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绿原酸（Chlorogenic acid,CGA）作为一种植物提取物,具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤和免疫调节等多种生物活性。通过胚蛋给养（In ovo feeding）技术,在胚期注射具有特定功能的物质可以改善家禽的健康和生产状况。本研究通过在鸡胚羊膜腔注射绿原酸,研究绿原酸对肉鸡生产和肠道健康的影响,旨在为肉鸡的绿色健康养殖提供技术支持,研究结果能为胚蛋给养的表观遗传调控机制提供初步的理论依据。试验一:胚蛋给养绿原酸对雏鸡抗氧化性能的影响。选取优质的14胚龄哈伯德利丰肉鸡种蛋100枚,随机分为5个处理组,每组20个重复（20枚蛋）,于17胚龄进行羊膜腔注射,除NC组外等剂量注射0.5 m L。各处理组分别为:负对照组（NC）:不做任何处理;正对照组（PC）:注射生理盐水;4CGA组:注射4 mg绿原酸;7CGA组:注射7 mg绿原酸;10CGA组:注射10 mg绿原酸。结果显示,各组的孵化率均为100%;与PC组相比,4CGA组的血清丙二醛（Malondialdehyde,MDA）含量有降低的趋势（P=0.0691）,CGA处理组的血清超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）活力水平显著升高（P＜0.05）;在肝脏和肠道组织中,CGA处理组的抗氧化相关基因（Nrf2、HO-1、GSS、GPX7）m RNA表达均有所升高（P＜0.05）。结果表明,胚蛋注射绿原酸能提高雏鸡抗氧化酶的活力及基因表达,提高雏鸡的抗氧化能力。试验二:胚蛋给养绿原酸对热应激肉鸡抗氧化性能的影响。选取优质的14胚龄爱拔益佳肉鸡种蛋300枚,随机分为5个处理组,每组6个重复,每个重复10枚,于17胚龄进行羊膜腔注射,除NC组外等剂量注射0.5 m L。各处理组分别为:负对照组（NC）:不做任何处理;正对照组（PC）:注射生理盐水;4CGA组:注射4 mg绿原酸;7CGA组:注射7 mg绿原酸;10CGA组:注射10 mg绿原酸。雏鸡出壳后,在每个重复中挑选6只健康且体重均匀的雏鸡进行饲养。在28～42日龄进行热应激处理（35±1°C,8 h/d）。结果显示,各组的孵化率没有显著差异（P＞0.05）;各组全期的生产性能无显著差异（P＞0.05）;在35日龄时,4CGA组的血浆MDA含量显著低于NC组和其它绿原酸处理组（P＜0.05）。与NC组相比,4CGA组的血浆SOD酶活显著升高（P＜0.05）,7CGA组的血浆谷胱甘肽（Glutathione,GSH）含量显著高于PC组和其它绿原酸处理组（P＜0.05）;在42日龄时,与NC组相比,4CGA组的血浆MDA含量显著降低（P＜0.05）,4CGA组的血浆SOD酶活、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）酶活和过氧化氢酶（Catalase,CAT）酶活显著升高（P＜0.05）;在35日龄时,与NC组相比,在十二指肠中,4CGA组的绒毛高度与隐窝深度的比值显著升高（P＜0.05）。在空肠中,4CGA组的绒毛高度显著提高（P＜0.05）,隐窝深度显著降低（P＜0.05）,绒毛高度与隐窝深度的比值显著升高（P＜0.05）;在42日龄时,与NC组相比,在十二指肠中4CGA组的绒毛高度显著升高（P＜0.05）,在空肠中4CGA组的绒毛高度与隐窝深度的比值显著升高（P＜0.05）;42日龄抗氧化基因检测结果显示,在十二指肠中,与NC组和PC组相比,4CGA组核转录相关因子-2（Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）、血红素氧合酶-1（Heme oxygenase 1,HO-1）、谷胱甘肽合成酶（Glutathione synthetase,GSS）、超氧化物歧化酶1（Superoxide dismutase 1,SOD1）m RNA表达显著升高（P＜0.05）,超氧化物歧化酶2（Superoxide dismutase 2,SOD2）m RNA表达有升高的趋势（P=0.0933）。