目的:筛选灵芝抗鼻咽癌活性中性三萜成分,并探讨活性成分对人鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响。方法:（1）利用硅胶柱色谱和制备型高效液相色谱对灵芝中性三萜组分进行系统的分离纯化工作;通过波谱解析及化学方法等手段对所得灵芝中性三萜类成分进行结构鉴定;（2）四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测灵芝中性三萜类成分作用于人鼻咽癌CNE2细胞的增殖抑制作用,筛选活性成分;（3）MTT法,CFSE荧光标记及集落形成试验检测活性三萜对CNE2细胞增殖的抑制作用;（4）PI染色法检测活性三萜对CNE2细胞周期的影响;（5）Annexin V-FITC/PI双染法检测活性三萜诱导CNE2细胞凋亡的作用;（6）Western blot检测活性三萜对CNE2细胞增殖Ras/ERK信号通路和细胞凋亡线粒体途径相关蛋白表达的影响;（7）采用JC-1染色检测活性三萜对CNE2细胞线粒体膜电位的影响;（8）采用荧光探针染色分析活性三萜对CNE2细胞线粒体MPTP开放程度、细胞内活性氧（ROS）水平及Ca2+含量的影响。结果:（1）从灵芝中分离得到6个中性三萜类化合物和1个甾醇类化合物,分别是ganodermanontriol（1）、ergosterol peroxide（2）、ganoderol B（3）、ganodermanondiol（4）、ganoderone A（5）、lucialdehyde C（6）和lucialdehyde B（7）。（2）在5-80μg/m L浓度区间,化合物1和3对人鼻咽癌细胞CNE2生长抑制作用较弱,其余化合物均显示一定细胞毒活性,并呈浓度依赖性抑制肿瘤细胞生长。化合物2、4、5、6和7对人鼻咽癌CNE2细胞作用48h的IC50值分别是42.80±1.16、64.35±1.20、55.30±1.32、15.33±1.21和14.17±1.10μg/m L。（3）MTT试验表明,lucialdehyde B呈浓度和时间依赖性抑制鼻咽癌细胞CNE2的生长,作用24、48和72h的IC50值分别25.42±0.87、14.23±0.93和11.60±0.77μg/m L。CFSE荧光标记实验表明,lucialdehyde B作用72h后,CNE2细胞增殖被明显抑制,增殖指数为12.70±0.46,而对照组的增殖指数是31.44±1.73。集落形成实验表明lucialdehyde B对人鼻咽癌细胞CNE2集落形成有抑制作用,0、10、20和40μg/m L lucialdehyde B作用12h后CNE2细胞形成集落数分别为72.33±2.52、63.00±4.36、24.67±2.08和9.33±2.08个。（4）与对照组相比,lucialdehyde B处理48小时后,对CNE2细胞G2/M期略有阻滞作用,抑制细胞周期进程。0、10和20μg/m L lucialdehyde B作用48h后CNE2细胞G2/M期比例分别为6.39、10.00和15.54%。（5）lucialdehyde B能诱导CNE2细胞凋亡,相对于对照组,40μg/m L lucialdehyde B作用48h的凋亡率显著增加为90.93±0.56%。（6）lucialdehyde B呈剂量依赖性下调Ras、c-Raf、Erk1/2以及它们的磷酸化产物p-c-Raf、p-Erk1/2的蛋白表达水平;下调Caspase-9、caspase-3、PARP、Bcl-2和上调Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3、Cleaved-PARP和Bax的蛋白表达水平。（7）与对照组相比,不同浓度的lucialdehyde B作用24h均能使CNE2细胞线粒体膜电位一定程度下降。（8）10、20μg/m L的lucialdehyde B作用24h后均能增强鼻咽癌CNE2细胞MPTP的开放程度,增加CNE2细胞内活性氧（ROS）和Ca2+水平。结论:从灵芝中分离得到的中性三萜lucialdehyde C和lucialdehyde B对人鼻咽癌CNE2细胞生长抑制作用较强,可能是灵芝抗鼻咽癌活性成分。lucialdehyde B抑制人鼻咽癌细胞CNE2的增殖,其作用机制可能与其阻滞细胞周期,抑制Ras/ERK细胞增殖信号通路有关。lucialdehyde B诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡,其作用机制可能与其使细胞内ROS聚集及钙超载,下调Bcl-2,上调Bax,启动线粒体凋亡途径有关。