【摘 要】
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目的:本研究基于“既病防变”理论,研究高血压早期针刺人迎穴调控MCP-1/CCR2通路,降低自发性高血压大鼠血压,延缓血压升高,改善心脏炎症损伤的作用机制。为进一步揭示人迎穴降压机理和提高临床针刺降压疗效,保护心脏组织,改善心脏功能提供实验依据。方法:采用4周龄的Wistar大鼠10只,作为对照组;4周龄SHR（Spontaneously hypertensive rats,自发性高血压大鼠）20
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目的:本研究基于“既病防变”理论,研究高血压早期针刺人迎穴调控MCP-1/CCR2通路,降低自发性高血压大鼠血压,延缓血压升高,改善心脏炎症损伤的作用机制。为进一步揭示人迎穴降压机理和提高临床针刺降压疗效,保护心脏组织,改善心脏功能提供实验依据。方法:采用4周龄的Wistar大鼠10只,作为对照组;4周龄SHR（Spontaneously hypertensive rats,自发性高血压大鼠）20只,随机分为模型组和针刺组,每组各10只。经过适应性饲养1周后,针刺组大鼠每日定时针刺双侧人迎穴,留针10min,每周连续针刺5次,持续针刺24周。对照组与模型组大鼠不针刺,仅进行同等时间的抓取。每3周测量各组大鼠收缩压的情况。所有大鼠在第25周取材,收集大鼠的血液和心脏。采用HE（hematoxylin-eosin,苏木精-伊红）染色法和Masson染色法观察大鼠心脏组织的形态变化;ELISA（Enzyme-linked immunosorbent assay,酶联免疫吸附试验）检测大鼠血清中MCP-1、CCR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的含量;IHC（Immunohistochemical,免疫组织化学）染色法检测心脏组织巨噬细胞标记物CD68和MCP-1、CCR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的阳性表达;QPCR（Real-time Quantitative PCR,实时定量PCR）检测心脏组织MCP-1 m RNA、CCR2 m RNA、IL-1βm RNA、IL-6 m RNA以及TNF-αm RNA的相对表达量。结果:1.针刺前,模型组和针刺组收缩压和舒张压均高于对照组,具有显著性差异（P＜0.01）。各组组内血压变化比较:模型组血压快速升高到针刺第6周后,持续保持在高水平,各个时间点与针刺前均具有显著性差异（P＜0.01）;针刺组收缩压针刺6周后开始,各个时间点与针刺前均具有显著性差异（P＜0.05）;针刺组舒张压自针刺开始后缓慢升高,各个时间点与针刺前均具有显著性差异（P＜0.05）。各组组间血压变化比较:模型组和针刺组血压始终高于对照组,均有显著性差异（P＜0.01）;与模型组相比,针刺组血压从3周后开始便低于模型组,收缩压在针刺3周、6周、9周、12周、15周、18周和24周后,针刺组较模型组具有显著性差异（P＜0.01）;舒张压在针刺9周、12周、18周和24周后,针刺组较模型组具有显著性差异（P＜0.05）。2.HE染色结果表明,对照组大鼠心脏组织中心肌纤维排列规整,心肌细胞结构完整,核仁明显,无明显病理性变化。与对照组相比较,模型组心肌纤维排列紊乱不规则;心肌纤维断裂,心肌纤维结构溶解;心肌间隙中出现较多的炎性细胞浸润。而针刺组的心脏组织中,心肌纤维排列比较规整,心肌纤维较少断裂,炎性细胞浸润较少。3.Masson染色结果表明,对照组大鼠心脏组织中心肌间隙内可见少量的胶原纤维,分布较为稀疏,肌纤维排列整齐。模型组大鼠心脏组织中的心肌间隙内可见大量的被染成蓝色的胶原纤维,肌纤维排列紊乱心肌纤维断裂。针刺组大鼠心脏组织中的心肌间隙内胶原纤维比模型组略低,心肌纤维排列较为规整。4.ELISA结果表明,对照组MCP-1、CCR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的含量较低。与对照组相比,模型组和针刺组MCP-1、CCR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的含量升高（P＜0.05）;与模型组相比,针刺组组MCP-1、CCR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的含量有降低,其中MCP-1、IL-1β以及IL-6以及TNF-α的含量降低明显（P＜0.05）。5.IHC结果表明,对照组CD68和MCP-1、CCR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的阳性表达低。与对照组相比,模型组和针刺组CD68和MCP-1、CCR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的阳性表达高（P＜0.05）;与模型组相比,针刺组CD68和MCP-1、CCR2、IL-1β以及IL-6的阳性表达明显降低（P＜0.05）。6.QPCR结果表明,与对照组相比,模型组MCP-1、CCR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的m RNA相对表达量升高,其中MCP-1、CCR2、IL-16和TNF-α的m RNA相对表达量升高明显（P＜0.05）;与模型组相比,针刺组MCP-1、CCR2、IL-1β以及TNF-α的m RNA相对表达量降低明显（P＜0.05）。结论:1.高血压早期针刺人迎穴能够降低自发性高血压大鼠血压,对延缓血压持续升高具有显著作用。2.高血压早期针刺人迎穴可延缓心脏组织病变进程。3.针刺人迎穴能减轻全身炎症反应,改善心脏炎症损伤,延缓心脏组织炎症发展进程,其作用机制与调控MCP-1/CCR2通路,降低心脏巨噬细胞浸润和炎症因子表达有关。
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