【摘 要】
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植物内生真菌被认为是一种获得结构新颖以及具有生物活性次生代谢化合物的重要来源,由于微生物代谢的速度快,培养成本低,对植物内生真菌化学成分的研究提供一条经济快捷获取活性化合物的路径。短距乌头（Aconitum brevicalcaratum（Finet＆Gagnep.）Diels）是一种传统中药,其根用于治疗咳嗽、感冒和各种疼痛,主要活性成分为二萜生物碱,目前对短距乌头的植物化学研究及其内生真菌的研
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植物内生真菌被认为是一种获得结构新颖以及具有生物活性次生代谢化合物的重要来源,由于微生物代谢的速度快,培养成本低,对植物内生真菌化学成分的研究提供一条经济快捷获取活性化合物的路径。短距乌头（Aconitum brevicalcaratum（Finet＆Gagnep.）Diels）是一种传统中药,其根用于治疗咳嗽、感冒和各种疼痛,主要活性成分为二萜生物碱,目前对短距乌头的植物化学研究及其内生真菌的研究十分有限。本论文对两株来自短距乌头的内生真菌烟曲霉（Aspergillus fumigatus M1）和层叠韧革菌（Stereum complicatum M2）的次生代谢产物进行了分离分析,并对分离得到的化合物进行了活性筛选。第一章对乌头内生真菌以及烟曲霉和韧革菌属真菌化学成分研究现状作了综述。乌头内生真菌的种类丰富,可以代谢生成种类丰富、活性多样的化合物,比如azaphone衍生物、细胞松弛素、莽草酸类似物,并报道有抗菌、抗病毒活性和细胞毒活性等生物活性。烟曲霉是一种存在于人类和动物中的一种机会性病原体,它主要代谢吲哚二酮哌嗪生物碱、Tryptoquivaline类化合物、萜类化合物、Ergot类生物碱等,研究发现它们具有广泛的生物活性。韧革菌属真菌是生物活性化合物的重要来源之一,倍半萜是其最常见的次生代谢产物。第二章介绍了来自短距乌头根部分离的一株烟曲霉（Aspergillus fumigatus M1）的次生代谢产物分离分析,分离得到1个新化合物fumigatanol（1）,10个已知化合物,分别是E-β-trans-5,8,11-trihydroxybergamot-9-ene（2）、fumitremorgin C（3）、12,13-dihydroxyfumitremorgin C（4）、verruculogen TR-2（5）、brevianamide F（6）、pseurotin A（7）、14-norpseurotin A（8）、orcinol（9）、（1S,2R）-2-phenyl-N-propylcyclopropanamine（10）、β-sitosteryl linoleate（11）。通过核磁共振波谱、高分辨质谱、红外、以及理论计算,对新化合物1的结构与构型进行了确定。对化合物的抗菌活性以及抗乙酰胆碱酯酶活性进行了测试,化合物4、5、7对枯草芽孢杆菌以及化合物7对金黄色葡萄球表现出微弱抗菌活性。所有被测化合物均没有发现明显抗乙酰胆碱酯酶活性。同时对化合物1的细胞毒活性进行了测试,结果表明在40μM浓度下,化合物1对肝癌SMMC-7721细胞有一定抑制活性。第三章对来自短距乌头叶子中分离的一株层叠韧革菌（Stereum complicatum M2）的次生代谢产物及生物活性进行研究,从这株层叠韧革菌的发酵液中分离得到11个已知化合物,分别是3-chloro-5-methoxy-6-propylbenzoate（1）、1-oxo-2α,3β-dihydroxytotarol（2）、orcinol（3）、sterostrein V（4）、sterostrein E（5）、sterostreins P（6）,sterostrein D（7）、sterostrein C（8）、sterostreins A（9）、2,3,6-trihydroxycaryol-5-en-7-one（10）、（1R,2S,4R）-1-isopropyl-4-methylbicyclo[3.1.0]hexan-2-ol（11）。对化合物的抗菌活性以及抗乙酰胆碱酯酶活性进行了测试,化合物4对枯草芽孢杆菌有一定的抑制活性,其MIC值为64μg/m L。化合物3、4、5、6和7对金黄色葡萄球菌有比较强的抑制活性,其MIC值分别为32、16、8、4和32μg/m L。化合物1、2、6和8对白色念珠菌有一定的抑制活性,其MIC值分别为64、64、64和32μg/m L。但是并没有发现测试化合物有明显抗乙酰胆碱酯酶活性。利用高效液相色谱仪对Stereum complicatum M2菌株液体发酵化学成分随发酵时间变化进行了分析,试图对文献中提到的单体化合物4、5与二聚体化合物8之间的生源途径关系进行验证,实验结果无明显现象证明其存在关联。
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