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研究目的临床研究评价定悸方干预慢性心力衰竭合并心肌重构患者的结构康复、脏腑康复、情绪康复及功能康复等多方面临床疗效。动物实验探索基于MAPK通路调控下经TGF-β1/Smad途径的心肌重构发病机制,研究定悸方干预心肌重构的分子作用机制,分析各组大鼠肠道菌群丰度和多样性、菌群丰度与Smads、MAPK家族关键信号相关性,探索“心衰肠道假说”的物质基础,为定悸方基于中医藏象学说的作用机制提供科学依据。研究方法1.临床研究:采用实用性随机对照试验设计,依据纳入标准,选取2018年3月-2019年12月于上海中医药大学附属岳阳中西医结合医传统中医科、云南省大姚人民医院中医科、上海市中西医结合医院急诊科的门诊及住院慢性心力衰竭合并心肌重构患者74例,完全随机分为治疗组和对照组。治疗组予定悸方颗粒剂联合西医基础治疗,对照组予西医基础治疗,治疗时间12周。以心脏超声检测评价患者心脏结构康复疗效,SF-36生活质量量表评价患者一般健康情况、精力、社会功能、生理机能、生理职能及精神健康等各维度干预疗效,中医症候信息量表评价患者脏腑康复情况,以BNP、NYHA、6分钟步行试验（6MWT）评价患者功能康复情况。2.动物实验:以异丙肾上腺素诱导SPF级SD大鼠6天,将动物心超检测判定诱导成功的心肌重构大鼠完全随机分为模型组、中药组（定悸方组）、对照组（美托洛尔组）,每组7只,以同期购入的7只SPF级SD大鼠作为正常组（空白对照）,造模第一天起同时予西药组坎地沙坦、中药组定悸方颗粒剂、模型组和空白组生理盐水灌胃,治疗周期4周。测试治疗后大鼠心脏超声、Western Blot法检测心肌组织Smad3、Smad7、ERK、p ERK、JNK、p JNK、p38、pp38和TGF-β1表达量,以肠道菌群16Sr DNA测序技术检测各组大鼠菌群丰度及多样性、差异显著性。研究结果1.临床研究（1）与治疗前比较,治疗组房室重构患者LA、LVEDD显著缩小（P＜0.01）,心室重构患者IVS显著变薄（P＜0.05）,心房重构患者LA、心室重构患者LVEDD、LVPW及房室重构患者LVESD有下降趋势,但差异不具有统计学意义（P＞0.05）,治疗组患者LVEF较治疗前均有显著提高（P＜0.05）;（2）治疗后,治疗组心室重构患者LVEDD较对照组显著下降（P＜0.05）,房室重构患者患者LA、LVESD较对照组显著缩小（P＜0.05）,心房重构患者LA在两组间未见显著差异（P＞0.05）,治疗组各类型心肌重构患者LVEF较对照组显著提高（P＜0.05）;（3）治疗后,治疗组6分钟步行试验、BNP较治疗前有显著改善（P＜0.01）,但与对照组未见显著差异（P＞0.05）;（4）与对照组比较,治疗组15个症状治疗有效率较对照组高,其中头晕、气短、两目干涩、视物模糊、自汗、纳差等症状的治疗有效率显著高于对照组（P＜0.05）;（5）与对照组比较,治疗组在在提高精力、精神健康及一般健康状况积分方面疗效优于对照组（P＜0.05）;在生理职能、情感职能及SF-36生活质量总积方面,治疗组中位数较对照组较高,但差异不具统计学意义（P＞0.05）;（6）经治疗,治疗组总有效率为93.75%,较对照组显著增高（P＜0.05）,治疗组第12周中医症候积分较对照组显著降低（P＜0.01）;2.动物实验（1）造模后,模型组大鼠IVSd、IVSs、LVPWs较正常大鼠均增厚（P＜0.05）,呈左室壁增厚状态;模型组大鼠LVIDd、LV Vold和LV Vols较正常组显著增大（P＜0.05）,呈左室心腔扩大状态;（2）干预后,中药组大鼠IVSd、IVSs较模型组有显著降低（P＜0.01）,LVPWs较模型组有缓解趋势,但差异不具有统计学意义（P＞0.05）,大鼠LVIDd较模型组有显著缩小（P＜0.05）;（3）与必洛斯组比较,中药组在减缓IVSs增厚的效果较必洛斯差（P＜0.01）,但在缩小LV Vold、提高EF值方面疗效显著优于坎地沙坦酯（P＜0.05）,定悸方干预的LV Mass较坎地沙坦酯低,但差异尚无统计学意义（P＞0.05）;（4）与正常组比较,模型组、中药组和必洛斯组大鼠TGFβ1表达量均有增高,但组间未见显著差异（P＞0.05）,三组Smad3蛋白表达较正常组均有显著增加（P＜0.05）,仅有中药组Smad7表达显著增高（P＜0.05）;（5）模型组和中药组p38和p-p38表达量均较正常组显著升高（P＜0.05）,且中药组p38通路蛋白表达量较模型组显著增高（P＜0.05）;（6）必洛斯组ERK表达较正常组增加（P＜0.01）,p-p38表达量较模型组降低（P＜0.01）;（7）与正常大鼠比较,模型组α多样性shannon指数显著降低（P＜0.05）,中药组shannon指数和simpson指数较模型组显著增高（P＜0.05）;（8）在属水平上,Erysipelotrichaceae Other、Erysipelotrichaceae Clostridium XVIII、Erysipelotrichaceae Turicibacer与IVSd具有紧密相关性（0.4＜|r|＜0.7,P＜0.05）;（9）中药组Erysipelotrichaceae与p ERK、JNK、p JNK、p38、p-p38、Smad3、Smad7蛋白表达均具有非常紧密的相关性（|r|＞0.7,P＜0.05）。结论1.定悸方颗粒剂联合西药基础治疗疗效优于较单纯西医治疗,特别是在提高患者射血分数、6分钟步行试验距离、降低BNP水平等方面具有显著优势。2.定悸方在改善慢性心力衰竭患者临床症状方面具有结构康复、情绪康复、脏腑康复和功能康复的多方面效应。3.定悸方通过上调p38,激活Smad7的负向调控作用,抑制心肌纤维化过程,从而延缓心肌重构,这一调节过程与定悸方对肠道Erysipelotrichaceae菌群丰度的调节相关。4.Erysipelotrichaceae菌群丰度与室间隔厚度及心肌重构的关键调控蛋白MAPKs家族及Smad3、Smad7具有非常紧密相关性,肠道菌群构成及菌群丰度的改变可能参与或促进了心肌重构的发生发展。