与PC组相比,绿原酸处理组谷胱甘肽还原酶（Glutathione reductase,GSR）、谷胱甘肽过氧化物酶7（Glutathione peroxidase 7,GPX7）m RNA表达显著升高（P＜0.05）。4CGA组CAT m RNA表达显著高于NC组（P＜0.05）;42日龄DNA甲基化相关酶的基因检测结果显示,在十二指肠中,与NC组和PC组相比,4CGA组甲基胞嘧啶双加氧酶1（Ten eleven translocation 1,Tet1）、甲基胞嘧啶双加氧酶2（Ten eleven translocation 2,Tet2）、DNA甲基转移酶3A（DNA-methyltransferase 3alpha,DNMT3A）m RNA表达显著升高（P＜0.05）。与NC组相比,4CGA组DNA甲基转移酶1（DNA-methyltransferase 1,DNMT1）m RNA表达有升高的趋势（P=0.0557）;42日龄热休克蛋白基因检测结果显示,在十二指肠中,与NC组和PC组相比,4CGA组和7CGA组热休克蛋白70（Heat shock protein 70,HSP70）m RNA表达显著升高（P＜0.05）。在空肠中,与NC组相比,4CGA组热休克蛋白60（Heat shock protein 60,HSP60）和HSP70 m RNA表达显著降低（P＜0.05）。结果表明,胚期注射绿原酸能缓解热应激引起的肉鸡肠道组织氧化损伤,提高抗氧化酶的活力,促进十二指肠中抗氧化基因的表达,其中4CGA组的效果最好。十二指肠中DNA甲基化相关酶的m RNA表达增加,表明绿原酸对热应激肉鸡的抗氧化作用可能与表观遗传相关。试验三:胚蛋给养绿原酸对热应激肉鸡肠道微生物的影响。选取优质的14胚龄爱拔益佳肉鸡种蛋180枚,随机分为3个处理组,每组6个重复,每个重复10枚,于17胚龄进行羊膜腔注射,除NC组外等剂量注射0.5 m L。各处理组分别为:负对照组（NC）:不做任何处理;正对照组（PC）:注射生理盐水;CGA组:注射4 mg绿原酸。雏鸡出壳后,在每个重复中挑选6只健康且体重均匀的雏鸡进行饲养。在28～42日龄进行热应激处理（35±1°C,8 h/d）。42日龄盲肠微生物结果显示,在门水平上,NC组厚壁菌门（Firmicutes）的丰度约为40%,CGA组厚壁菌门的丰度约为53%,显著提高了32%（P＜0.05）,软壁菌门（Tenericutes）的丰度提高了68%（P＞0.05）,拟杆菌门（Bacteroidetes）的丰度降低了17%（P＞0.05）,疣微菌门（Verrucomicrobia）的丰度降低了54%（P＞0.05）;在属水平上,NC组乳杆菌属（Lactobacillus）的丰度约为7%,CGA组乳杆菌属的丰度约为15%,提高了114%（P＞0.05）,拟杆菌属（Bacteroides）的丰度提高了5%（P＞0.05）,艾克曼菌属（Akkermansia）的丰度降低了54%（P＞0.05）;与NC组和PC组相比,CGA组的chao1指数和observed＿otus指数显著提高（P＜0.05）。显著性差异分析结果显示,NC组的特征微生物是粪杆菌属（Faecalibacterium）、巴恩斯氏菌属（Barnesiella）、厌氧菌属（Anaerostipes）和脱铁杆菌属（Mucispirillum）。PC组的特征微生物是链球菌属（Streptococcus）、嗜血杆菌属（Haemophilus）、根瘤菌目（Rhizobiales）、沙雷氏菌属（Serratia）和放线菌属（Actinomyces）。CGA组的特征微生物是真杆菌属（Eubacterium）、柯林斯菌属（Collinsella）和异味杆菌属（Odoribacter）。结果表明,胚蛋注射绿原酸可提高盲肠中厚壁菌门和乳杆菌属的相对丰度,提高菌群的物种丰富度,并通过增加有益菌的数量和减少有害菌属来调节肠道菌群。综上所述,胚蛋注射绿原酸有利于肠道的发育,能缓解热应激引起的肝脏和肠道组织氧化损伤,促进肠道尤其是十二指肠的抗氧化能力,其中4CGA组的效果最好。绿原酸对热应激肉鸡的抗氧化作用可能与表观遗传相关。同时,胚蛋注射绿原酸可提高盲肠中厚壁菌门和乳杆菌属的相对丰度,提高菌群的物种丰富度,并通过增加有益菌的数量和减少有害菌属来调节肠道菌群。