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目的: 研究miR-4530对结肠癌细胞的细胞增殖、细胞凋亡、细胞迁移和侵袭以及细胞周期等细胞功能的影响,并进一步分析相关的细胞信号通路,以探究miR-4530影响结肠癌细胞的分子机制,从而为miR-4530在结肠癌治疗方面的潜在应用提供初步的理论基础。 方法: 1)选取结肠癌细胞株SW480和DLD-1进行转染和筛选,构建相应的空载对照组、miR-4530高表组和miR-4530低表组的稳转细胞株。 2)接下来miR-4530对结肠癌细胞增殖能力的影响采用CCK-8实验来测定;miR-4530对细胞克隆形成能力的影响通过克隆形成实验来检测;miR-4530对结肠癌细胞的细胞周期和细胞凋亡能力的影响通过流式细胞术来测定;miR-4530对结肠癌细胞的迁移和侵袭能力的影响利用Trans-well实验来检测。 3)通过Western Blot 检测P38MAPK/HSP27通路中的关键蛋白(P38MAPK、HSP27、p-HSP27)。 4)在SW480稳转细胞株和DLD-1稳转细胞株中加入P38MAPK通路抑制剂,检测细胞迁移能力的变化。 结果: 1)成功构建结肠癌细胞株SW480和DLD-1的空载对照组、miR-4530高表组和miR-4530低表组的稳转细胞株。 2)高表miR-4530后,SW480细胞株和DLD-1细胞株的增殖能力和克隆形成能力降低;低表miR-4530后,SW480细胞株的增殖能力和克隆形成能力变化不明显,DLD-1细胞株的增殖能力和克隆形成能力明显提高。 3)高表miR-4530后,SW480细胞株和DLD-1细胞株的细胞周期均受到阻滞,凋亡能力也明显增强;低表miR-4530后,SW480细胞株的周期和凋亡能力均没有明显变化,DLD-1细胞株的细胞周期也没有明显变化,但凋亡能力明显下降。 4)高表miR-4530后,SW480细胞株和DLD-1细胞株的迁移能力和侵袭能力均显著降低;低表miR-4530后,SW480细胞株和DLD-1细胞株的迁移能力和侵袭能力均明显提高。 5)高表miR-4530后,SW480细胞株和DLD-1细胞株P38MAPK、p-HSP27蛋白表达量显著下降;低表miR-4530后,DLD-1细胞株p-HSP27蛋白表达量明显升高而P38MAPK蛋白表达量没有明显变化, SW480细胞株P38MAPK和p-HSP27蛋白表达量均没有明显变化;空载对照组、miR-4530高表组和miR-4530低表组之间HSP27蛋白表达量没有明显变化。 6)在SW480稳转细胞株和DLD-1稳转细胞株中加入适当浓度P38MAPK通路抑制剂后,SW480细胞株和DLD-1细胞株的迁移能力均明显降低,且组与组之间的差异不明显。 结论: 1)MiR-4530高表之后能够抑制结肠癌细胞的增殖、促进癌细胞的的凋亡,并且能显著抑制癌细胞的迁移和侵袭,表明miR-4530在结肠癌治疗方面有一定的潜在治疗价值。 2)MiR-4530抑制细胞的迁移与P38MAPK/HSP27通路相关。