【摘 要】
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目的:以中医“治未病”思想为指导,探讨早期针刺人迎穴对自发性高血压大鼠（SHR）血压以及血管预防性保护作用,并基于TGF-β1/Smad信号通路来探讨针刺降压和血管保护的可能机制,以期为针刺防治高血压病提供一定的实验依据以及新思路。方法:本实验选用4周龄雄性SHR大鼠20只为研究对象,另选10只同龄的Wistar大鼠作为正常对照组。各组大鼠先适应性喂养1周,自由饮食,再用自制鼠衣适应性束缚1周。针
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目的:以中医“治未病”思想为指导,探讨早期针刺人迎穴对自发性高血压大鼠（SHR）血压以及血管预防性保护作用,并基于TGF-β1/Smad信号通路来探讨针刺降压和血管保护的可能机制,以期为针刺防治高血压病提供一定的实验依据以及新思路。方法:本实验选用4周龄雄性SHR大鼠20只为研究对象,另选10只同龄的Wistar大鼠作为正常对照组。各组大鼠先适应性喂养1周,自由饮食,再用自制鼠衣适应性束缚1周。针刺治疗前,对各组大鼠进行血压及体重的测量、记录,并将20只SHR大鼠随机分为模型组和针刺组,每组10只。进行针刺实验时,取大鼠双侧人迎穴,行捻转操作手法1min,频率为2次/秒,留针15min,每周连续针刺5天,休息2天,共针刺22周,正常组与模型组给予同针刺组同等的束缚时间。采用无创血压仪测量各组大鼠的血压值,HE及Masson染色法观察胸主动脉形态学,并计算胶原容积分数（CVF）,RT-q PCR法检测胸主动脉中TGF-β1、Smad3、Smad7 m RNA的表达,Western Blot法检测胸主动脉中TGF-β1、Smad3、Smad7、I型胶原（COL I）蛋白表达水平。结果:1各组大鼠血压值情况（1）组内比较:正常组各测量时点的血压值较针刺前变化不大,无明显差异（P＞0.05）;模型组各测量时点的血压值较针刺前升高,有显著性差异（P＜0.05）;针刺组收缩压在第4周、第6周、第18周、第20周、第22周较针刺前有显著性差异（P＜0.05）,舒张压在第4周、第18周、第22周较针刺前有显著性差异（P＜0.05）,其余各时点无明显差异（P＞0.05）。（2）组间比较:在针刺治疗前,模型组与针刺组之间的血压值均无明显差异（P＞0.05）,但都明显高于正常组（P＜0.05）;针刺治疗后,针刺组收缩压自第2周直至实验结束相较于模型组均有显著性差异（P＜0.05）,舒张压自第6周直至实验结束相较于模型组均有显著性差异（P＜0.05）。2各组大鼠胸主动脉形态学的对比观察HE染色结果:正常组胸主动脉形态正常,血管内膜光滑,未见内皮细胞脱落,中膜厚度适中,未见明显的平滑肌细胞增殖,血管壁无增厚;与正常组相比,模型组胸主动脉内膜损伤明显,可见内皮细胞脱落,中膜明显增厚,平滑肌细胞增生明显,可见细胞核密度增加,血管管壁有增厚,呈现明显的血管重构现象;针刺可以改善血管内膜表面情况,减轻内皮细胞的脱落、中膜平滑肌细胞增生的现象,减少血管壁厚度。3各组大鼠胸主动脉胶原沉积情况及其结果Masson染色结果:正常组胸主动脉形态正常,平滑肌束间胶原纤维分布均匀,排列整齐,含量较少;模型组可见胸主动脉壁明显增厚,有大量胶原纤维沉积,CVF较正常组明显增多（P＜0.05）;针刺组较模型组上述情况有所改善,胶原纤维沉积减轻,CVF明显减少（P＜0.05）。4各组大鼠胸主动脉中COL I蛋白表达情况Western Blot结果:相较于正常组,模型组胸主动脉中COL I蛋白表达明显升高（P＜0.05）;针刺组相较于模型组COL I蛋白表达明显下降（P＜0.05）。5 TGF-β1/Smad信号通路中各因子的m RNA和蛋白表达情况RT-q PCR结果:模型组相较于正常组,SHR大鼠胸主动脉中TGF-β1、Smad3 m RNA表达明显升高（P＜0.05）,Smad7 m RNA表达明显下降（P＜0.05）;经针刺治疗后,针刺组相较于模型组,SHR大鼠胸主动脉中TGF-β1 m RNA表达明显降低（P＜0.05）,Smad3、Smad7 m RNA表达虽未见统计学差异（P＞0.05）,但Smad3 m RNA表达有下降趋势,Smad7 m RNA表达有上升趋势。Western Blot结果:模型组相较于正常组,SHR大鼠胸主动脉中Smad3蛋白表达明显上升（P＜0.05）,Smad7蛋白表达明显下降（P＜0.05）,TGF-β1蛋白表达虽未见统计学差异（P＞0.05）,但有上升趋势;经针刺治疗后,针刺组相较于模型组,SHR大鼠胸主动脉中TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白表达虽未见统计学差异（P＞0.05）,但可看出TGF-β1、Smad3蛋白表达有下降趋势,Smad7蛋白表达有上升趋势。结论:1早期针刺人迎穴可降低SHR大鼠血压,缓解血压持续性升高,且能够改善血管重构,进而延缓血管重构的进程。2针刺人迎穴可能通过调节TGF-β1/Smad信号转导通路,实现对血管的保护。其机制可能是通过下调SHR大鼠胸主动脉中TGF-β1、Smad3的表达,上调Smad7的表达,从而抑制TGF-β1/Smad信号通路的转导,改善高血压血管重构,达到保护血管的作用。
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