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目的:观察和中健脾方及其拆方对混合反流性食管炎模型大鼠食管黏膜损伤的治疗作用,对相关胃肠激素水平的影响及对CaM/MLCK信号通路的影响,探讨和中健脾方治疗混合反流性食管炎模型大鼠的作用机制。方法:采用贲门结扎加食管十二指肠吻合术建立混合反流性食管炎模型大鼠,按随机数字表将56只健康SD雄性大鼠(SPF级)分为正常组、假手术组、模型组、和中组、和中健脾组、降气组以及西药莫沙必利组,每组各8只。造模后3天,予以和中健脾方及其拆方和西药莫沙必利灌胃治疗,14天后,在麻醉状态下腹主动脉取血,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测混合反流性食管炎模型大鼠血清中胃动素、P物质、生长抑素、血管活性肠肽的含量,取手术吻合口上端3cm左右的食管组织,取该组织下段1cm进行HE染色,观察食管组织大体表现及病理改变并评分,取剩下的食管组织进行Western blot检测及RT-PCR技术进行CaM/MLCK通路上主要蛋白CaM、MLCK的检测,观察各组蛋白及mRNA的表达变化。结果:1.各组大鼠食管黏膜组织形态病理改变结果:模型组大鼠食管黏膜大体表现和病理评分均高于其他各组(p≤0.001);给药组间大鼠食管黏膜大体表现和病理评分差异无统计学意义(p>0.05)。2.各组大鼠胃肠激素结果:①胃动素,模型组血清胃动素含量低于其他各组(p<0.001);中药组中,和中健脾组血清胃动素含量最高,与和中组及降气组比较,均有统计学意义(p<0.01),而和中组与降气组比较无统计学意义(p>0.05);和中组及降气组血清胃动素含量与莫沙必利组比较,差异均有统计学意义(p<0.001),而和中健脾组血清胃动素含量与莫沙必利组相当,无统计学意义(p>0.05)。②P物质,模型组血清P物质含量低于其他各组(p<0.001);中药组中,和中健脾组血清P物质含量最高,与和中组及降气组比较,均有统计学意义(p<0.001),降气组血清P物质含量高于和中组,差异有统计学意义(p=0.001);和中组及降气组血清P物质含量与莫沙必利组比较,差异均有统计学意义(p<0.01),而和中健脾组血清P物质含量与莫沙必利组相当,无统计学意义(p>0.05)。③生长抑素,模型组血清生长抑素含量均高于其他各组(p<0.001);中药组中,和中健脾组血清生长抑素含量最低,与和中组及降气组比较,均有统计学意义(p=0.001),而降气组血清生长抑素含量低于和中组,差异有统计学意义(p<0.001);和中组及降气组与莫沙必利组比较,差异均有统计学意义(p<0.001),而和中健脾组与莫沙必利组比较,无统计学意义(p>0.05)。④血管活性肠肽,模型组血清血管活性肠肽含量均高于其他各组(p<0.001);中药组中,和中健脾组血清血管活性肠肽含量最低,与和中组及降气组比较,均有统计学意义(p=0.001),而降气组血清血管活性肠肽含量低于和中组,差异有统计学意义(p<0.001);和中组及降气组与莫沙必利组比较,差异均有统计学意义(p<0.001),而和中健脾组与莫沙必利组比较,无统计学意义(p>0.05)。3.各组大鼠食管组织CaM、MLCK蛋白表达结果:模型组CaM、MLCK蛋白表达较其他各组均明显下降(p<0.001);各给药组CaM、MLCK蛋白表达较模型组均明显升高(p<0.01);中药组中,和中健脾组CaM、MLCK蛋白表达含量最高,与和中组比较,具有统计学意义(p<0.05),与降气组比较,无统计学意义(p>0.05),和中组CaM、MLCK蛋白表达含量低于降气组,差异有统计学意义(p<0.05);和中组CaM、MLCK蛋白表达含量与莫沙必利组比较均有统计学意义(p<0.05),降气组与莫沙必利组比较CaM蛋白表达含量有统计学意义(p<0.05),MLCK蛋白表达含量无统计学意义(p>0.05),而和中健脾组CaM、MLCK蛋白表达含量与莫沙必利组相当,无统计学意义(p>0.05)。4.各组大鼠食管组织CaM、MLCK mRNA表达结果:模型组CaM、MLCK mRNA表达较其他各组均明显下降(p<0.001);各给药组CaM、MLCK mRNA表达较模型组均明显升高(p≤0.001);中药组中,和中健脾组CaM、MLCK mRNA表达含量最高,其中和中健脾组与和中组CaM mRNA表达有统计学意义(p=0.001),MLCK mRNA表达无统计学意义(p>0.05),和中健脾组与降气组CaM mRNA表达有统计学意义(p<0.05),MLCK mRNA表达无统计学意义(p>0.05),和中组与降气组CaM、MLCK mRNA表达均无统计学意义(p>0.05);和中组和降气组CaM、MLCK mRNA表达含量与莫沙必利组比较均有统计学意义(p<0.01),而和中健脾组CaM mRNA表达含量与莫沙必利组比较无统计学意义(p>0.05),MLCK mRNA表达含量与莫沙必利组比较有统计学意义(p<0.05)。结论:1.和中健脾方及其拆方均可以明显改善混合反流性食管炎模型大鼠食管组织黏膜病理损伤,对混合反流性食管炎模型大鼠有一定的治疗作用;2.和中健脾方及其拆方均可以明显改善混合反流性食管炎模型大鼠相关胃肠激素水平,其中和中健脾组改善最明显;3.和中健脾方及其拆方均能明显上调CaM/MLCK通路主要蛋白及mRNA的表达,其中和中健脾组升高程度最大;