研究背景:蛛网膜下腔出血（Subarachnoidhemorrhage,SAH）是一种神经系统危重症病,具有高发病率和高死亡率的特点,约占所有卒中类型的5-7%,严重影响我国居民的健康。早期脑损伤是SAH后脑组织损伤病理过程的重要组成部分,与SAH后迟发性脑损伤有关,是影响SAH患者预后的重要因素。乙酰辅酶A合成酶2（Acetyl-coenzyme A synthetase2,ACSS2）是参与哺乳动物能量代谢及脂质合成的蛋白酶,近年来有研究报道它还能作为表观遗传调节因子影响长期记忆及自噬基因转录。自噬作为细胞在应激状态下的自我降解受损及非必要细胞器的过程,为细胞提供足够的能量和必要的原料以对抗应激,对创伤性脑损伤、神经退行性病变、脑卒中等多种神经系统疾病都有保护作用。然而,目前还没有关于ACSS2在SAH后调控早期内源性保护作用的研究,其机制也尚不明确。因此,本研究旨在探究ACSS2对小鼠SAH后早期神经保护作用及相关机制。方法:1.为探究ACSS2在SAH后变化情况,我们通过体内及体外双模型检测SAH后不同时间点ACSS2的表达情况。根据时间点不同分为以下几组:Sham,6h,12h,24h及72h。通过Western blot、免疫组化、Nissl染色方法检测损伤后不同时间点ACSS2表达情况及神经元状态。2.为了探究ACSS2中的神经保护作用是否与细胞自噬和细胞凋亡有关,我们通过侧脑室注射腺相关病毒的方法调节ACSS2在蛛网膜下腔出血后小鼠脑组织中的表达。将C57BL/6小鼠及原代神经元随机分为对照组、蛛血组、蛛血+空载对照组、蛛血+干预组。通过Western blot及qPCR检验ACSS2调控情况。Western blot及免疫组化检测上述分组中自噬相关蛋白（ATG5、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ）及凋亡相关蛋白（Bcl-2、Caspase3、Bax）的表达情况。使用Nissl染色观察调控ACSS2表达后神经元形态的变化情况。此外,通过TUNEL染色检测不同组别中神经元凋亡情况。3.为了探究ACSS2对SAH后脑水肿及神经功能的影响,将C57BL/6小鼠随机分为假手术组（Sham）、蛛血组（SAH）、蛛血+空载对照组（SAH+AAV-NC）、蛛血+干预组（SAH+AAV-ACSS2）。在构建体内SAH模型后24小时对各组小鼠进行神经功能评分,随后取小鼠脑组织测量脑组织水肿情况。用Nissl染色法观察大脑皮质神经元变化情况。结果:1.ACSS2在SAH后的大脑皮层和经OxyHb处理的原代神经元中表达量以时间依赖的方式下调。ACSS2在SAH后6h开始降低,并持续至整个早期脑损伤期间。与Sham组相比,ACSS2蛋白表达在SAH后6h开始降低,并在SAH后24h达到低值。2.免疫组化和免疫荧光染色显示,ACSS2在原代神经元的细胞质和细胞核中表达,主要集中在细胞核中。3.ACSS2可缓解SAH引起的神经功能缺失、颅内水肿和神经元变性。4.与Sham组相比,SAH后小鼠脑组织中自噬相关蛋白（ATG5,LC3Ⅰ、LC3Ⅱ）及促凋亡蛋白（Caspase3、Bax）明显升高,而抗凋亡蛋白（Bcl-2）表达下降,细胞形态发生明显皱缩样改变。通过病毒上调ACSS2表达后,自噬相关蛋白（ATG5、LC3）表达进一步增加。同时,促凋亡蛋白（Caspase3、Bax）表达降低,抗凋亡蛋白（Bcl-2）表达升高,细胞形态也得到改善。结论:通过体内及体外试验的双重验证,我们的研究结果表明,ACSS2可能上调蛛网膜下腔出血后ATG5诱导的自噬途径,并缓解SAH早期脑损伤中的神经元凋亡。此外,ACSS2可通过缓解脑水肿和改善神经功能发挥神经保护作用。