模型小鼠cAMP、cGMP、cAMP/cGMP、T3、T4、rT3、IL-4 值,升高 IL-2、TNFα值。与虚寒模型组比,与人参作用一致,灵芝和灵芝孢子粉可升高模型小鼠cAMP、cGMP、cAMP/cGMP、T3、T4、rT3、IL-2、TNFα值,降低 IL-4 值。与等剂量虚热组灵芝比,灵芝孢子粉rT3指标降低幅度不如灵芝;与等剂量虚寒组灵芝比,灵芝孢子粉升高cAMP/cGMP、T3、T4、rT3值效果更明显。（2）灵芝孢子粉、灵芝对免疫抑制-脾阳虚小鼠生物学特征的影响与模型组比,灵芝和灵芝孢子粉均升高小鼠cAMP、cGMP、cAMP/cGMP、LG、MG、D-木糖、Na+-K+-ATP 酶、Ca2+-Mg2+-ATP 酶、CK、SDH、LDH、IL-2、TNFα值值;降低 FFA、UREA、TC、TG、LA、IL-4,HGB 值、WBC、PLT 计数出现了 回升。与等剂量灵芝比,灵芝孢子粉升高小鼠cAMP、cAMP/cGMP、LG、D-木糖、Na+-K+-ATP 酶、LDH、IL-2、TNFα值,降低 IL-4 值,WBC、PLT计数显著回升。结论1、文献与理论研究基于中、英文文献对比研究可知,灵芝和灵芝孢子粉的化学成分以多糖类、三萜类为主。灵芝主应用于神经系统,治疗心血管系统疾病;灵芝孢子粉主抗肿瘤,治疗男性更年期综合征。已知,2015年版《中华人民共和国药典·一部》中记载灵芝甘,平。归心、肺、肝、肾经。具有补气安神,止咳平喘的功效。文献与理论研究对灵芝孢子粉中药药性完善结果如下:[性味与归经]甘,微苦,平。归心、肺、脾、肾经。[功能与主治]扶正固本,健脾益气,补肾益精,养心安神,止血化痰。用于虚劳体弱,病后体虚,肾虚腰软,心神不宁,久咳虚喘,虚劳咯血。[用法与用量]直接使用6～12克,煎服;或破壁使用3～6克,开水冲服。基于文献对比研究的理论探讨结果为后续药学实验和药理学实验提供理论指导。2、药学实验研究灵芝和灵芝孢子粉广泛的药理活性主要是利用其中的多糖类和三萜类成分。本实验条件下,不同产地灵芝孢子粉的粗多糖含量均值为1.79%;总三萜含量均值为2.66%。不同产地灵芝的粗多糖含量均值为1.13%;总三萜含量均值为0.71%。由结果可知,灵芝孢子粉中的粗多糖与总三萜含量均比灵芝的高。此外,灵芝的粗多糖:总三萜=1:0.63,灵芝孢子粉的粗多糖:总三萜=1:1.49。本实验为文献和理论研究提供相应的实验依据,为中药药性的对比探讨提供物质基础的依据。3、药理学实验研究采用虚热证、虚寒证两个模型小鼠,以证测性,从同类比较异类反证角度对比验证灵芝孢子粉中药药性。灵芝孢子粉对两个模型均有调节作用,表明灵芝孢子粉具有双向调节作用;对空白小鼠没有作用,表明灵芝孢子粉具有条件显性特点,即其药性为“平性”。此外,与等剂量灵芝比,灵芝孢子粉对虚寒模型小鼠的改善作用更显著,但对虚热模型小鼠的改善作用不如灵芝,揭示灵芝孢子粉“微温”,据此总结灵芝孢子粉为“性平（微温）”。灵芝孢子粉具有扶正固本功效,可调节模型小鼠免疫功能,且对比等剂量灵芝,灵芝孢子粉对虚寒小鼠免疫调节作用更显著。以上结果表明灵芝孢子粉“性平（微温）”。采用免疫抑制-脾阳虚模型小鼠,以证测性,进一步验证灵芝孢子粉中药药性。阳虚则寒,结合疗寒以热药可知,灵芝孢子粉对脾阳虚模型小鼠具有改善作用,且比等剂量的灵芝调节作用更显著,验证了灵芝孢子粉“性平（微温）归脾经”。基于“性效相关”,灵芝孢子粉可通过发挥“健脾益气”功效改善模型小鼠症状,且比等剂量的灵芝调节作用更显著,即灵芝孢子粉“健脾益气”作用趋势与其中药药性趋势一致,表明灵芝孢子粉“性平（微温）归脾经”与“健脾益气”功效相关。综上,本课题在中医药理论的指导下,通过文献研究、理论研究、药学研究、药理学研究相结合,全面对比研究灵芝孢子粉与灵芝的差异,为灵芝孢子粉的临床应用提供科学依据,为研究中药药性提供一定的方法借鉴。