小柴胡汤治疗肿瘤患者伴随抑郁状态的临床及实验研究

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目的:观察小柴胡汤对肿瘤患者所伴随抑郁状态的改善作用及其对肠道菌群的调节作用,并通过相关实验探究小柴胡汤对慢性束缚应激所致大肠癌伴抑郁小鼠肠道菌群及炎性因子的影响来揭示其改善抑郁样行为的作用及机制。方法:第一部分选取符合研究标准的患者72例,随机分为2组,治疗组36例予小柴胡汤颗粒剂,对照组36例予小柴胡汤颗粒安慰剂,共治疗6周,评估2组患者治疗前后SDS和SAS量表评分、细胞免疫和细胞因子水平及肠道菌群变化情况,并根据治疗前后血常规和肝肾功能相关指标评价小柴胡汤的安全性。第二部分(1)选取70只C57BL/6小鼠,随机选50只进行慢性束缚应激造模2周,期间每日测量体重和摄食量,造模结束后采用行为学检测验证该抑郁模型。(2)对未经抑郁造模的小鼠随机分为空白对照组和大肠癌组,经抑郁造模的小鼠随机分为小柴胡汤低、中、高剂量组及阳性对照组,后6组小鼠同时接种MC38小鼠大肠癌皮下移植瘤,待成瘤后开始分别灌胃小柴胡汤和氟西汀,隔日测量瘤体大小及每日测量体重,14天后检测蔗糖偏好实验和悬尾实验。(3)实验结束后麻醉处死小鼠,摘眼球取外周血,剥取瘤体并称重,剥取大脑皮质。(4)ELISA检测各组小鼠皮质中5-HT及血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ和IL-10含量。各组小鼠瘤体进行HE染色及Tunel凋亡实验。(5)实验结束前收集各组小鼠粪便,用于肠道菌群检测。结果:第一部分结果72例患者脱落8例,共完成64例有效病例,治疗组和对照组各32例。(1)两组治疗后SDS、SAS评分均明显降低,差异有统计学意义(P<0.0001,P<0.001和P<0.0001,P<0.05),治疗后两组间比较,治疗组SDS、SAS评分明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.0001)。(2)治疗后治疗组中TNF-α和IFN-γ均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.0001和P<0.01),且治疗后治疗组中TNF-α较对照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)两组治疗前后血常规及肝肾功能相关指标无明显变化。(4)小柴胡汤治疗后患者粪便肠道菌群多样性增加,差异有统计学意义(P<0.01);与治疗前比较,治疗后治疗组中疣微菌门丰度显著减少,而软壁菌门丰度显著增加,对照组中软壁菌门、Subdoligranulum菌属丰度显著增加。第二部分(1)CRS小鼠体重明显下降(P<0.0001),蔗糖偏好度明显降低(P<0.01),悬尾不动时间明显延长(P<0.001)。(2)小柴胡汤治疗后小鼠蔗糖偏好度明显提高(P<0.01,P<0.05),悬尾不动时间明显缩短(P<0.05),瘤体体积和瘤重明显减小(P<0.05,P<0.01),瘤体组织中肿瘤细胞凋亡增多。(3)小柴胡汤治疗后小鼠皮质5-HT明显升高(P<0.0001),血清IL-1β、IL-6、TNF-α均明显降低(P<0.0001),IFN-γ和IL-10均明显升高(P<0.0001)。(4)小柴胡汤治疗后,小鼠肠道菌群中物种多样性增加,厚壁菌门(Firmicutes)、Patescibacteria及拟杆菌属(Bacteroides)、Lachnoclostridium、瘤胃球菌属(RuminococcaceaeUCG-014)、CandidatusSaccharimonas、拟普雷沃氏菌属(Alloprevotella)丰度显著增加,拟杆菌门(Bacteroidetes)、铁还原杆菌门(Deferribacteres)、蓝细菌门(Cyanobacteria)及norankfMuribaculaceae丰度显著减少。结论:1.小柴胡汤可以改善肿瘤伴抑郁状态患者的抑郁状态,具有一定抗抑郁作用。2.小柴胡汤的抗抑郁作用,可能与调节患者某些肠道菌群的丰度有关。3.小柴胡汤可以改善慢性束缚应激所致大肠癌伴抑郁小鼠的抑郁样行为,具有抗抑郁作用。4.小柴胡汤抗抑郁作用可能与提高大肠癌伴抑郁小鼠皮质5-HT表达及调节血清炎症因子的表达有关。5.小柴胡汤可能通过调节大肠癌伴抑郁小鼠的肠道菌群紊乱发挥抗抑郁作用。
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