【摘 要】
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大量的研究结果都已证实:肝炎病毒的感染是引发人类肝硬化和原发性肝癌的主要原因,而原发性肝癌是5种人类最严重的癌症之一,全世界每年至少有125万人死于肝癌。常规用于治疗原发
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大量的研究结果都已证实:肝炎病毒的感染是引发人类肝硬化和原发性肝癌的主要原因,而原发性肝癌是5种人类最严重的癌症之一,全世界每年至少有125万人死于肝癌。常规用于治疗原发性肝癌的方法是手术、放疗和化疗。但对于肝癌晚期的患者,手术、放疗和化疗已经没有意义,甚至会更加恶化病情。因为,放疗和化疗没有特异性,不仅会消灭癌细胞,也会杀伤正常细胞。随着随机肽展示技术和高效组织器官靶向肽筛选技术的发展,肝癌导向治疗有可能成为现实。
本项研究采用DNaseⅠ随机酶解及不定向连接T7噬菌体载体两臂的方法分别构建了甲肝病毒和乙肝病毒全基因随机肽展示库。首先用正常肝细胞株L02和肝癌细胞株HepG2进行数轮体外亲和淘洗,获得初步富集的亲和噬菌体。再用以相应细胞株诱导的荷瘤裸鼠,进行进一步的体内富集。将最后一轮富集的高亲和力噬菌体单克隆化,纯化DNA,扩增插入片断,并进行插入片断的序列分析。结果获得一条插入片断的核酸序列及推测的氨基酸序列。为了顺利进行后续的研究工作,还需要增加积累单克隆化噬菌体插入片断的序列分析结果。
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