【摘 要】
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目的:我们在前期研究中发现,去甲肾上腺素能够促进结直肠癌的肝转移。本研究观察β2肾上腺素能受体(β-adrenergic receptor,β2-AR)阻滞剂对肝内枯否细胞(Kupffer cell,KC)M2型极化和结肠癌细胞迁移的影响,并探讨其机制。方法:实验分为对照组和实验组,对照组采用PBS处理KC,实验组采用梯度浓度的β2-AR阻滞剂ICI118551(10-9M、10-8M、10-7M
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目的:我们在前期研究中发现,去甲肾上腺素能够促进结直肠癌的肝转移。本研究观察β2肾上腺素能受体(β-adrenergic receptor,β2-AR)阻滞剂对肝内枯否细胞(Kupffer cell,KC)M2型极化和结肠癌细胞迁移的影响,并探讨其机制。方法:实验分为对照组和实验组,对照组采用PBS处理KC,实验组采用梯度浓度的β2-AR阻滞剂ICI118551(10-9M、10-8M、10-7M、10-6M、10-5M)预处理KC,之后加入等浓度的NE(10-9M),培养24h,以CD206为M2型KC极化标志物,采用流式细胞学技术观察KC的极化;采用ELISA法测定KC分泌细胞因子的情况;采用Transwell小室细胞迁移实验检测CT26细胞的迁移情况;采用Western blot法检测KC中PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达;采用RT-PCR法检测KC上CXCL12的表达水平。结果:(1)与对照组相比,加入β2-AR阻滞剂后,KC上CD206的表达水平呈下降趋势,当浓度达10-6M、10-5M时有统计学差异(P<0.05)。(2)梯度浓度的β2-AR阻滞剂处理KC后,IL-6的分泌呈上升趋势,当浓度为10-5M时差异具有统计学意义(P<0.01);尽管未达到统计学差异,但经β2-AR阻滞剂处理的KC,其分泌细胞因子VEGF及TGF-β的量呈递减趋势。(3)经高浓度(10-6M、10-5M)β2-AR阻滞剂处理的KC,对CT26的迁移作用显著减弱(P<0.01)。(4)β2-AR阻滞剂抑制KC中的PI3K、p-Akt、AKT蛋白的表达,下调CXCL12的表达。结论:β2-AR阻滞剂可能通过抑制PI3K/Akt信号通路阻断KC向M2型极化,并下调KC中CXCL12的表达,最终抑制结肠癌细胞向肝内迁移。
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