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目的:肝癌是全世界范围内致死率较高的癌症之一。肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的肝癌类型,发病率高,且临床预后差。近年来,随着医学的发展,多种方法应用于肝癌的临床治疗,但患者总生存率并没有明显提高。因此,探究HCC发生发展的分子机制,寻找新的治疗靶点尤为重要。Caspase-1作为炎症小体的中心酶,通过抑制IL-18和IL-1β的表达以刺激促炎相关细胞因子,并激活促炎微环境,最终促进肿瘤生长、侵袭和转移等恶性发展过程。MicroRNAs(miRNAs)是一类短的内源性非编码RNA。miRNAs通过识别并结合到靶基因的3’非翻译区(3’-UTR),诱导靶基因m RNA降解或抑制靶基因蛋白翻译,进而调控其表达。miRNAs在许多肿瘤中均发挥重要作用,但是在肝癌中的作用机制尚不完全清楚。本研究拟探讨miR-214在肝细胞癌中的表达情况,及对肝癌生长和侵袭转移的影响,并进一步探究miR-214调控肝癌恶性发展的具体分子机制。方法:首先,从GEO数据库和TCGA数据库中获取肝癌患者肿瘤组织与癌旁组织中miRNAs的表达数据,分析miR-214的表达情况。然后,采用实时定量PCR(q RT-PCR)实验检测人肝癌细胞系SMMC-7721、Hep G2、Huh-6和人正常肝细胞系L-02中miR-214的表达水平。接下来,将miR-214 mimics(特异性过表达miR-214)、miR-214 inhibitor(特异性抑制miR-214)和miR-214 control(miR-214对照)转染至人肝癌细胞系SMMC-7721中,通过q RT-PCR实验检测转染效率;并通过CCK8细胞增殖实验和细胞平板克隆形成实验检测miR-214对肝癌细胞增殖的影响,通过细胞Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测miR-214对肝癌细胞侵袭转移的影响。接着,通过Target Scan在线预测软件探究miR-214的潜在靶点Caspase-1,并通过双荧光素酶(Dual-Luciferase)实验检测miR-214对Caspase-1 3’-UTR报告系统荧光素酶活性的影响。进一步,在SMMC-7721细胞中,采用q RT-PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验检测miR-214对Caspase-1 m RNA和蛋白表达水平的影响。最后,分别通过Western blot、CCK8细胞增殖、细胞平板克隆形成、细胞Transwell及细胞划痕的体外实验和人肝癌裸鼠移植瘤模型的体内实验,检测外源过表达Caspase-1对miR-214调控肝癌生长和侵袭转移的影响。结果:miR-214在肝癌中呈现低表达状态。GEO和TCGA数据库分析结果显示,同人正常肝组织相比,肝癌组织中miR-214表达明显下降;同样地,q RT-PCR结果显示,人肝癌细胞系SMMC-7721、Hep G2和Huh-6中miR-214的表达水平明显低于正常肝细胞系L-02。miR-214抑制肝癌细胞增殖和侵袭转移。CCK8细胞增殖和细胞平板克隆形成实验结果显示,特异性过表达miR-214明显抑制肝癌细胞增殖和细胞克隆形成能力,而特异性抑制miR-214呈现相反作用;细胞Transwell侵袭实验和细胞划痕实验结果显示,特异性过表达miR-214明显抑制肝癌细胞侵袭转移能力,而特异性抑制miR-214呈现相反作用。miR-214靶向结合并抑制Caspase-1表达。Target Scan在线预测软件检索结果显示,miR-214直接靶向结合Caspase-1 3’-UTR;Dual-Luciferase实验结果显示,特异性过表达miR-214明显抑制Caspase-1 3’-UTR报告系统荧光素酶活性;q RT-PCR和Western blot实验结果显示,特异性过表达miR-214显著下调Caspase-1 m RNA和蛋白表达水平,而特异性抑制miR-214呈现相反作用。miR-214通过调控Caspase-1抑制肝癌细胞增殖和侵袭转移。CCK8细胞增殖和细胞平板克隆形成实验结果显示,特异性过表达Caspase-1能够显著削弱miR-214对肝癌细胞增殖和细胞克隆形成的抑制作用;细胞Transwell侵袭实验和细胞划痕实验结果显示,特异性过表达Caspase-1能够明显削弱miR-214对肝癌细胞侵袭转移的抑制作用;人肝癌裸鼠移植瘤结果显示,miR-214明显抑制肝癌肿瘤的体积和重量,而过表达Caspase-1能够削弱miR-214的抑瘤能力;免疫组化结果显示,miR-214明显抑制肝癌裸鼠移植瘤组织中增殖marker Ki67的表达,而过表达Caspase-1能够削弱miR-214对Ki67表达的调控作用。结论:miR-214在肝癌中呈现低表达状态,而且miR-214能够通过靶向调控Caspase-1,进而抑制肝癌的生长和侵袭转移过程,表明miR-214是肿瘤治疗及预后的潜在指标,为肝癌的临床防治提供了新的理论基础。